Bcl-2基因在人膀胱癌细胞中表达对CTL凋亡诱导作用的影响

目的:探讨Bcl-2基因在人膀胱癌细胞中表达对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)凋亡诱导作用的影响。方法:采用基因重组技术构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/Bcl-2;应用脂质体介导的基因转染技术将pcDNA3.1(+)/Bcl-2导入膀胱癌BIU-87细胞,RT-PCR检测Bcl-2基因表达水平;不同浓度抗Fas单克隆抗体(Anti-Fasmab)模拟CTL的Fas-配体(Fas-L)处理转染与未转染Bcl-2基因的膀胱癌细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、吖啶橙(AO)荧光染色法和流式细胞检测仪(FCM)分析细胞存活和凋亡情况。结果:酶切和核酸测序证明真核表达载体pcDNA3.1(+)/Bcl-2构建成功。将重组质粒转染膀胱癌细胞后,RT-PCR分析表明,转染Bcl-2基因的BIU-87/Bcl-2细胞的Bcl-2基因表达水平较BIU-87细胞和转染空载体的BIU-87/neo细胞显著增高,P<0.01。An-ti-Fasmab作用后,BIU87/Bcl-2细胞的存活率显著高于BIU-87和BIU-87/neo细胞,P<0.05或P<0.01。3种细胞虽均发生凋亡的形态学改变,但BIU87和BIU87/neo细胞改变更为明显,两者的凋亡率分别为(25.33±3.00)%和(27.05±1.75)%,而BIU-87/Bcl-2细胞的凋亡率为(18.06±1.41)%,显著低于前两者,P<0.01。结论:Bcl-2基因高表达通过阻断CTL杀伤膀胱癌细胞的Fas/Fas-L途径,使膀胱癌细胞能够抵御免疫系统中CTL的攻击。     

脐尿管恶性嗜铬细胞瘤一例

患者　男 ,37岁 ,临床表现为下腹部包块伴血尿 3个月。患者有高血压病史 ,偶有晕厥。检查发现血压增高 ,收缩压 180～ 2 10ｍｍＨｇ(1ｋＰａ=7 5ｍｍＨｇ) ,舒张压 10 5～ 130ｍｍＨｇ。下腹耻骨上区可扪及 8ｃｍ× 10ｃｍ不规则包块 ,与脐间有条索样肿块相连。按压包块时血压有轻度波动。膀胱镜检查 :见膀胱顶部溃疡样肿物 ,周边向胱内隆起 ,中心为溃疡样凹陷 ,表面有出血及坏死组织覆盖。ＣＴ平扫见肿物位于膀胱前间隙 ,与膀胱壁界限不清 ,部分向膀胱内突入。肿物向脐的方向延伸 ,与周围组织关系不清。增强扫描时 ,肿瘤组织明显强化 ,其内…     

存活素反义寡核苷酸诱导肾癌细胞凋亡及机制的实验研究

目的观察存活素反义寡核苷酸封闭存活素的表达对肾癌细胞凋亡的影响。方法采用脂质体介导的存活素反义寡核苷酸技术转染肾癌细胞786-0。电镜观察细胞超微结构,免疫组织化学、Western blot及RT-PCR方法检测存活素蛋白及mRNA表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率,四甲基偶氮唑盐比色法检测癌细胞抑制率。酶标免疫测定caspase-3活性。结果存活素反义寡核苷酸能显著降低存活素蛋白和mRNA的表达,并呈浓度和时间依赖效应。转染后的肾癌细胞出现了大量凋亡小体。400、600、800 ng／ml反义寡核苷酸细胞凋亡率分别为（10．54±0．72）％,（12．80±0．38）％,（22．30±1．23）％,较空白对照组[（6．05±0．48）％]和正义对照组[（5．70±0．41）％]显著增加（P〈0．05）。反义寡核苷酸各组caspase-3的相对活性分别为0．052±0．009,0．078±0．004和0．092±0．002,与空白对照组（0．027±0．008）和正义对照组（0．028±0．001）相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论存活素反义寡核苷酸能显著下调存活素基因表达,明显促进肾癌细胞786-0凋亡并抑制其增殖;可能是通过上调caspase-3表达来促进凋亡。     

