尼美舒利对食管癌Eca-109细胞增殖及COX-2和P27kip1表达的影响

目的观察选择性COX-2抑制剂尼美舒利对食管癌Eca-109细胞增殖、凋亡及COX-2表达的影响,并探讨与抑癌基因P27kip1的关系。方法用MTT法测定Eca-109细胞增殖;透射电镜及流式细胞仪观察细胞凋亡及细胞周期;RT-PCR法检测Eca-109细胞COX-2mRNA表达变化;Westernblot检测COX-2和P27kip1蛋白表达变化。结果尼美舒利以时间、剂量依赖方式抑制Eca-109增殖,增加G0/G1期细胞比例;呈剂量依赖性诱导细胞凋亡,降低COX-2mRNA和蛋白表达,上调P27kip1蛋白表达。结论尼美舒利可抑制食管癌Eca-109细胞增殖,使细胞周期受阻于G0/G1期并诱导细胞凋亡。其机制可能是通过下调COX-2表达和上调P27kip1蛋白表达水平实现的。     

流式细胞术PI染色法检测胃蛋白酶消化时间对细胞凋亡的影响

目的 探讨凋亡样品制备时,胃蛋白酶消化时间对凋亡的影响.方法 采用0.5%胃蛋白酶分别对胃癌、食管癌、乳腺癌、淋巴瘤和卵巢癌细胞株进行消化,观察不同时间点流式细胞术PI染色法检测凋亡的情况.结果 多数细胞株消化时间在20～30 min时所形成的凋亡峰位较好,而肝癌、淋巴瘤细胞则在15～20 min时形成的峰位较好.结论 流式细胞术PI染色法检测凋亡时,需不断摸索实验的条件,才能得到最佳结果.     

青蒿琥酯与阿霉素联用对人食管癌细胞生长及凋亡的影响

目的 探讨青蒿琥酯(AS)与阿霉素(ADM)联合应用对人食管癌细胞Ec9706生长及凋亡的影响,并探讨其机制.方法 应用流式细胞仪检测AS与ADM联合应用前后人食管癌细胞Ec9706凋亡率及细胞内ADM的含量;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法 检测AS作用前后细胞三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)mRNA的表达.结果 ADM单独作用24 h后,Ec9706细胞的凋亡率同对照组比较显著性增高(P<0.05).AS与不同浓度的ADM联合作用后,Ec9706细胞的凋亡率及细胞内ADM的含量同单独应用ADM组比较显著增高(P<0.01).RT-PCR检测发现AS作用24 h后Ec9706细胞ABCG2 mRNA表达显著降低(P<0.05).结论 ADM对人食管癌细胞Ec9706具有生长抑制和诱导凋亡的作用,AS可以使其作用明显增强,其发生机制可能是通过AS下调ABCG2 mRNA表达,增加细胞内ADM的含量而实现的.     

HMGB1在类风湿关节炎疾病活动中的作用及其与EMMPRIN/CD147表达的相关性研究

目的:探讨高迁移率族蛋白(HMGB)1在类风湿关节炎(RA)病情活动中的作用机制.方法:选取RA患者74例(活动期38例、非活动期36例)及健康对照者26例.采用RT-PCR方法检测外周血单个核细胞(PBMC)中HMGB1 mRNA的表达,酶联免疫吸附(ELISA)方法检测血清中HMGB1蛋白的表达.采用流式细胞术分析CD14+单核细胞表面Toll样受体(TLR)4和EMMPRIN/CD147的表达.结果:活动期RA组HMGB1 mRNA相对表达量和蛋白水平均高于健康对照者和非活动期RA患者[分别为2.63 vs 0.71,0.93和 (10.20±1.24 vs 7.48±1.75,8.31±1.85)ng/ml)](P＜0.01).活动期RA患者CD14+单核细胞上TLR4和CD147的表达量均显著高于非活动期和健康对照组(P＜0.01),非活动期患者显著高于健康对照组(P＜0.01).TLR4和CD147双阳性细胞数量和蛋白的相对表达量在活动期RA患者中均最高.血清中HMGB1蛋白水平与ESR、CRP、RF、及关节X线分期均呈正相关,亦与TLR4和CD147的表达呈正相关(P＜0.05或P＜0.01).结论:RA患者PBMC具有合成和分泌HMGB1蛋白的功能.HMGB1可能通过与TLR4结合激活CD14+单核细胞并表达CD147,促进其向滑膜组织迁移而加速骨质破坏.     

