新型细胞凋亡分子探针99Tcm-CP3-peptide的制备及在肺腺癌细胞系体内外的实验研究

目的 制备含天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸（DEVD）核心的多肽细胞凋亡分子探针99Tcm-CP3-peptide,研究其在肺腺癌细胞系A549化疗后体内外的生物学分布及SPECT显像。 方法 采用双功能螯合法合成99Tcm-CP3-peptide,分别于标记后0、1、2、4、6 h行高效液相色谱（HPLC）法检测放射性化学纯度。对经紫杉醇化疗的肺腺癌A549细胞进行体外细胞结合实验,对照组未经化疗,测量细胞内外放射性比值（Cin/Cout）,并用流式细胞仪检测细胞凋亡率。经紫杉醇化疗的荷瘤裸鼠尾静脉注射99Tcm-CP3-peptide 3.7 MBq,分别于5、15、30、60、120、240 min测其生物学分布,并行SPECT静态显像,勾画感兴趣区（ROI）,计算肿瘤/对侧正常肌肉组织的比值（T/NT）。取显像后的肿瘤组织进行苏木精-伊红染色,观察肿瘤组织的形态学变化。两组比较采用t检验,相关性研究采用双变量相关分析。 结果 99Tcm-CP3-peptide在0、1、2、4和6 h的放射化学纯度均>97%,合成率为（64.5±5.2）%。体外细胞结合实验结果表明,经紫杉醇化疗后24h,肿瘤细胞Cin/Cout为10.27±2.02,对照组Cin/Cout为1.09±0.03,化疗组为对照组的7.3倍。对同状态的肿瘤细胞行流式细胞检测,化疗组细胞凋亡率为（75.62±2.57）%,对照组细胞凋亡率为（3.42±0.32）%,化疗组和对照组Cin/Cout与流式细胞仪检测的凋亡细胞百分比呈明显正相关（r=0.970,P<0.05）。荷瘤裸鼠体内分布实验结果显示,99Tcm-CP3-peptide在血液中清除速度较快,且主要经肾脏代谢;心脏、脾脏、肺等重要器官放射性摄取值均较低;但在肝脏中摄取稍高且代谢速度较慢;肿瘤组织摄取值在注射后1 h达到峰值[（4.26±1.03）%ID/g]。荷瘤小鼠给药后1 h即可获得清晰图像,勾画ROI显示:化疗组T/NT为3.83±0.11,显著高于对照组的1.57±0.09,两者间差异有统计学意义（t=16.19, P<0.05）。病理结果显示化疗组肿瘤组织见大量核固缩、核碎裂及凋亡细胞;对照组仅见少量核固缩、核碎裂及少量凋亡细胞。 结论 99Tcm-CP3-peptide是一种靶向caspase-3的显像剂,具有较好的生物学分布,可应用于动物模型肿瘤组织凋亡显像,在监测化疗后肿瘤细胞凋亡方面有一定的临床潜在价值。      

中国实验动物行业发展现状调查研究

本文全面客观地阐述中国实验动物行业发展现状、发展趋势,提炼了行业面临的主要问题,并提出了发展对策。通过对比分析,相对欧美国家百年积累的巨大资源优势和强大经费支持,中国整体落后较多,需利用举国体制,付出巨大努力和实现跳跃性发展才能迎头赶上。实验动物资源仍然是实验动物行业发展的基础和薄弱环节,需要国家重视并给予重点支持。本项研究可为各级主管部门制定实验动物行业发展策略提供科学依据,也可为实验动物行业本身发展提供数据参考。     

药物性肝损伤的临床特点分析

药物性肝损伤的发生因素比较复杂,发病机制并不十分清楚,肝脏损伤的表现也是各种各样。如何快速判定肝损伤是否为药物所致,以及损伤的类型和程度,是临床工作者急需解决的问题。最常用的、也是比较依赖的方法是通过实验室检查的手段进行判定。因此,我们对近期发生药物性肝损伤的患者进行生化学的统计分析,以期得到可能的规律。     

SARS动物模型技术会议在英国召开

由世界卫生组织(WHO)下属IVB项目组织的第三次SARS动物模型技术会议(Technical Meeting on SARS Animal Models)于2005年8月25-26日在英国的South Mimms召开。第一、二次SARS动物模型技术会议分别在瑞士的几内瓦(2003)和荷兰的鹿特丹(2004)举行。此次会议共有中国、美国、加拿大、英国、瑞士、荷兰、日本、澳大利亚、法国、意大利等10个国家的34位专家出席。我国有6名专家参加,分别是香港大学Patrick C.Y.Woo博士、中国医学科学院实验动物研究所秦川教授和杨志伟博士、国家食品与药品监督管理局尹洪超教授、中国药品生物制品检…     

