细胞周期G1／S期调控元件异常与卵巢癌关系研究进展

细胞周期调控需要有多个元件参与，起关键作用的在于G1／S期调控元件，包括p21，p27，p53，p16，p15，Cyclin E，Cyclin D，CDK2，CDK4和CDK6等。对卵巢癌组与正常对照组的研究常发现在卵巢癌组有p53高表达且p21低表达，或p27低表达，或p16和p15缺失，或Cyclin D1过度表达，表明这些因素与卵巢癌的发生、发展有关。对卵巢癌预后指标的研究发现p53高表达且p21缺失，或p16和p15缺失，或Cyclin D1高表达，或Cyclin E高表达与患者预后差显著相关，而p16和p15缺失组或p21低表达组常表现为对铂类化疗不敏感。关键词卵巢癌细胞周期细胞周期蛋白类     

三氧化二砷诱导人卵巢癌细胞凋亡机制的研究

目的：探讨三氧化二砷（arsenic trioxide,As2O3)诱导人卵巢癌细胞株3AO细胞凋亡的机制。方法：以人卵巢癌细胞株3AO细胞为体外实验对象。通过台盼蓝染色法，测定不同浓度As2O3作用不同时间对3AO细胞的生长抑制率；采用流式细胞仪检测法，通过碘化丙（PI）／罗丹明123（Rhodammine 123,Rh123)双重染色测定3AO细胞线粒体跨膜电位（△ψm) ；通过吖啶橙染色，荧光显微镜观察As2O3作用后3AO细胞的形态变化。结果：As2O3对3AO细胞的生长具有明显的抑制作用，且具有时间与剂量依赖性（P＜0．05）；3.0μmol/L的As2O3作用48h后3AO细胞中PI－Rh123^-细胞与对照组相比，差异有显著性（P＜0．05）；As2O3作用后，3AO细胞呈现典型的凋亡细胞形态特征。结论：As2O3通过诱导凋亡来抑制人卵巢癌细胞株细胞的生长，其机制与线粒体跨膜电位△ψm下降有关。     

三氧化二砷抑制人卵巢癌裸鼠腹腔转移瘤的形成及其机制的初步研究

背景与目的:三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)已成功地应用于急性早幼粒细胞白血病的临床化疗,并已用于治疗肝癌、结肠癌、胃癌等的实验研究.本研究探讨As2O3对人卵巢癌细胞株3AO细胞裸鼠腹腔种植转移的影响及其作用机制.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(methylthiazolyltetrazolium,MTT)法检测不同浓度As2O3作用48h对人卵巢癌细胞株3AO细胞的生长抑制率,并与顺铂(cisplatin,cDDP)进行比较.取4×106个3AO细胞接种于裸鼠腹腔,96h后随机分为5组,分别腹腔内注射生理盐水、3mg/kg顺铂及0.8、1.2、2.4mg/kgAs2O3,观察3AO细胞在各组裸鼠的成瘤率、裸鼠的死亡率及生存期;采用流式细胞术观察As2O3作用后3AO细胞中Fas、FasL、nm23基因表达的变化.结果:As2O3能明显抑制3AO细胞的生长,抑制作用呈浓度依赖性,与顺铂相比差异有显著性(P<0.05);As2O3能明显降低3AO细胞的裸鼠成瘤率及荷瘤鼠的死亡率,延长荷瘤鼠的生存期,与顺铂相比差异有显著性(P<0.05);As2O3使裸鼠腹腔种植瘤Fas基因及nm23基因的表达水平升高(P<0.05),而对FasL基因的表达无影响(P>0.05).结论:As2O3对人卵巢癌裸鼠腹腔种植具有明显的抑制作用,其机制可能与Fas基因及nm23基因的过度表达有关.     

三氧化二砷诱导人卵巢癌细胞凋亡机制的研究

目的 :探讨三氧化二砷 (arsenictrioxide ,As2 O3 )诱导人卵巢癌细胞株 3AO细胞凋亡的机制。方法 :以人卵巢癌细胞株 3AO细胞为体外实验对象。通过台盼蓝染色法 ,测定不同浓度As2 O3 作用不同时间对 3AO细胞的生长抑制率 ;采用流式细胞仪检测法 ,通过碘化丙啶 (PI) /罗丹明 12 3(Rho damine12 3,Rh12 3)双重染色测定 3AO细胞线粒体跨膜电位 (△Ψm) ;通过吖啶橙染色 ,荧光显微镜观察As2 O3 作用后 3AO细胞的形态变化。结果 :As2 O3 对 3AO细胞的生长具有明显的抑制作用 ,且具有时间与剂量依赖性 (P <0 0 5 ) ;3 0 μmol/L的As2 O3 作用 4 8h后 3AO细胞中PI- Rh12 3- 细胞与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;As2 O3 作用后 ,3AO细胞呈现典型的凋亡细胞形态特征。结论 :As2 O3 通过诱导凋亡来抑制人卵巢癌细胞株细胞的生长 ,其机制与线粒体跨膜电位△Ψm下降有关。     

产科瘘的诊治和预防

产科瘘的发病率在我国已经很低,但在非洲和南亚等有的国家发病率还较高,中国援外医生了解此病的诊治和预防有一定的参考价值。现就产科瘘的发病原因、诊断分类、手术技巧、术后管理及预防作一综述。     

SELDI-TOF-MS技术在妇科恶性肿瘤早期诊断中的应用

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)是近年出现的蛋白质研究新技术.其综合了蛋白芯片和质谱技术的优点,可通过蛋白表达图谱模式快速筛选肿瘤标志物,进行肿瘤的早期诊断.卵巢癌、宫颈癌及子宫内膜癌等研究资料显示,其敏感性和特异性均优于传统的肿瘤诊断方法,在妇科肿瘤早期诊断方面有巨大应用前景.     

