粒单系白血病原始细胞表达血小板特异性抗原与周期 …

目的：探讨急性单核细胞白血病原始细胞表达血小板特异性抗原的机制。方法：分离外周血或骨髓单个核细胞,采用常规染色和普通细胞化学染色观察其开矿学特性,采用流式细胞仪双荧光分析免疫表型,单荧光胞浆蛋白标记分析周期蛋白表达和免疫印迹进一步证实周期蛋白表达和免疫印变进一步证实周期蛋白 表达情况。采用周期蛋白手ＤＮＡ双标记分析周期蛋白Ｄ３表达与细胞周期的关系。结果：白血病原始细胞中ＣＤ１３＾＋＋ＨＬＡ－ＤＲ＾     

女性冠心病患者血清冯维勒布兰德因子、胎球蛋白B、 肽基脯氨酸异构酶A与冠状动脉狭窄程度相关性

目的探讨女性冠心病患者血清冯维勒布兰德因子(vWF)、胎球蛋白B(FETUB)、肽基脯氨酸异构酶A(PPIA)与冠状动脉狭窄程度的相关性。方法选取新疆医科大学第四附属医院自2018年1月至2019年1月收治的80例女性冠心病患者为研究对象。采用Gensini积分评估冠状动脉狭窄程度,并根据Gensini积分的第1个至第4个四分位数,将患者分入Q1组、Q2组、Q3组、Q4组。比较4组患者的vWF、FETUB、PPIA表达量;同时,采用Spearman法分析vWF、FETUB、PPIA表达量与Gensini积分的相关性。结果 Q1组、Q2组、Q3组、Q4组的vWF、FETUB、PPIA表达量呈逐渐上升趋势,组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。vWF、FETUB、PPIA表达量与Gensini积分呈正相关(r=0.372、0.432、0.264,P<0.05)。结论女性冠心病患者血清中的vWF、FETUB、PPIA表达量可作为用于判断冠状动脉狭窄程度的快速、简单、易获得的实验室潜在指标。     

β-连环素在非小细胞肺癌中表达及与表皮生长因子受体突变关系

目的探讨β-连环素(β-catenin)在非小细胞肺癌中表达及与表皮生长因子受体(EGFR)突变的关系。方法收集南京医科大学附属淮安第一医院2016-2017年病理检查明确诊断为非小细胞肺癌的组织标本340例,分别采用免疫组化法及扩增阻滞突变系统检测β-catenin异常表达和EGFR突变情况,并分析其与临床病理特征的关系,以及二者对患者预后的影响。结果β-catenin异常表达主要体现在病理分型、分化程度及淋巴结转移方面,具体表现为腺癌β-catenin异常表达率高于其他、中分化高于高分化和低分化、无淋巴结转移高于有淋巴结转移,差异均有统计学意义(P<0.05)。EGFR突变阳性表达主要与性别、年龄、病理类型、分化程度及淋巴结转移有关,具体表现为EGFR突变阳性表达率女性高于男性、年龄<60岁高于年龄年龄≥60岁、腺癌高于其他、中分化高于高分化和低分化、有淋巴结转移高于无淋巴结转移,差异均有统计学意义(P<0.05)。340例非小细胞肺癌患者中,β-catenin异常表达率为70.29%(239/340),EGFR突变阳性表达率为45.88%(156/340)。EGFR突变阳性表达者β-catenin异常表达率(76.28%)高于EGFR突变阴性表达者(65.22%),差异有统计学意义(P<0.05)。β-catenin异常表达者EGFR突变阳性表达率(49.79%)高于β-catenin正常表达者(36.63%),差异有统计学意义(P<0.05)。非小细胞肺癌组织中β-catenin与EGFR存在关联性(χ~2=43.879,P<0.05)。结论非小细胞肺癌组织中β-catenin异常表达、EGFR突变状态均与病理组织学类型有关,β-catenin与EGFR交互作用对非小细胞肺癌患者远期预后具有显著影响。     

肿瘤患者自体CIK细胞输注增强再次制备时CD3~+CD56~+细胞的体外扩增能力

目的探讨自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)输注治疗对再次制备CIK细胞亚群的构成和活性的影响。方法选取经2个疗程CIK细胞治疗的患者201例,分为CIK治疗后90 d内(含90 d)制备检测组和大于90 d制备检测组。台盼蓝拒染法检测细胞增殖;流式细胞术分析CD3、CD4、CD8,CD56和NKG2D受体表达情况的变化;乳酸脱氢酶释放法检测细胞毒活性。结果 CIK细胞输注治疗后90 d内再次制备CIK细胞的CD3+CD56+细胞百分率(16.7±9.1)%,与CIK细胞输注治疗前相比(13.5±8.6)%,显著增加(P0.01),而且,表面受体NKG2D表达水平((84.1±10.8)%,也比CIK细胞输注治疗前明显增高((81.1±14.8)%)(P0.05)。与此相反,CIK细胞输注治疗后导致再次制备时,CIK细胞群体中CD3+CD4+百分率(15.2±9.7)%,与CIK输注治疗前(17.6±12.5)%相比,显著下降(P0.01)。值得注意的是,CIK细胞输注治疗后超过90 d再次制备CIK细胞的CD3+CD56+细胞分布和NKG2D受体表达,与CIK细胞输注治疗前相比均无明显变化,但CIK细胞输注治疗后仍可导致再次制备时,CIK细胞群体中CD3+CD4+百分率(14.5±9.4)%,与CIK细胞输注治疗前相比(18.2±12.9)%,明显下降(P0.01)。另外,2组再次制备CIK细胞的总数和体外细胞杀伤活性无明显差异。结论 CIK细胞输注治疗有助于提高肿瘤患者CD3+CD56+细胞前体细胞,在相同CIK细胞培养制备体系中增殖、定向分化和活化的能力,该作用持续时间不超过90 d,因此,CIK细胞治疗疗程间隔时间不应超过90 d。     

