软骨发育不全患者FGFR3突变基因分析简

目曲对9例初步诊断为软骨发育不全患者及其父母进行成纤维生长因子受体3（fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3）基因突变筛查,以判定患者是否为软骨发育不全,同时验证中国人群中FGFR3是否为引起软骨发育不全的致病基因。方法提取9例患者及父母的外周血液DNA,并针对FGFR3外显子10序列设计引物,进行PCR扩增、纯化,并对PCR扩增产物进行毛细管电泳测序。结果9例患者的FGFR3基因第10外显子1138位点均发生了G〉A碱基转换,使得其所编码蛋白FGFR3的第380位氨基酸由甘氨酸（G1y）变为精氨酸（Arg）。结论通过毛细管测序,9例患者均可以确诊为软骨发育不全,同时也验证了在中国人群中FGFR3基因是导致软骨发育不全的致病基因,G1138A为热点突变。     

乳腺癌间质成纤维细胞α-SMA表达与肿瘤增殖及微血管密度的关系

成纤维细胞 ( fibroblast) 是乳腺癌间质的主要成分 , 它决定肿瘤的硬度 . 与正常乳腺间质的成纤维细胞不同 , 乳腺癌间质出现α -平滑肌肌动蛋白 ( α -smooth muscle actin, α -SMA) 表达的成纤维细胞 , 即肌纤维母细胞 ( myofibroblast) . 乳腺癌间质的肌纤维母细胞能特异性地分泌胰岛素样生长因子 -Ⅱ ( IGF-Ⅱ ) 、尿凝血酶原激活物 ( uPA) 等生长因子和基质蛋白 [1,2], 促进乳腺癌的浸润与转移 . 有关乳腺癌间质肌纤维母细胞的临床病理学意义报道较少 , 我们用免疫组化的方法观察了 69例乳腺癌组织间质的成纤维细胞α -SMA的表达情况 , 并分析了 60例浸润性乳腺癌间质成纤维细胞α -SMA表达与乳腺癌细胞增殖状况和肿瘤微血管密度的关系 .     

基质小泡蛋白与骨矿化

基质小泡（MV）在骨矿化过程起始阶段起着重要作用。MV富含多种蛋白,通过调节焦磷酸盐与磷酸盐比率、提供羟基磷灰石结晶成核位点及作为离子通道调节MV内外钙离子和磷酸盐浓度等在骨矿化过程中发挥重要作用。MV内相关蛋白基因突变经一系列调节途径产生相应的骨矿化异常,如酶活力失调、离子浓度失衡等。该文就MV中重要蛋白在骨矿化过程中的作用,以及其基因突变产生矿化异常等作一综述。     

多西紫杉醇诱导前列腺癌PC3细胞凋亡的蛋白质组学研究

目的 比较多西紫杉醇诱导激素非依赖性前列腺癌PC3细胞凋亡前后的差异表达蛋白。方法 采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测不同浓度多西紫杉醇对前列腺癌PC3细胞增殖的抑制作用;应用胶内差异凝胶电泳对PC3细胞凋亡前后蛋白质进行双向凝胶电泳图谱分析,分离并筛选鉴定相关差异蛋白。结果 半数抑制浓度IC50为20nmol/L。双向凝胶电泳图谱发现表达差异较为明显的18个蛋白质位点,其中8个蛋白表达上调,10个蛋白表达下调。结论 本研究发现的部分差异蛋白可能参与激素非依赖性前列腺癌对紫杉醇类药物的耐药作用。     

胰腺癌蛋白表达谱的生物信息学分析

目的:通过生物信息学方法分析胰腺癌蛋白质组学数据。方法:对通过蛋白质组学方法筛选出的98种胰腺癌表达上调蛋白使用NCI-Nature、Osprey1.2.0和DAVID软件分别进行信号通路分析、蛋白质相互作用分析及基因本体论(Gene On-tology,GO)分析。结果:98种基因共涉及50条信号通路,其中富集度P值<0.05的信号通路有15条,最具显著性的为HIFα-转录因子信号通路;98种基因在细胞骨架生成、细胞骨架及蛋白结合3种GO中富集度最为显著;在蛋白相互作用网络中,连接度最高的为Ezrin和Vimentin。结论:利用生物信息学方法对蛋白质组学数据进行挖掘,可以为进一步了解胰腺癌的发病机制提供新的思路。     

