TLR4蛋白在胃癌组织中的表达及其与微血管密度的关系

目的探讨Toll样受体4(TLR4)蛋白在胃癌发生、发展中的作用及机制。方法采用免疫组化法检测52份胃癌组织及30份正常胃组织标本中TLR4蛋白表达;采用CD34抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)。分析TLR4蛋白表达、MVD与胃癌主要临床病理参数的关系。结果胃癌组织TLR4蛋白阳性率和MVD分别为76.9%和32.5±8.3,均显著高于正常胃黏膜(P<0.01);有淋巴结转移者TLR4阳性率显著高于无淋巴结转移者(P<0.05);TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期者TLR4蛋白表达率明显高于Ⅰ+Ⅱ期者(P<0.05)。MVD与肿瘤TNM分期、淋巴结转移及分化程度密切相关(P<0.01,P<0.05)。Spearman等级相关分析表明,TLR4蛋白表达与MVD呈显著正相关(P<0.01)。结论 TLR4蛋白表达与胃癌的发生发展密切相关,其机制可能为促进肿瘤血管生成。     

初步探索用多体素质子磁共振波谱揭示CPAP治疗中重度OSAHS男性患者的疗效

目的用多体素质子磁共振波谱(1H magnetic resonance spectroscopy,1HMRS)探索阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)患者持续正压通气(continuous positive airway pressure,CPAP)治疗后的变化。材料与方法对25例中重度男性OSAHS患者的双侧额叶CPAP治疗前、治疗一天后及治疗90天后行头颅多体素1H-MRS检查,分别记录额叶各代谢物比值,比较两两之间的差异,并观察有无乳酸(lactate,Lac)峰出现。结果治疗后一天额叶N-乙酰天门冬氨酸(N-acetyl aspartate,NAA)/肌酸(creatine,Cr)、NAA/胆碱(choline,Cho)(分别为2.3140±0.3128和2.0164±0.4240)及治疗后90天(2.2812±0.2904和2.0180±0.4796)较治疗前(2.0284±0.2093和1.6088±0.2571)升高(P0.05)。治疗一天后与治疗90天后的双侧额叶NAA/Cr、NAA/Cho值无明显变化。三者均未检测到Lac峰。结论 OSAHS患者CPAP前后脑代谢改变能被多体素1H-MRS敏感检测,为临床疗效及预后评估提供客观的影像学依据。     

不同缺氧程度阻塞性呼吸睡眠暂停低通气综合征的特征分析

目的 分析不同程度夜间血氧饱和度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)的临床特征及多导睡眠监测特点。方法 选用OSAHS患者289例,按夜间最低血氧饱和度进行病情分组,其中轻度组69例,夜间最低血氧饱和度为85%～90%,中度组73例,夜间最低血氧饱和度为80%～85%,重度组147例,夜间最低血氧饱和度为＜80%。分析不同夜间最低血氧饱和度OSAHS患者的临床特征包括年龄、体重指数(BMI)、颈围、Epworth嗜睡评分表(ESS)、氧减指数(ODI)、睡眠呼吸暂停指数(AHI)、暂停总时间、暂停最长时间、低通气总时间、低通气最长时间、睡眠结构中慢速眼球运动睡眠(NREM)1、2、3睡眠期及快速眼球运动睡眠(REM)睡眠期分别占总睡眠时间百分比。结果 3组患者的年龄、ESS评分、低通气总时间、低通气最长时间、REM期、NREM1期间无差异,BMI、ODI、AHI、暂停总时间、暂停最长时间、NREM2期、NREM3期间有明显差异,表现在重度组患者BMI、颈围显著高于轻度组与中度组,ODI、AHI、暂停总时间、暂停最长时间三组间均有明显差异,重度组NREM2期高于中、轻度组,重度组NREM3期少于中、轻度组。结论 患者的BMI、颈围对患者最低血氧饱和度有影响;患者缺氧程度越重,则患者氧减指数及呼吸暂停指数越高,暂停总时间、暂停最长时间、NREM2期睡眠时间越长,而患者深睡眠NREM3期睡眠时间则越短。     

