乳腺癌细胞抗原肽修饰树突状细胞的抗肿瘤作用

目的探讨经重组乳腺癌热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)抗原肽复合物修饰后的树突状细胞(dendritic cell,DC)的抗肿瘤作用。方法冻融法获取BALB/C小鼠4T1乳腺癌细胞抗原肽,体外重组HSP70-4T1抗原肽复合物。检测BALB/C小鼠DC经该复合物修饰成熟后IL-12和TNFa的分泌。检测修饰后成熟的DC对BALB/C小鼠脾淋巴细胞的增殖作用及增殖后淋巴细胞对4T1细胞的杀伤功能。BALB/C小鼠注射修饰成熟DC,观察该方法对4T1乳腺癌株的抑制作用。结果0.75μg抗原肽与HSP70结合,可使1×10~6DC成熟;成熟后的5×10~3DC可激活2×10~6小鼠脾淋巴细胞。与直接用HSP70-4T1复合物刺激脾细胞比较,DC途径抗原肽的用量减少40倍。增殖后淋巴细胞对4T1细胞杀伤率为(60.24±6.23)%。接种该DC能有效地抑制肿瘤的生长。结论重组乳腺癌热休克蛋白70-抗原肽复合物能够诱导DC成熟,成熟后的DC能激活淋巴细胞并抑制肿瘤生长。该途径能有效降低肿瘤免疫治疗时抗原肽的使用剂量。     

乌司他丁对重症急性胰腺炎的疗效及其作用机制的研究

重症急性胰腺炎是一个有多种炎症因子如细胞因子、血小板活化因子(PAF)、一氧化氮(NO)、氧自由基(OFR)、磷脂酶A2等参与的复杂病理生理过程,炎症因子之间相互作用引发急性全身炎性反应综合征(SIRS),导致多器官功能衰竭(MOSF)[1]。本实验采用牛磺胆酸钠诱发大鼠重症急性胰腺炎合并MOSF,观察血清中TNF-α、NO及OFR的改变,同时观察乌司他丁对TNF-α、NO及OFR的影响及其治疗作用,并探讨其作用机理。材料与方法一、动物分组:Wistar大鼠70只(同济医科大学动物实验中心提供),250～300克,雌雄各半,随机分为4组:(1)正常组:10只,剖腹…     

乳头状甲状腺癌的颈部淋巴结转移规律与手术方式

目的探讨甲状腺乳头状癌颈部淋巴结的转移规律以及清扫范围的合理选择。方法同顾性分析近4年多米收治的457例乳头状甲状腺癌患者的临床资料。结果全组患者均接受常规甲状腺双侧全切加颈深（Ⅲ＋Ⅳ区）组技巾央（Ⅵ区）组颈部淋巴结清扫术。颈部淋巴结总转移发生率为63．67％（291／457），中央组淋巴结转移发生率为59．08％（270／457），颈深组淋巴结转移发生率为29．76％（136／457）。当癌肿直径〉1cm或癌肿突破甲状腺包膜、侵犯肌肉时各区淋巴结转移的发生率明显增加（P〈0．05）。全组无手术或住院期间死亡。结论乳头状甲状腺癌最常见的淋巴结转移为巾央组淋巴结，其次为颈深组（Ⅲ＋Ⅳ区）的淋巴结，初次手术应常规清扫双侧中央组淋巴结，当肿块直径〉1cm或癌肿突破甲状腺包膜和／或侵犯肌肉时宜同时，清扫同侧的颈深组淋巴结。     

瘤内注射pSTbAT-脂质体复合物对裸鼠移植瘤抑制效应的实验研究

目的：构建血管生成抑制因子arresten基因的真核表达载体，并观察瘤内注射质粒DNA-脂质体复合物对裸鼠移植瘤生长的影响。方法：利用PCR方法，由重组质粒pGEM-Arr中扩增出基因；将该基因定向克隆于真核表达载体中。20只裸鼠皮下注射Hepp2细胞，成瘤后以成功构建的质粒DNA-脂质体复合物瘤内注射，治疗后采用免疫组化方法检测肿瘤血管密度，并利用arresten基因瘤内注射的方法对抑制肿瘤的效果进行分析。结果：我们成功构建arresten基因真核表达载体(psTbAT)。实验组肿瘤生长速度较对照组慢(实验组平均15．3个阳性血管／10个视野，对照组平均112．5个阳性血管／10个视野)。结论：瘤内注射arresten基因质粒-DNA复合物能抑制裸鼠移植瘤的血管生成，并能抑制移植瘤的生长。     

人IKBα真核表达载体的构建及其在大鼠肝移植缺血-再灌注损伤中的作用

目的：构建人IxBα真核表达质粒，探讨对大鼠肝移植缺血-再灌注损伤的保护作用。方法：应用RTPCR和重叠延伸PCR技术，得到点突变的人IkBα，定向克隆至PcDNA3．0真核表达载体。将SD大鼠原位肝移植模型分为三组：Ⅰ组为空白对照组，Ⅱ组为PcDNA3．0空载体转染组。Ⅲ组为PcDNA3．0-IkBα转染组。分别于术后2、12、24和72h取材。用RT—PCR测定肝组织中核转录因子（NF—KB）065、肿瘤坏死因子α（TNF—α）、细胞间黏附分子1（ICAM-1）mRNA的表达及肝功能变化。结果：经酶切和DNA序列测定鉴定，证实重组质粒构建正确；Ⅲ组与Ⅰ组、Ⅱ组相比：NF—kBp65、TNFα、ICAM-1mRNA的表达水平及肝酶学指标均明显降低（P〈0．05）。结论：真核表达质粒PcDNA3．0-IkBα构建成功，IkBα通过抑制NF—kBp065mRNA的表达及其核移位减轻大鼠肝移植缺血-再灌注损伤。     