人脐血来源树突状细胞体外扩增及诱导特异性抗宫颈癌免疫应答

目的:研究脐血来源树突状细胞(DC)体外扩增及诱导特异性抗宫颈癌细胞的免疫效应。方法:自人脐血分离单核细胞诱导DC,制备宫颈癌细胞系CaSki冻融物作为抗原负载DC。ELISA法检测成熟DC上清中IL-12的含量,混合淋巴细胞反应(MLR)测定DC体外刺激T细胞增殖的能力,MTT法检测抗原负载DC激活的CTL对宫颈癌细胞CaSki和HeLa的杀伤作用。结果:与未经抗原负载的DC相比,抗原负载的DC刺激同种异体T细胞增殖和IL-12分泌的能力均有提高(P<0·05),激活的CTL对CaSki细胞有特异性杀伤,而此CTL对HeLa细胞无特异性杀伤。结论:宫颈癌细胞CaSki冻融抗原负载DC激活的CTL可诱导出特异性杀伤宫颈癌细胞的免疫效应。     

宫颈癌及子宫内膜癌细胞系中hTERT启动子活性的研究

目的 :探讨Hela及HHUC细胞系中hTERT启动子的活性及其与hTERTmRNA表达和端粒酶活性之间的关系。方法 :将hTERT核心启动子基因转入Hela、HHUC细胞系、人正常皮肤表皮细胞及子宫内膜上皮细胞中 ,检测细胞系hTERT启动子的活性、hTERTmRNA表达水平及端粒酶活性。分别以HEK2 93细胞系作为阳性对照 ,HELF细胞系作为阴性对照。结果 :细胞系Hela、HHUC、人正常皮肤表皮细胞及正常子宫内膜上皮细胞中的hTERT启动子活性分别为 2 0 1%、14 9%、0 3%和 0 5 % ;hTERTmRNA相对表达水平分别为 0 6 3、0 5 1、0和 0 ;端粒酶活性分别为 0 393、0 387、0 14 4和 0 15 2。结论 :宫颈癌细胞系及子宫内膜癌细胞系中hTERT启动子活性、hTERTmRNA表达水平和端粒酶活性均特异性增高 ,而在正常角化细胞及子宫内膜上皮细胞中则被抑制或不表达。hTERT启动子活性水平与hTERTmRNA表达水平和端粒酶活性之间有显著相关性     

反义HIF-1α基因联合血管抑素基因对人卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的：研究反义缺氧诱导因子-1α（antisense hypoxia inducible factor-1α,aHIF-1α）基因联合血管抑素（angiostatin）基因对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的协同治疗作用。方法：使用人卵巢癌细胞株SKOV3建立裸鼠皮下移植瘤模型。将荷瘤裸鼠随机分为4组,分别注射空质粒PcDNA3、PcDNA3-Angiostatin、PcDNA3B-aHIF-1α、PcDNA3-Angiostatin＋PcDNA3B-aHIF-1α。观察各组动物的肿瘤生长曲线,检测各组肿瘤组织Angiostatin、血管内皮生长因子（VEGF）、HIF-1α的表达和微血管密度（MVD）,利用TUNEL染色法行原位细胞凋亡分析。结果：Angiostatin基因联合aHIF-1α基因治疗组裸鼠的肿瘤生长受到明显抑制,肿瘤组织中HIF-1α蛋白局部低表达,MVD（13.6±2.3）明显低于Angiostatin基因治疗组（24.5±2.7）,VEGF表达低于各单独治疗组和对照组,细胞凋亡指数（5.32±0.62）高于Angiostatin基因治疗组（2.89±0.45）、aHIF-1α基因治疗组（2.98±0.51）和对照组（1.56±0.41）。结论：Angiostatin基因联合aHIF-1α基因治疗卵巢癌裸鼠皮下移植瘤可以产生协同抑制作用,可在一定程度上解决肿瘤的抗血管生成治疗的耐药性问题。     

IL-12协同B7-1诱导机体抗肿瘤免疫的实验研究

目的研究白细胞介素-12(Interleukin-12,IL-12)协同共刺激分子B7-1,联合诱导机体抗肿瘤免疫对大鼠卵巢上皮癌的治疗作用并探讨其机理.方法用携带有小鼠IL-12和B7-1的逆转录病毒表达载体感染大鼠卵巢癌细胞株NuTu-19,建立高表达细胞株NuTu-19/IL-12、NuTu-19/B7-1及双基因共表达细胞株NuTu-19/IL-12-B7-1,并以转染空载体pLXSN的细胞NuTu-19/Neo为对照.用经丝裂霉素C处理的各种基因修饰的肿瘤细胞免疫动物,观察卵巢癌腹腔转移模型动物生存期,及其诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocyte,CTL)杀伤活性的作用.结果经各种基因修饰的肿瘤细胞免疫后,大鼠脾淋巴细胞增殖能力有不同程度的提高,CTL杀伤同源肿瘤细胞的活性明显增强,IL-12和B7-1基因联合修饰的肿瘤细胞免疫动物对模型动物生存期的延长具有显著意义(P＜0.05).结论IL-12和B7-1基因联合修饰的肿瘤细胞可以刺激机体CTL增殖、成熟,增强CTL对肿瘤细胞的识别和杀伤活性等,两者联合具有明显的协同效应.联合免疫基因治疗作为一种新的卵巢癌治疗方法,值得深入研究.