蛋白酶体抑制剂MG132诱导人血管平滑肌细胞凋亡及其机制研究

目的：观察蛋白酶体抑制剂MG132对人脐静脉血管平滑肌细胞（vascular smooth musele cells,VSMC）的致凋亡作用及其对凋亡相关的天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3（caspase 3）表达的影响。方法：采用多个浓度（2．5、5、10μmol／L）的蛋白酶体抑制剂MG132处理人脐静脉VSMC 24h和48h;流式细胞术分析细胞凋亡率;RT-PCR检测泛素-蛋白酶体途径（ubiquitin-proteasome pathway,UPP）相关基因泛素、泛素活化酶（E1）、泛素缀合酶（E2）、泛素连接酶（E3）、26S蛋白酶体和caspase 3基因转录水平;免疫细胞化学检测细胞caspase 3蛋白表达。结果：蛋白酶体抑制剂MG132处理48h后细胞凋亡率增加：细胞内UPP相关的基因rnRNA表达降低,而caspase 3 mRNA表达增高;免疫细胞化学检测细胞caspase 3蛋白表达水平升高。结论：蛋白酶体抑制剂MG132能够诱导人脐静脉VSMC凋亡,其作用呈量-效关系;MG132诱导vSMC凋亡与下调UPP相关基因和上调caspase 3基因及蛋白的表达有关。     

普米克令舒佐治小儿毛细支气管炎的疗效观察

目的探讨小儿毛细支气管炎采用普米克令舒佐治效果观察。方法本次共选择100例小儿毛细支气管炎患儿作研究对象,均为我院2013年1月-2014年1月收治,采用随机数字表法随机分组,就补液、抗病毒、抗感染、镇静、吸氧等综合治疗（对照组,n=50）与加用普米克令舒雾化吸入佐治（观察组,n=50）效果进行比较。结果观察组临床治愈率为88%,明显高于对照组临床治愈率62%,差异有统计学意义（P〈0.05）。观察组无明显不良反应,对照组发生率为8%。观察组咳嗽、湿啰音、哮鸣音、呼吸困难消失时间、平均住院时间均少于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论小儿毛细支气管炎采用普米克令舒佐治可显著提高临床治疗效果,加快症状和体征消除,缩短病程,且具较高安全性,对保障患儿生命安全,促使其正常生长发育有非常重要的意义,值得临床广泛推广使用。     

超声检查在附睾占位性病变诊断中的临床应用

目的探讨超声检查在附睾占位性病变诊断中的应用价值。方法回顾性分析2005年1月~2013年12月于我院进行手术治疗的56例附睾占位性病变患者的临床资料及超声检查资料,并与病理结果对照。结果 56例附睾占位性病变中,附睾炎14例,附睾结核12例,附睾囊肿17例,腺瘤样瘤2例,乳头状囊腺瘤7例,附睾恶性肿瘤4例。术前通过分析临床资料和超声检查结果诊断39例,诊断符合率为69.64%。结论超声检查具有直观、无创、可重复等特点,结合临床症状、触诊、实验室检查及实验性治疗等方法有助于提高附睾占位性病变的诊断及鉴别诊断水平。     

沙丁胺醇和甲强龙联合治疗儿童哮喘重度发作临床观察

目的:观察沙丁胺醇联合甲强龙治疗儿童哮喘重度发作的疗效。方法:采用沙丁胺醇氧化吸入联合甲强龙静脉用药治疗哮喘重度发作患儿33例,观察疗效。结果:1h内缓解者9例,3h内缓解者18例,6h内缓解者5例,12h内缓解者1例。结论:沙丁胺醇联合甲强龙治疗儿童哮喘重度发作起效快,副作用不明显,值得在哮喘重度发作中推广运用。     

MG132对兔颈总动脉球囊损伤后狭窄部位泛素和Caspase-3表达的影响

目的 采用球囊拉伤新西兰白兔颈总动脉,复制出血管损伤后狭窄模型;在损伤血管局部应用蛋白酶体抑制剂MG132,观察蛋白酶体抑制剂MG132对球囊损伤后血管狭窄部位泛素和Caspase-3表达的影响.方法 将新西兰白兔30只随机分成对照组、球囊损伤组和MG132组,喂养8周后取颈总动脉损伤段血管制成病理切片,采用免疫组织化学法观察泛素蛋白和Caspase-3蛋白的变化.结果 免疫组织化学法检测到球囊损伤组颈总动脉管壁泛素蛋白表达加强;而MG132组与球囊损伤组比泛素蛋白表达明显减少(P<0.01).Caspase-3蛋白表达显著增加(P<0.01).结论 局部应用蛋白酶体抑制剂MG132能抑制颈总动脉管壁泛素蛋白表达,并增强Caspase-3蛋白表达.     