甲状腺癌患者术中喉返神经的显露及损伤预防

背景与目的:喉返神经(recurrent laryngeal nerve,RLN)损伤是甲状腺手术最为严重的并发症之一,尤其在甲状腺癌手术时更易发生.喉返神经损伤和防护一直是甲状腺外科关注的焦点.本文旨在探讨甲状腺癌患者术中RLN显露及损伤的预防.方法:同顾性分析2002年1月至2006年7月收治的282例行甲状腺癌手术患者临床资料.结果:282例甲状腺癌患者术前4例发现RLN损伤,9例术中发现RLN受累,在环状软骨弓外下方2～3 cm区域气管食管间沟附近稍加分离即能见到RLN 505条(505/564,89.5%).所有患者在行颈淋巴结清扫前均未全程显露RLN,分离时紧靠甲状腺进行;对行颈部淋巴结清扫的患者先行RLN的全程显露.本组无手术死亡,术后并发症包括血肿1例,乳糜漏1例.1例冈肿瘤侵犯行单侧RLN切除;2例再手术患者行RLN松解及1例RLN吻合术,术后发音有所改善;术前检查无声带麻痹者,发生暂时性声嘶9例,永久性声嘶2例,1例因肿瘤侵犯喉行全喉切除及气管造口术.结论:RLN位于环状软骨弓外下方2～3 cm区域处位置表浅,易于显露.甲状腺癌在行甲状腺切除时,不必全程显露RLN:若需行颈淋巴结清扫,可先切除甲状腺,在其局部显露部位开始显露其全程,精细无血操作,能有效预防术中RLN损伤.损伤一经诊断应尽早修复.     

mitofusin-2对乳腺癌细胞RECK基因表达及MMPs活性的影响

目的 探讨线粒体融合素基因-2(mitofusin-2)对乳腺癌MCF-7细胞株中RECK表达及MMP-9,MMP-2活性的影响.方法 利用脂质体lipofectamine2000将构建的重组真核表达质粒pEGFPmfn2转染MCF-7细胞.RT-PCR检测细胞mfn2和RECK基因mRNA的转录水平;Weastem Blot法检测mfn2及RECK蛋白的表达;明胶酶谱试验检测转染前后MMP-9及MMP-2的活性.结果 转染pEGFP-mfn2质粒的MCF-7细胞可以稳定高表达Mfn2;RECK基因在转染空质粒组和未转染组细胞中无表达;转染mfn2基因后RECK基因mRNA转录及蛋白的表达显著升高,且MMP-9及MMP-2的活性显著降-低(P＜0.05).结论 mfn2基因可激活MCF-7细胞中RECK基因的表达,并显著抑制其MMP-9及MMP2的活性.该途径可能是mfn2基因抗肿瘤作用的新机制.     

十二指肠球后溃疡并大出血的治疗

十二指肠球后溃疡发生率低,约占十二指肠溃疡5%～10%,内科治疗效果差,手术困难犤1,2犦,而且其并发症较多,若处理不当,易产生严重并发症,应引起高度重视。1.临床资料:1989年至2001年我院收治8例球后溃疡并大出血患者,其中男7例、女1例,年龄33～48(平均42)岁。并发出血次数2～5次,每次出血均出现休克。主要表现为呕血及便血,以便血为主。所有病例均经内科保守治疗无效后手术。手术均采用十二指肠球部及降部前壁纵行切开,手术者用手指压迫基底部出血点,直视下8字缝合;确切止血后,探查十二指肠降部远端是否有多发溃疡存在,再行胃十二指肠动脉结…     

IL-23、 IL-17在桥本氏甲状腺炎患者甲状腺组织中的表达

目的:检测桥本甲状腺炎(HT)甲状腺组织中白细胞介素(IL)-23、IL-17的表达,并探讨IL-23/IL-17在HT免疫病理中的作用。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法,检测20例HT患者和15例正常甲状腺组织中IL-23p19、IL-17mRNA和蛋白的表达水平。结果:RT-PCR显示IL-23p19、IL-17mRNA在HT甲状腺组织中的平均表达水平分别为1.0154±0.5749、0.5952±0.2513,正常对照组的表达水平分别为0.0929±0.0242、0.1537±0.0855;两组比较,HT患者甲状腺组织IL-23p19、IL-17mRNA的表达水平显著高于正常对照(P<0.05);且在HT中,IL-23p19和IL-17mRNA的表达存在正相关(P<0.01,r=0.861)。West-ernblot检测显示IL-23p19、IL-17蛋白在HT甲状腺组织中的平均表达水平明显高于正常对照(P<0.05)。结论:IL-23、IL-17在HT患者甲状腺组织中的协同过表达,提示IL-23/IL-17可能参与了HT的免疫病理过程。     

超声刀在295例开放甲状腺手术中的应用

目的探讨超声刀在开放甲状腺手术中的应用价值及操作技巧。方法回顾性分析2008年4月至2010年9月295例超声刀行开放甲状腺手术组（超声刀组）和308例常规开放甲状腺手术（传统组）的临床资料,对比2组的切口长度、总手术时间、术中出血量、术后引流量及手术并发症。结果超声刀组与传统组比较,平均手术时间（min）：42（70±55）VS68（97．5±67．5）;平均术中出血量（m1）：18（30±25）VS45（65±45）;平均术后引流量（m1）：25（40±30）VS55（92．5±57．5）,差异有统计学意义（P〈0．05）。2组平均切口长度（cm）：6．4（9±6）vs6．9（9．5±5．5）;手术并发症（例）：4vs5,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论超声刀组在开放甲状腺手术中有一定优势,具有手术时间短、出血少、操作相对简单、易于掌握以及安全有效等优点,但医疗费用高于传统手术。