雷公藤内酯醇对人胰腺癌PANC-1细胞的抑制作用及其可能的机制

目的： 通过体内外实验观察雷公藤内酯醇（triptolide,TPL）对人胰腺癌PANC-1细胞生长和凋亡的抑制作用,并分析其对Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）、血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial cell growth factor,VEGF）的表达和肿瘤血管生成的影响。 方法： 以0、20、40、80 ng/ml的TPL作用于PANC-1细胞,MTT法和流式细胞术分别检测TPL对PANC-1细胞增殖和凋亡的影响,Western blotting检测TPL作用后PANC-1细胞中TLR4和VEGF的表达。建立PANC-1细胞裸鼠荷瘤模型并随机分为TPL组、PBS组,测量移植瘤的体积变化,治疗35 d后摘取瘤块,免疫组织化学方法检测移植瘤组织内TLR4、VEGF和CD31的表达,并计算微血管密度（microvessel density,MVD）。 结果： 与0 ng/ml组相比,PANC-1细胞经20、40和80 ng/ml的TPL处理24 h后,细胞凋亡率均显著升高\[（4.7±1.0）%、（10.5±2.0）%、（21.1±4.2）% vs （2.6±05）%,P<0.05或P<0.01\];48 h后,细胞增殖率均显著下降\[（68.0±5.3）%、（59.6±5.0）%、（51.6±4.2）% vs （99.6±5.2）%,均P<0.01\],并较相同浓度TPL处理24 h时显著降低（P<0.05或P<0.01）。80 ng/ml TPL组处理后PANC-1细胞中TLR4蛋白\[(20.2±4.7)% vs (57.5±63)%,P<0.01\]和VEGF蛋白\[ (35.8±4.0)% vs (92.1±8.3)%,P<0.01\]的表达量显著低于未处理组。TPL治疗组第34天的裸鼠移植瘤体积显著小于PBS对照组\[（510.9±79.8）vs（1 220.6±127.2）mm3,P<0.01\];TPL治疗组移植瘤组织内的TLR4、VEGF表达均显著低于PBS组\[（3.2±0.6) vs (6.7±1.1),(3.7±0.7) vs (7.1±1.2);均P<0.01）,其MVD也显著低于PBS组\[(12.2±4.0) vs (22.7±5.6),P<0.01\]。 结论： TPL能够抑制人胰腺癌PANC-1细胞及其裸鼠移植瘤的生长,并促进PANC-1细胞凋亡,其机制可能与TPL抑制TLR4、VEGF表达及肿瘤血管生成有关。     

兰索拉唑对乙醇诱导大鼠胃黏膜损伤的保护作用及其机制

目的　研究兰索拉唑 (LP)对乙醇诱导大鼠胃黏膜损伤的保护作用 ,探讨胃泌素受体和环氧化酶 2 (COX 2 )表达在此过程中的作用。方法　大鼠ig给予LP 0 5、5、5 0mg·kg-1·d-1,或ig联合给予LP 5 0mg·kg-1·d-1和胃泌素受体拮抗剂AG 0 4 1R 3、10、30mg·kg-1·d-1,对照组ig给予羧甲基纤维素 (CMC) 2 5mg·kg-1·d-1,连续 14d。末次给药后 8h各组大鼠ig给予无水乙醇 1ml,观察胃损伤指数 (LI)及光镜下的胃黏膜病理学改变。酶免疫方法测定胃黏膜前列腺素E2 (PGE2 )水平 ,WesternBlot和免疫组化检测胃黏膜COX 2表达。评价特异性COX 2抑制剂NS 398对LP诱导的PGE2 合成及胃黏膜保护作用的影响。结果　在 0 5、5、5 0mg·kg-1LP组 ,LI分别为 (2 5 3± 0 33) %、(1 84±0 2 9) %和 (0 83± 0 12 ) % ,小于对照组 (3 6 5± 0 19) % (P<0 0 5 ) ;胃黏膜PGE2 含量分别为 (42 7± 32 ) ,(483± 12 1)和 (6 14± 82 ) pg·g-1wwt ,高于对照组 (2 6 6± 81) pg·g-1wwt(P <0 0 5 )。LP剂量依赖性地增加大鼠胃黏膜COX 2表达。然而 ,同时给予AG 0 4 1R阻断了LP诱导的胃黏膜保护作用、COX 2表达和PGE2 合成。NS 398抑制LP诱导的PGE2 合成及胃黏膜保护作用。结论　LP的胃黏膜保护作用与内源性胃泌素激活胃泌素受     

Toll样受体-4与胰腺癌侵袭和转移的关系

背景与目的:Toll样受体-4(Toll-like receptor-4,TLR4)与多种肿瘤的侵袭和转移密切相关,然而其机制尚未阐明。本研究旨在探讨TLR4与胰腺癌侵袭和转移的关系,并分析其相关机制。方法:采用免疫组化法检测59例胰腺癌手术切除标本及30例癌旁正常胰腺组织中TLR4、基质金属蛋白酶-9蛋白(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)表达,分析TLR4、MMP-9蛋白表达与胰腺癌主要临床病理参数以及TLR4、MMP-9之间的相关性。以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作用于体外培养的人胰腺癌细胞株PANC-1,通过Transwell小室检测细胞侵袭力,蛋白质印迹法(Western blot)检测MMP-9蛋白表达。结果:胰腺癌组织TLR4、MMP-9蛋白阳性表达率分别为72.9%和69.5%,均显著高于正常胰腺组织(P<0.01)。TLR4蛋白表达与肿瘤的TNM分期、淋巴结转移密切相关,MMP-9蛋白与肿瘤的分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切相关(P<0.05)。Spearman等级相关分析表明,TLR4表达与MMP-9表达呈显著正相关(P<0.01)。经LPS作用后,PANC-1细胞的侵袭数目较正常组显著增加(P<0.01)。经LPS作用6、12和24 h后,PANC-1细胞MMP-9蛋白的相对表达量均显著高于正常组(P<0.01)。结论:TLR4蛋白表达与胰腺癌的侵袭和转移密切相关,其机制可能与促进MMP-9蛋白表达有关。     