MG132诱导人血管内皮细胞凋亡及对caspase-3表达的影响

目的　观察蛋白酶体抑制剂MG132对人血管脐静脉内皮细胞(ECV -304)的致凋亡作用及其对凋亡相关的天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3表达的影响。方法　采用两个浓度(2, 5μmol·L-1 )的蛋白酶体抑制剂MG132处理ECV -304细胞;DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率;RT -PCR检测细胞内凋亡相关基因caspase -3的转录水平;免疫细胞化学检测细胞caspase 3蛋白表达。结果　对照组ECV -304细胞凋亡率低于5%,在2μmol·L-1MG132作用下,凋亡率为11. 3%,MG132浓度升至5μmol·L-1,细胞凋亡率增致44 .5%,MG132诱导ECV 304细胞凋亡具有量-效关系;RT -PCR检测发现细胞内凋亡相关基因caspase 3mRNA表达上调;免疫细胞化学检测细胞caspase- 3蛋白表达水平升高。结论:蛋白酶体抑制剂MG132能够诱导血管内皮细胞凋亡,其机制可能与MG132抑制UPP活性,促进caspase- 3基因转录,使细胞内caspase -3增加而促进细胞凋亡。     

丙泊酚全凭静脉麻醉应用人工流产手术的护理

通过对215例妇科丙泊酚全凭静脉麻醉应用人工流产手术病人的调研,探讨丙泊酚全凭静脉麻醉手术的临床护理。护理的重点应放在术前病人准确的评估,充分的术前准备,选择适合的血管建立有效的静脉通道,准确控制注药速度,术中对病人的呼吸、血压和血氧饱和度的严密监测,并及时发现及时处理血压过低、呼吸抑制和呕吐等副作用,且在麻醉恢复期确保病人的安全。     

L—精氨酸对高脂血症患者浆纤维蛋白原含量及组织纤溶酶…

对３０例冠心病高脂血症患者口服Ｌ－精氨酸治疗一个月，观察其对血浆组织纤溶酶原激活物（ｔ－ＰＡ）的活性和纤维蛋白原含量的影响，及其与血浆精氨酸变化的关系，口服Ｌ－精氨酸片（１．０ｇ，每日三次）能明显降低脂蛋白（ａ）和纤维蛋白原的含量，提高组织纤溶酶活物的活性。说明Ｌ－精氨酸可能通过脂质，凝血和纤溶途径发挥抗动脉粥样硬化的作用。     

蛋白酶体抑制剂联合表阿霉素杀伤肝癌细胞的研究

目的观察蛋白酶体抑制剂MGl32与表阿霉素（epirubicin，EPI）联合应用对人肝癌HeDG2细胞系体外生长的影响。方法实验分为4组：空白对照组；1μg／mLEPI处理组；1μmol／LMGl32处理组；1／maol／LMGl32＋1μg／mLEPI共同处理组。应用MTT法检测小剂量MGl32与表阿霉素处理后对HepG2细胞的生长抑制作用，流式细胞术检测细胞凋亡。结果MTT法显示MGl32与表阿霉素合用时对HepG2细胞的抑制率增加。流式细胞术测定显示对照组的HepG2细胞凋亡率为（0．87±0．19）％，1μmol／LMGl32处理组细胞凋亡率为（5．53±0．99）％；1μg／mL EPI处理组细胞凋亡率为（13．8±1．37）％：1μmol／LMGl32和1μg／mL EPI共处理组细胞凋亡率增加至（27．0±1．15）％。结论小剂量MGl32与表阿霉素联合应用可增强致HepG2细胞凋亡作用。     

泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体的制备

目的探讨制备泡沫细胞相关基因4多克隆抗体的方法。方法将从人胎肝文库经聚合酶链反应扩增获得的泡沫细胞相关基因4基因全长cDNA序列，通过生物信息学分析，预测泡沫细胞相关基因4编码氨基酸序列的二级结构、抗原决定簇、功能结构域．并进行了多序列比对，并根据蛋白质的亲疏水性、二级结构、偶联难度及实验难度等，确定泡沫细胞相关基因4抗原13肽PKLVKEEVFWRNY，采用固相多肽合成法合成该抗原片段．偶联后经过基础免疫，6次加强免疫，经追踪检测，于第四次免疫后10～14天颈动脉放血，分离血清，冷冻抽干，-20℃保存而制备了泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体。结果用固相多肽合成法成功制备了泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体，该抗体经间接酶联免疫吸附测定法检测其效价为1：16000，Western blot检测可见40kDa处有目的带，用免疫组织化学方法从HepG2细胞中检测到泡沫细胞相关基因4蛋白表达，证实该抗体具有较好的反应性和特异性。结论固相多肽合成法省时、省力、制备的抗体效价高；泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体的制备，为进一步研究泡沫细胞相关基因4蛋白在动脉粥样硬化中的功能作用奠定了基础。