同功酶和它的临床应用

一、同功酶的基本概念本世纪五十年代,生物化学的飞跃发展开创了“分子生物学”的新时代,自从开始揭开生命本质的体现者——蛋白质的秘密以来,对体内生化反应中具有特异性催化功能的酶蛋白的认识上也有了新的飞跃。这就给临床酶学领域带来了一个划时代的发展,产生了“同功酶”的     

胎盘型谷胱甘肽S-转移酶在人胃癌、大肠癌及肾癌细胞中异常表达的免疫电镜定位

用抗胎盘型谷胱甘肽S-转移酶(GST-π)抗体和胶体金免疫电镜方法进行了3例胃癌、2例大肠癌、1例肾癌和6例癌旁组织细胞内GST-π的定位,实验结果,胃癌、大肠癌细胞中GST-π胶体金颗粒主要分布于癌细胞的线粒体、粗面内质网及核内(常染色质内分布为主),而在肾癌细胞中GST-π胶体金颗粒分布于溶酶体和核(异染色质内分布为主),但是在癌旁组织中,除1例结肠癌的癌旁组织腺上皮细胞胞浆内GST-π胶体金颗粒阳性外,其余5例均为阴性。因此,我们认为GST-π在胃癌、大肠癌及肾癌细胞的超微结构中异常表达反映出GST-π在这些癌细胞内处于应激状态。     

Ehrlich腹水癌和肺癌带瘤小鼠肝脏某些肿瘤标志酶活性的变化

本文报道Ehrlich腹水癌和肺癌带瘤小鼠肝脏中细胞色素P-450(简称P-450)、UDP-葡萄糖醛酸基转移酶(简称UDP-GT)及乳酸脱氢酶(简称LDH)等肿瘤标志酶活性的变化,并在给有机锗化合物(简称Ge)以抑制肿瘤生长时,观察了上述标志酶的变化。Ehrlich腹水癌带瘤小鼠肝微粒体细胞色素P-450含量低于正常对照组,而UDP-GT的“胚胎型”(O-GT)和“新生儿型”(P-GT)活性及肝细胞浆中LDH活性显著增高。在移植肿瘤后,给Ge以抑制肿瘤生长时,小鼠肝脏P-450含量和UDP-GT及LDH活性趋于正常水平。肺癌带瘤小鼠肝脏O-GT和LDH活性均有显著增高,但P-450含量无显著变化。当移植肿瘤后给Ge以抑制肿瘤生长时,肝微粒体O-GT活性趋于正常水平。实验结果表明,Ge对正常小鼠肝脏P-450有抑制作用,而对UDP-GT的胚胎型(O-GT)则有诱导效应。     

INHIBITORY EFFECT OF BOSCHNIAKIA ROSSICA ON DEN-INDUCED PRECANCEROUS HEPATIC FOCI AND ITS ANTIOXIDATIVE ACTIVITIES IN RATS

BoschnikiarossicaFedtsch.etFlerovisaparasiticplantgr0wingonther0otofAlnusplants(BetUlaceae).[']Itisoneofthevaluablemedicinalplantsgr0wingonChangbaiMountainareas,itgrowsgreatlyontheChangbaiMountainatl45orl8O0metersabovesealevel,Jilin,China.Itisals0gr0wsintheDemocraticPeople'sRepublicofKorea(DPRK),JaPanandRussian.Boschiakiarossicawasnamed"BuLaoCa0"(antisenilityplant),becauseithastheeffectsoftonifyingthekidneyandstrengtheningYang,andhasbeenusedasatonicinChina.Weis0latedfouririd0idc0mP…     

大白鼠肝脏化学致癌过程中诱导产生的尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶的纯化及其性质的研究

作者在研究大白鼠肝脏化学致癌过程中,发现尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶(UDP-GT)的分子形式有胚胎型变化。化学致癌剂2-甲基-胆蒽(3-MC)、二乙基亚硝酸胺(DEN)、2-乙酰氨基芴(FAA)以及抗氧化剂2,3-丁基-4-羟基苯甲醚(BHA)均能诱导炎 o-GT(以2-氨基苯酚作为底物的“胚胎型”UDP-GT),苯巴比妥则诱导 p-GT(以酚酞作为底物的“新生儿型”UDP-GT),在肝脏癌前病变(增生性结节)或在高分化型肝癌时,o-GT 活性显著升高,但在低分化型肝癌时o-GT 活性下降;p-GT 活性虽在癌前病变时有所增高,但在肝癌时,无论在高分化型或低分化型,其活性均下降。采用以氨基已烷基琼脂糖凝胶4B(Aminohexyl Sepharose 4B)为载体的疏水性层析法提纯以 DEN 处理的大白鼠肝脏 o-GT 和 p-GT,其纯化度分别为100倍和50倍,两者的回收率分别为17%和8%。用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法所测得o-GT 和 p-GT 亚单位的分子量分别为54000和58000;用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳法所测得的 o-GT 和 p-GT 的等电点分别为6.2和6.6。 0.05～0.1%Triton X-100对肝微粒体膜结合性 o-GT 有激活作用,但对纯化的该酶却有抑制作用。0.1～0.5%胆酸钠以及5～10mM DEN 无论是对肝微粒体膜结合性的 o-GT,还是对纯化的 o-GT 均有激活作用,但对 p-GT 均有抑制作用。DEN对 o-GT 活性的影响,主要表现在对 V_(max) 的增减上。用以 DEN 诱导产生的 UDP-GT 制成抗体,进行琼脂双向免疫扩散试验,结果o-GT 和 p-GT 之间形成了融合的沉淀线,但是用该抗体所做的酶活性抑制试验表明,o-GT 的抑制率高于 p-GT。在肝脏致癌过程中,胚胎型 UDP-GT的诱导可作为肝脏癌前病变或高分化型肝脏的生物化学标志,具有诊断价值,而且对化学致癌机理和抑癌机理的研究具有重要意义。     

肝癌、肺癌、胃癌患者血清GST-π含量的测定及其临床意义

采用Guesdon法制备出生物素化兔抗人GST-π抗体(B-IgG)。以生物素-亲和素-酶联免疫吸附试验(BA-ELISA)测定了肝癌、肺癌、胃癌患者血清和胎儿脐带血血清中的GST-π含量。测定结果,肝癌、肺癌、胃癌患者血清中GST-π含量分别为7.25±6.47ng/ml,4.3±1.85ng/ml,3.74±2.25ng/ml,比正常人的1.16+0.81ng/ml均显著升高,胎儿脐带血血清中GST-π含量为1.14±0.88ng/ml,与正常人相比无明显差异。故认为,血清中GST-π很有可能成为肝癌、肺癌、胃癌的一个肿瘤标志。