慢性前列腺炎性功能改变及评价

目的 研究慢性前列腺炎病人的性功能改变,制定可行的评价标准.方法 对500例慢性前列腺炎病人进行性功能改变调查,以我们制定的慢性前列腺炎相关性功能症状指数(CPSFI)调查表进行治疗前后性功能改变比较.结果 不同程度性欲下降350例(70%),勃起功能障碍125例(25%),早泄35例(7%),不射精6例 (1.2%),逆向射精5例(1%).根据CPSFI评分,治疗前性功能重度障碍45例(9%),中度障碍145例(29%),轻度障碍 215例(43%),无障碍95例(19%).针对前列腺炎进行治疗1个疗程后,CPSFI评分下降7～28分,平均下降15分.结论CPSFI调查表可以对慢性前列腺炎的性功能改变及治疗效果做出较客观的评价,可以作为慢性前列腺炎症状指数评分(CPSI)的补充.     

尿动力学检查在良性前列腺增生症诊断的应用

目的 研究尿动力学在良性前列腺增生症(BPH)患者术前检查中的应用.方法 采用Laborie 检查仪对临床诊断为BPH者45例行尿动力学检查.结果 诊断为膀胱出口梗阻41例(91.11%),LinPURRⅢ～Ⅵ级各7,12,15,7例, 其中10例顺应性下降(22.22%);逼尿肌活动低下9例(20.0%),其中4例不伴有膀胱出口梗阻(8.89%);逼尿肌不稳定13例(28.89%);急迫性尿失禁3例(6.67%),充盈性尿失禁2例(4.45%).结论尿动力学检查可以明确BPH的诊断,还能了解逼尿肌功能,并对症状提出病理生理学解释,提高手术疗效.     

肾上腺出血性假囊肿11例报告

198 5年 1月至 2 0 0 2年 1月 ,我院共收治肾上腺出血性假囊肿患者 11例 ,均经手术及病理证实 ,现报告如下。材料与方法　本组 11例。男 3例 ,女 8例。年龄 2 7～ 49岁 ,平均 3 9岁。右侧 7例 ,左侧 4例。就诊原因 :患侧腰痛 4例 ,其中 1例有腰部钝器击伤史 ;高血压就诊 1例 ;体检偶然发现 6例。实验室检查 :10例行连续 3次测定血浆卧、立位醛固酮 ,肾素 血管紧张素 ,血皮质醇 ,2 4h尿VMA检查 ,除 1例 2 4h尿VMA增高外 ,余均在正常范围 ;血常规示轻度贫血 2例。影像学检查 :B超示 9例肾上腺区不均质实性肿物 ,可见完整包膜 ,2例肾上腺区…     

转人白细胞介素-12基因膀胱癌瘤苗的抗肿瘤作用

目的 制备人白细胞介素—12(hIL-l2)转基因膀胱癌瘤苗，观察其特异性抗肿瘤免疫作用。方法 经逆转录病毒载体将hIL—12编码基因导入膀胱癌细胞株MBT—2中，用聚合酶链反应(PCR)技术检测目的基因是否整合入MBT—2基因组中，用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测hIL—12活性，将转基因细胞接种到36只荷瘤小鼠，检测细胞毒T细胞杀伤活性。结果 hIL—12 cDNA经逆转录病毒载体导入MTT—2细胞中后，hIL—12基因已完整、稳定地整合到MBT—2基因组中，使MBT—2细胞具有分泌hIL—12活性，每24h达32．8mol/L以上。转基因细胞接种荷瘤小鼠后，可见瘤体变小(P＜0．01)，细胞毒T细胞杀伤活性增强。结论 转hIL—12基因瘤苗，能够诱导小鼠的特异性抗肿瘤免疫反应。     