海嘧啶对SGC-7901人胃癌细胞凋亡的影响

目的 揭示海嘧啶的抗肿瘤作用机制。方法 采用流式细胞仪测定海嘧啶对人胃癌细胞凋亡及细胞周期的影响;采用激光扫描共聚焦技术观察海嘧啶对人胃癌细胞内[Ca^2 ]i的影响及[Ca^2 ]i;变化时Ca^2 的来源。结果 海嘧啶可诱导肿瘤细胞凋亡,可升高肿瘤细胞内[Ca^2 ]i的浓度,[Ca^2 ]i升高时Ca^2 来源于细胞外钙内流和细胞内钙释放。结论 海嘧啶的抗肿瘤机制为诱导肿瘤细胞凋亡,通过开放细胞膜鲺通道和引起细胞内钙释放两条途径升高肿瘤细胞内[Ca^2 ]i,启动细胞凋亡机制,从而诱导肿瘤细胞凋亡。     

海嘧啶抗肿瘤作用的实验研究

目的 研究海嘧啶的抗肿瘤作用。方法 采用MTT实验和集落形成实验观察海嘧啶的体外抗肿瘤作用;通过海嘧啶对FC小鼠和S180、H22荷瘤小鼠瘤重和生存时间的研究,观察了海嘧啶的体内抗肿瘤作用。结果 海嘧啶对8种人癌细胞具有一定的杀伤作用,以对BGC-823、Eca-109、HCT-8细胞的抑制作用最强;对BGC-823、Eca-109、HCT-8细胞的集落形成有明显的抑制作用,以对Eca-109细胞集落形成抑制作用最强;可明显抑制FC小鼠和S180小鼠瘤体的生长,明显延长H22荷瘤小鼠的生存时间。结论 海嘧啶由中药复方和5-Fu两部分复合而成,其抗肿瘤作用与二者相比具有明显的协同作用．倬抑瘤率大幅度提高．     

海嘧啶对肿瘤细胞内[Ca2+]i的影响

目的：揭示海嘧啶诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法：采用激光扫描共聚焦技术观察海嘧啶对肿瘤细胞内[Ca^2 ]i的影响及[Ca^2 ]i变化时Ca^2 的来源,采用定磷法测定海嘧啶对肿瘤细胞膜钙泵活性的影响。结果：海嘧啶可显著升高肿瘤细胞内[Ca^2 ]i的浓度,[Ca^2 ]i升高时,Ca^2 同时来源于细胞外钙内流和细胞内钙释放。海嘧啶可显著降低肿瘤细胞膜钙泵活性。结论：海嘧啶通过升高肿瘤细胞内[Ca^2 ]i的浓度,从而启动肿瘤细胞凋亡机制,诱导肿瘤细胞凋亡;海嘧啶升高肿瘤细胞内的作用是通过开放肿瘤细胞膜钙通道,引起肿瘤细胞内钙库释放,降低肿瘤细胞钙泵活性3条途径达到的。     

科技期刊对实验动物描述要求的调查分析及其规范建议

【目的】规范生命科学研究领域及航天、航海、防原、防化等特殊领域的科学研究中,科研论文涉及实验动物科学描述规范,以保证结果的科学性和可重复性。【方法】通过文献检索、网站浏览等方式调查了40多种国内外科技期刊投稿指南中对实验动物描述的要求。【结果】国外SCI期刊对实验动物描述要求跟期刊特色密切相关,差异较大,且具有针对性。我国期刊对实验动物描述的要求相对统一,多为简单照搬,实用性不强。提出了科技论文中实验动物描述规范。【结论】各相关期刊应根据各自专业特色,把对实验动物描述的有关要求写入投稿指南,便于作者在投稿前阅读并进行符合科学的实验设计。     

SARS恒河猴动物模型比较病理学研究

目的 综合对比SARS患者和恒河猴动物模型的病理学改变，为恒河猴动物模型应用于阐明SARS病变机制等研究提供理论依据。方法 SARS病毒感染8只恒河猴，在感染后不同时间安乐死动物，应用光镜、组织化学、免疫组化法对动物的各脏器进行观察研究，并与人类SRAS患者的病理改变进行比较。结果 人类SARS患者的主要病理变化主要包括肺部病变，免疫器官损伤及全身中毒性脏器损伤三方面，恒河猴动物模型出现的病理改变基本符合人类SARS病变特点。结论 SARS病毒感染的恒河猴具有类似人类SARS的病理改变，可以作为SARS发病机制等研究的模型动物。