C14orf166异位表达对Hela细胞增殖与迁移能力的影响

目的:研究C14orf166异位表达对肿瘤细胞增殖和迁移能力的影响.方法:构建C14orf4166真核表达载体并转染Hela细胞,采用RT-PCR及蛋白质印迹法技术检测基因表达,用MTT、Transwell的方法检测C14orf166蛋白在Hela细胞的异位表达对其增殖和迁移能力的影响.结果:成功构建pcDNA3.1-C14orf166真核表达载体并使其在Hela细胞中大量表达,初步研究发现重组质粒转染组与空质粒转染组相比,细胞迁移能力增强,细胞穿膜数分别为39.6±11.7和25.7±8.6,而细胞增殖能力并没明显变化.结论:获得了真核表达载体pcDNA3.1-C14orf166,初步证实C14orf166表达能促进Hela细胞的迁移,为进一步研究c14orf166的功能奠定了基础.     

基质小泡蛋白与骨矿化

基质小泡(MV)在骨矿化过程起始阶段起着重要作用。MV富含多种蛋白,通过调节焦磷酸盐与磷酸盐比率、提供羟基磷灰石结晶成核位点及作为离子通道调节MV内外钙离子和磷酸盐浓度等在骨矿化过程中发挥重要作用。MV内相关蛋白基因突变经一系列调节途径产生相应的骨矿化异常,如酶活力失调、离子浓度失衡等。该文就MV中重要蛋白在骨矿化过程中的作用,以及其基因突变产生矿化异常等作一综述。     

颞叶癫痫大鼠模型海马蛋白质组学的研究

目的 研究颞叶癫痫大鼠海马组织差异表达的蛋白质,为探讨癫痫发病机制和寻找新的治疗靶点提供依据.方法 运用双向荧光差异凝胶电泳(2D-DIGE)和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对氯化锂-匹鲁卡品致痫大鼠海马组织的差异蛋白进行分析鉴定.结果 检测到颞叶癫痫大鼠海马组织中19个差异表达的蛋白质点...     

经左心房内吻合治疗心下型完全性肺静脉异位引流

目的 评估经左心房内径路吻合治疗心下型完全性肺静脉异位引流(total anomalous pulmonary venous connection,TAPVC)的疗效.方法 2012年3月至2015年4月,采用左心房内路径吻合法治疗心下型TAPVC 14例.男9例,女5例.年龄8～42 d,平均(28.9±6.73)d;体重2.8～5.4kg,平均(3.9±1.43)kg.所有患儿均在全身麻醉、中低温体外循环下手术.充分游离左、右肺静脉、共汇静脉、垂直静脉后,在心脏自然状态下观察共汇静脉-垂直静脉与心脏位置关系,对共汇静脉-垂直静脉走形位于左房或房间隔后位的14例患儿,采用左心房内径路将肺静脉共汇-垂直静脉与左心房后壁吻合.结果 所有患儿均顺利完成手术,体外循环时间89～141 min,平均(118.7±22.14)min;主动脉阻断时间46～67 min,平均(52.1±6.54)min.术后呼吸机辅助时间3～7 d,平均(4.19±1.04)d.术后早期(46 h)1例患儿因消化道出血死亡,其余13例患儿中,低心排出量综合征8例、室上性心动过速2例、气胸2例、肺部感染7例、经积极治疗后均痊愈出院.13例患儿出院后1个月、3个月、1年随访率均为100％.结论 对共汇静脉-垂直静脉走行位于左房或房间隔后的心下型TAPVC,采用左心房内路径吻合法治疗能够取得满意的临床疗效.     

基于诱导多能干细胞技术的罕见病细胞模型及其应用

罕见病的研究受限于样本的可获得性, 对其发病机制了解甚少阻碍了罕见病可行性治疗方法的发现。随着诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPSCs)技术的建立和日趋成熟, 越来越多的研究开始利用iPSCs技术把患者来源的体细胞转变为iPSCs, 继而再分化为疾病相关的成体细胞。通过对发病过程和功能学分析, 患者特异性iPSCs细胞模型已成为罕见病研究的宝贵工具。iPSCs技术彻底革新了研究者对罕见病发病机制和治疗方法的研究, 尤其是iPSCs技术结合基因编辑和3D类器官方法, 使得iPSCs在各应用领域包括精准医学领域更具强大优势。本文概括介绍iPSCs技术应用于多种罕见病疾病模型建立, 以及在此基础上进行药物筛选和细胞治疗, 以期为罕见病研究者提供新的思路和启示。