丹参酮ⅡA对小鼠压力超负荷诱导 心肌损伤保护作用研究

目的探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对小鼠压力负荷性心肌损伤保护作用。方法选取30只雄性C57BL/6小鼠为研究对象,将所有小鼠随机分成对照组、模型组及TanⅡA组,每组各10只。采用升主动脉缩窄构建小鼠压力负荷心肌损伤模型,术后TanⅡA组给予TanⅡA,连续3周,第4周处死所有小鼠,收集标本。测量小鼠心脏重量和心脏重量指数,酶联免疫吸附法和蛋白印迹法检测炎症和凋亡相关蛋白表达。结果与对照组比较,模型组小鼠心脏重量和心脏重量指数显著增加,白介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、Bax、Caspase-3蛋白表达升高,IL-10、Bcl-2表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,TanⅡA组小鼠心脏重量和心脏重量指数显著降低,IL-1β、TNF-α、IL-6、Bax、Caspase-3蛋白表达降低,IL-10、Bcl-2表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TanⅡA处理对小鼠压力负荷性心肌损伤有保护作用,其作用机制可能通过调节炎症反应和凋亡实现。     

Thymoglobulin与CD3单克隆抗体在细胞因子诱导的杀伤细胞制备中的作用比较

目的研究人胸腺球蛋白(TG)在临床治疗级培养体系中,对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)增殖、免疫细胞表型和细胞毒作用的影响。方法分离11例健康正常人外周血单个核细胞(PBMC),γ干扰素预处理;1 d后,TG或CD3 mAb刺激;随后,每3 d补充IL-2等添加物,培养至21 d。台盼蓝拒染法计数细胞总数和活力;流式细胞术分析CD3、CD4、CD8、CD16/CD56和NK细胞活化/抑制受体表达情况以及CD25+Foxp3+调节T细胞(Treg)的变化;乳酸脱氢酶释放法检测细胞毒活性。结果 TG和CD3 mAb均能刺激CIK细胞生长,但CD3 mAb作用弱于TG。培养7 d,2组CIK细胞中,CD3+CD16+CD56+细胞、CD3-CD16+CD56+细胞及NK细胞活化/抑制受体表达均出现一过性减少;培养14 d,开始恢复,并持续增加至21 d;在7 d、14 d和21 d等3个检测点,CD3 mAb组的三者均低于TG组(P0.05),而且,细胞毒活性也低于TG组。值得注意的是,培养7 d,Treg一过性增加,且TG组明显高于CD3 mAb组(P0.05);另外,在整个培养期间,2组CIK细胞中,CD3+CD4+细胞持续减少,而CD3+CD8+细胞在7 d,即迅速增加,并维持该水平至21 d,这种改变在2组间无差异。结论 TG能选择性地促进CIK细胞中主要效应细胞增殖、分化和成熟,提高其细胞毒活性,因此,其具有替代CD3 mAb用于制备临床级CIK细胞制品的可行性;CD3 mAb和TG培养体系均可一过性地扩增负相调控细胞Treg,剔除或减少Treg可能有助于提高主要效应细胞产率。     

超声下颈动脉粥样硬化斑块对急性冠脉综合征 冠脉梗阻程度预测价值研究

目的探讨超声下颈动脉粥样硬化斑块对急性冠脉综合征冠脉梗阻程度的预测价值。方法回顾性分析黑龙江中医药大学附属第一医院自2013年10月至2017年10月收治的347例急性冠脉综合征患者的临床资料,包括患者的一般资料、改良Crouse评分、Gensisi积分等,采用Logistic分析急性冠脉综合征冠脉梗阻程度的影响因素,采用Spearman分析改良Crouse评分与Gensisi积分的相关性。结果低密度脂蛋白、C反应蛋白、改良Crouse积分是影响急性冠脉综合征冠脉梗阻程度的独立因素(P<0.05)。严重病变患者改良Crouse评分为(10.14±2.66)分,高于轻中度病变患者的(7.22±2.48)分,差异有统计学意义(P<0.05)。改良Crouse评分与Gensisi积分呈正相关(r=0.798,P<0.05)。结论超声下颈动脉粥样硬化斑块对急性冠脉综合征冠脉梗阻程度具有一定的预测价值。     

Entinostat影响NK细胞对非小细胞肺癌杀伤作用的体外研究

  目的  观察Entinostat对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）细胞A549和HCC-827表面NKG2D配体表达的影响，比较经Entinostat处理前后A549和HCC-827细胞对NK细胞杀伤作用的敏感性。  方法  通过MTT法检测Entinostat对A549和HCC-827细胞增殖的影响，流式细胞术检测NKG2D配体表达的变化，RT-PCR检测配体在mRNA水平的变化，并用ELISA检测细胞培养上清中可溶性MICA的含量。乳酸脱氢酶释放实验检测Entinostat作用后的A549和HCC-827细胞对NK细胞杀伤作用的敏感性。  结果  Entinostat对A549和HCC-827细胞的生长抑制作用具有时间-剂量依赖性。以0.5、1 μmol/L Entinostat诱导A549和HCC-827细胞48h后，细胞表面NKG2D配体表达水平升高，MICA和MICB的mRNA转录水平升高。1 μmol/L Entinostat提高了A549细胞培养上清中可溶性MICA表达水平。0.5、1 μmol/L Entinostat增强了HCC-827细胞对NK细胞杀伤作用的敏感性。  结论  Entinostat通过上调NSCLC NKG2D配体的表达，提高NK细胞对NSCLC的杀伤作用，为探讨NSCLC的治疗提供了新的方法和理论依据。