内皮型一氧化氮合酶在大鼠糖尿病膀胱病变中的作用

目的 探讨大鼠糖尿病膀胱病变组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达及意义.方法 雄性SD大鼠36只.随机分为正常组、多尿组和糖尿病组,每组12只.采用尿动力学方法对大鼠膀胱容量、单次排尿量、膀胱内最大压力、残尿壁和排尿率等指标进行评价,应用RT-PCR和蛋白质印迹方法检测大鼠膀胱组织中eNOS mRNA和蛋白质的表达水平,统计学分析其与膀胱功能的相关性.结果 6周时正常组大鼠最大膀胱容量、单次排尿量、残余尿量分别为(0.75±0.04)、(0.70±0.02)和(0.06±0.00)ml,多尿组分别为(1.62±0.15)、(1.52±0.30)和(0.11±0.01)ml,糖尿病组分别为(2.29±0.16)、(2.06±0.25)和(0.23±0.01)ml,与正常组和多尿组相比,差异具有统计学意义(P＜0.01);12周时正常组上述指标分别为(0.86±0.06)、(0.80±0.04)和(0.07±0.00)ml,多尿组分别为(1.93±0.10)、(1.77±0.11)和(0.13±0.02)ml,糖尿病组分别为(2.65±0.26)、(2.09±0.21)和(0.56±0.06)ml,各组间差异具有统计学意义(P＜0.01).糖尿病组与6周时相比,各指标增加,其中残余尿量差异具有统计学意义(P＜0.01).6周时3组排尿率分别为(93.3±2.1)%、(93.2±2.7)%和(90.0±2.5)%,组间差异无统计学意义(P＞0.05);12周时分别为(93.1±2.2)%、(93.8±3.2)%和(78.1±2.6)%,糖尿病组小于其他2组(P＜0.05).各组膀胱内压力差异无统计学意义.糖尿病组膀胱压力曲线出现压力小波动,曲线不规则.6周时各组膀胱组织中eNOSmRNA表达相对灰度值分别为0.81±0.12、0.90±0.12和1.98±0.16,糖尿病组高于其他2组,差异具有统计学意义(P＜0.01);12周时为0.87±0.17、1.05±0.11和2.89±0.23,糖尿病组与6周时相比增加(P＜0.01).6周时各组eNOS蛋白表达相对灰度值分别为0.98±0.12、0.93±0.14和2.28±0.16,糖尿病组高于其他2组(P＜0.01);12周时为1.03±0.13、1.14±0.11和3.12±0.20,糖尿病组与6周时相比增加(P＜0.01).糖尿病组大鼠膀胱eNOS蛋白表达强度与排尿率旱负相关(r=-0.669,P＜0.01).结论 膀胱组织中eNOS mRNA和蛋白表达上调可能参与了糖尿病膀胱病变的发生发展.     

精索炎症性肌纤维母细胞瘤一例报告

患者,50岁.因左阴囊内无痛性包块5年,逐渐增大,于2010年1月21日入院.查体:左阴囊上方精索增粗如拇指,质硬,无触痛,附睾头体部增大,与睾丸分界不清.超声检查左阴囊内无回声,深2.6 cm.左附睾头体交界处旁见一低回声,约1.7 cm×1.7 cm,边界模糊,其内回声不均,与精索及附睾结构界限不清.左精索走行区结构紊乱.CT检查示左阴囊肿胀,其内见不规则软组织密度影,增强后明显强化.对侧阴囊内无异常.诊断:左精索肿瘤.行左精索、睾丸及附睾切除术.术中见左睾丸上方精索内质硬肿物,界限清,肿瘤近端精索正常.病理检查:左精索内不规则肿物,4.0 cm×3.0 cm×2.0 cm大小,质硬,局部见肿物侵及睾丸及附睾,切面呈鱼肉样.附睾炎性充血,睾丸正常.镜下肿瘤组织呈束状或编织状排列,细胞呈梭形,核多形性,染色深,偶见核分裂象,胞质红染.肿瘤细胞Bcl(一),Actin(sm)、β-cat、CD34、CD68、Desmin(+).诊断:左精索炎症性肌纤维母细胞瘤.术后未行其他辅助治疗,随访3个月未见复发.     

丝裂霉素C与C2-神经酰胺或抗Fas单克隆抗体联合治疗膀胱癌的体外研究

目的:探讨丝裂霉素C(MMC)与C2-神经酰胺(C2-Cer)或抗Fas单克隆抗体(anti-FasmAb)联合应用对人膀胱癌BIU-87和T24细胞生长的抑制作用。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定MMC、C2-Cer、anti-FasmAb单独应用及MMC分别与C2-Cer或anti-FasmAb联合应用对人膀胱癌BIU-87和T24细胞生长的抑制作用,并应用CHOU-TALALAY联合指数法对药物联合应用的效果进行判定。结果:药物单用及MMC分别与C2-Cer、anti-FasmAb合用对BIU-87和T24细胞的生长均有抑制作用,药物合用时的中效浓度与单用时比较有不同程度的降低。MMC与C2-Cer合用时,对于BIU-87细胞,表现为协同作用(CI<1);对于T24细胞,低浓度(0%1)。MMC与anti-FasmAb合用时,对于BIU-87细胞,在大部分效应范围(18%1);对于T24细胞,则在大部分效应范围(0相似文献