细胞周期相关基因在食管癌变中的表达及意义

目的 研究细胞周期调控因子细胞周期素25A (cell division cycle 25 A,CDC25A)、转化生长因子-β(TGF-β)、Smad3基因在食管上皮癌变过程中的表达及其意义.方法 利用RT-PCR方法检测44例同一个体的食管癌、食管不典型增生组织、食管正常黏膜组织中CDC25A、TGF-β、Smad3 mRNA的表达.结果 从食管正常黏膜组织到不典型增生组织和食管癌组织,CDC25A基因表达呈逐渐增高趋势,TGF-β、Smad3基因表达呈逐渐下降趋势,三者在食管癌组织和正常组织之间有显著差异(P＜0.05).低分化鳞癌中CDC25A基因表达显著高于中高分化鳞癌(P＜0.05),低分化鳞癌中TGF-β、Smad3基因表达显著低于中高分化鳞癌(P＜0.05).其表达量与年龄和性别无关(P＞0.05).结论 CDC25A、TGF-β、Smad3的表达失衡与食管癌的发生、发展有密切关系,在食管癌变早期即已出现,可以作为早期诊断的指标.     

大肠癌细胞DNA倍体分析及其临床意义

应用流式细胞术对５２例大肠癌行肝瘤、交界和残端组织ＤＮＡ倍体分析，以深讨倍体与大肠癌组织学类型、癌浸润深度、淋巴结转移以及临床分期的关系。结果：肿瘤组织均为异倍体，残端组织为二倍体，少数病例残端组织学阴性，而ＤＮＡ含量仍为异常值，Ｓ．Ｇ２、Ｍ（细胞周期）增高，细胞增殖活跃。     

定量研究乳腺癌ras癌基因产物p21的表达

应用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术，对４３例乳腺癌的癌基因ｒａｓｐ２１的表达进行了定量研究。并探讨了与ＤＮＡ倍体和细胞增殖活性之间的关系。结果表明，乳腺癌ＤＮＡ倍体出现率和ＤＩ值均随肿瘤的恶性程度增高而增高。ｒａｓｐ２１的表达结果显示，肿瘤的分化程度与ｒａｓｐ２１的表达密切相关。ｐ２１表达阳性率随组织学分级而增高，Ⅰ级ｐ２１￣＋为４４．４％（４／９例），Ⅱ级ｐ２１￣＋为８７．５％（１４／１６例），Ⅲ级ｐ２１￣＋９４．４％（１７／１８例）．并发现乳腺癌倍体和细胞增殖活性与ｒａｓｐ２１的表达密切相关，异倍体肿瘤ｐ２１￣＋表达明显高于二倍体肿瘤，而ｒａｓｐ２１表达阳性的乳腺癌，其增殖指数值明显高于ｐ２１表达阴性的乳腺癌。     

甲状腺癌P^16基因的表达及临床意义

目的：对甲状腺癌ｐ１６基因的描述及临床意义的探讨。方法：应用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术,对甲状腺癌和甲状腺癌细胞Ｐ１６基因蛋白表达进行定量研究。结果：甲状腺癌Ｐ１６蛋白表达量明显低于甲状腺腺瘤（Ｐ＜０．０１）;Ｐ１６蛋白表达随甲状腺恶性程度的增高而下降（Ｐ＜０.０５）。结论：Ｐ１６基因失活与甲状腺癌发生有关,Ｐ１６蛋白表达缺失与肿瘤分化不良有关,可作为临床判断肿瘤分化程度和预后的参考指标之一。     

人乳头瘤病毒16型E7基因修饰小鼠骨髓树突状细胞诱导的细胞免疫应答

利用人乳头瘤病毒16型E7(HPV16-E7)基因修饰小鼠骨髓树突状细胞(DC)，探讨其修饰的DC是否能使机体产生特异性的免疫反应，为以DC为基础的主动性免疫基因治疗提供实验依据。     

杂色曲霉素对人外周血单个核细胞TAP1及LM P2基因表达的影响

目的:探讨杂色曲霉素(ST)对体外培养的人外周血单个核细胞(HPBMc)抗原加工递呈相关基因TAP1、LMP2表达的影响.方法:采用RT-PCR和FCM方法,分析5种浓度ST处理对体外培养的HPBMc TAP1、LMP2基因在mRNA和蛋白水平表达的影响.结果:RT-PCR检测结果表明,ST处理24h后,低浓度ST组(0.125mg/L、0.25mg/L)HPBMc TAP1 mRNA相对表达量明显高于对照组,而较高浓度组(0.5mg/L、1mg/L和2mg/L)TAP1 mRNA则明显低于对照组,尤以1mg/L和2mg/L组为著.FCM定量分析表明,低浓度ST组HPBMc TAP1蛋白平均表达量略低于对照组,但无统计学意义,而较高浓度组TAP1表达则明显低于对照组(P＜0.05).在0.125mg/L到1mg/L浓度范围内,各ST处理组HPBMc LMP2蛋白表达量和mRNA的相对表达量均高于对照组.结论:ST对体外培养的HPBMc TAP1mRNA表达和蛋白表达的影响按ST剂量不同而变化,在0.125～1mg/L浓度范围内ST在mRNA及蛋白水平均可剂量依赖地提高体外培养的HPBMc LMP2的表达.