幽门螺杆菌根除治疗前后快速尿素酶试验诊断的准确性

目的 评价快速尿素酶试验(RUT)在根除治疗前后诊断幽门螺杆菌(Hp)感染的准确性。方法 选择250例接受胃镜检查的患者，123例无Hp根除治疗史，127例为Hp根除治疗后复查患者。每例患者取胃窦和胃体活检标本各3块，分别用于RUT、细菌培养和病理组织学检查。以细菌培养及病理组织学检查结果作为“金标准”，即培养和(或)组织学检查结果阳性者为Hp阳性，而培养和组织学检查结果同时阴性者为HP阴性或HP根除。结果 末行Hp根除治疗的患者RUT正确的诊断了86例Hp阳性中的84例和37例Hp阴性中的34例，其敏感性和特异性分别为97．7％和91.9％。根除治疗后RUT敏感性和特异性分别为64.3％和99.0％。然而，根除治疗后6个月以上复查胃镜，RUT敏感性和特异性均达100％。结论 根除治疗前和根除治疗后6个月以上复查，RUT诊断Hp感染准确性高。     

不同年龄组睡眠呼吸暂停低通气综合征患者临床特点及持续气道正压通气治疗依从性分析

目的探讨不同年龄组睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）患者临床特点、多导睡眠监测（PSG）特点及持续气道正压通气（CPAP）治疗情况差异。方法回顾性地分析2012年1月至2013年7月在滨州医学院附属医院睡眠呼吸监测中心经PsG诊断为OSAHS的220例患者的临床资料,按年龄分为青年组（10～44岁）89例、中年组（45～59岁）72例及老年组（≥60岁）59例,收集临床资料、调查问卷、嗜睡评分及PSG资料。对睡眠呼吸暂停低通气指数（AHI）≥30的154例OSAHS患者进行6个月、9个月及1年的随访,共有129例患者接受CPAP治疗。结果老年组患者与青年组患者相比夜间深睡眠比值降低（P〈0．05）,Epworth嗜睡评分更高（P〈O．01）。老年组患者AHI低于体质量指数（BMI）相匹配的青年组患者（P〈0．05）,但夜间呼吸暂停严重程度较重（P〈0．05）。老年组患者中枢性睡眠呼吸暂停发生的比率高于另外两组（P〈0．05）。在使用CPAP治疗的第6个月、9个月及1年时,仍能保持较好依从性的老年组患者分别为90％,86％和82％,中年组为89％,87％和79％,在青年组为87％,74％和69％。老年组患者接受CPAP治疗的依从性较好（P〈0．05）。结论老年组患者日间临床表现更重、睡眠质量更差,接受CPAP治疗依从性较好。     

基质金属蛋白酶-9在胃癌组织中的表达及其与血管生成的关系

基质金属蛋白酶-9(MMP-9)能有效降解细胞外基质(ECM)中的Ⅳ、Ⅴ型胶原和明胶,促进肿瘤的远处转移和周围组织的侵袭[1].恶性肿瘤的生长、侵袭和转移必须依赖肿瘤血管生成,微血管密度(MVD)是反映恶性肿瘤侵袭和转移等生物学行为的一个重要指标[2].近年研究发现,MMP-9参与的基质降解和再塑形与肿瘤间质血管生成关系密切[3].本研究采用免疫组化方法,检测胃癌组织MMP-9和CD34表达并计数MVD,旨在探讨MMP-9表达与MVD间及其与胃癌主要临床病理特征的相关性.     

重组腺病毒介导Hsp70基因表达对胰腺癌荷瘤小鼠的免疫功能影响

目的观察重组腺病毒介导热休克蛋白质70(Hsp70)基因表达对胰腺癌荷瘤小鼠的治疗作用及其对免疫功能的影响。方法建立胰腺癌荷瘤小鼠动物模型,随机分为荷瘤组、对照组和治疗组,对比不同时间点三组肿瘤大小,评价抑瘤效果。通过Western blot检测移植瘤组织Hsp70蛋白表达,流式细胞仪检测脾单核细胞中CD4+、CD8+细胞比例,ELISA检测血清中细胞因子IL-2、INF-γ、IL-4、IL10的含量。结果与荷瘤组和对照组相比,治疗组肿瘤生长受到明显抑制(P<0.05或P<0.01),脾单核细胞中CD4+、CD8+细胞比例明显增加(P<0.01)。治疗组血清中细胞因子IL-2、INF-γ含量较荷瘤组和对照组明显增加(P<0.01),IL-10含量则明显减少(P<0.01)。结论重组腺病毒介导的Hsp70基因表达对荷瘤小鼠胰腺癌动物模型的肿瘤生长具有抑制作用,其机制与激发免疫系统功能有关。