WT-1和EGR-I基因在肾胚瘤中的表达

肾胚瘤是一种较常见的儿科实体肿瘤 ,该肿瘤的遗传学基础比较复杂 ,现已发现有多个染色体位点与其发生有关 ,其一是定位于染色体 11p13的抑癌基因WT -1,据统计约 5%～ 2 5%的肾胚瘤发生WT -1基因的改变 ,WT -1蛋白在细胞增殖、分化及凋亡等方面均有一定作用〔1,2〕。通过比较WT-1锌指区的氨基酸序列和其它锌指蛋白的氨基酸序列发现 ,WT -1和EGR -I有着高度相似性 ,现认为WT -1可识别并结合于EGR -IDNA一致序列 (GCGGGGGCG) ,WT -1蛋白能抑制促进细胞生长的EGR -I基因的表达 ;细胞内WT -1和EGR -I蛋白的浓度维持平衡对于细…     

CUL4A促进人胃癌细胞增殖、侵袭和转移的机制

目的:探讨CUL4A基因在胃癌增殖、侵袭和转移中的机制。方法:siRNA干扰胃癌SCG-7901细胞中CUL4A基因的表达;CCK-8法检测各组细胞的增殖情况;Transwell小室观察各组细胞的侵袭能力;Annexin-V-FITC/PI法检测各组细胞的凋亡情况,分析CUL4A对细胞凋亡的影响;Real time-PCR分析上皮间质转化（EMT）相关基因的表达情况。结果:siRNA有效干扰了胃癌SCG-7901细胞中CUL4A基因的表达（P＜0.05）;干扰CUL4A基因有效抑制了胃癌细胞的增殖（P＜0.05）;Transwell小室结果显示,干扰CUL4A基因阻碍了SCG-7901细胞的侵袭能力（P＜0.05）;细胞凋亡结果显示,干扰CUL4A基因促进了细胞的凋亡（P＜0.05）;Real time-PCR结果显示,干扰CUL4A基因后Snail mRNA和ZEB1 mRNA的表达降低（P＜0.05）,E-cadherin mRNA的表达升高（P＜0.05）。结论:CUL4A基因促进胃癌细胞的增殖,抑制凋亡和侵袭,且影响了EMT相关基因的表达。     

沉默AFAP-1L2对胃癌MKN-28细胞的生物学影响

目的:探讨AFAP-1L2对胃癌MKN-28细胞的生物学影响。方法:siRNA干扰AFAP-1L2;CCK-8检测沉默AFAP-1L2后细胞的增殖情况;免疫荧光分析各组细胞的凋亡率;Transwell小室观察细胞的侵袭情况;Real time-PCR检测细胞中基因的表达情况。结果:siRNA有效干扰了AFAP-1L2的表达;沉默AFAP-1L2细胞组的细胞增殖明显受到抑制（P<0.05）;siRNA-AFAP-1L2组细胞的凋亡率与其他组比较,凋亡率增高;细胞的侵袭情况,沉默AFAP-1L2明显抑制了细胞的侵袭,与其他两组比较差异显著（P<0.05）;ERK1/2、p-ERK1/2和Bcl-2的表达水平,均是siRNA-AFAP-1L2细胞组低于其他两组（P<0.05）。结论:沉默AFAP-1L2抑制了胃癌MKN-28细胞的增殖,诱导细胞的凋亡,抑制了细胞的侵袭和抗凋亡基因的表达,AFAP-1L2可以通过ERK1/2途径发挥作用,为肿瘤的靶向治疗提供一定的理论依据。     

P21WAF1/CIP1、P16蛋白表达与人脑神经胶质瘤的相关分析

背景与目的：探讨P21^WAF1/CIP1、P16、两种抑癌基因与人脑神经胶质瘤恶性程度的关系。材料与方法：采用SABC免疫组织化学方法对98例人脑胶质瘤组织及12例止常脑组织标本中P21^WAF1/CIP1和P16的表达进行检测,并进行相关分析。结果：P21^WAF1/CIP1和P16阳性表达率在人脑胶质瘤中分别为58．16％和42．86％,与正常脑组织中的表达情况差异有统计学意义;P21^WAF1/CIP1、蛋白和P16蛋白阳性表达率均随着胶质瘤的恶性程度的增高而降低;P21^WAF1/CIP1蛋白和P16蛋白可协同表达。结论：P21^WAF1/CIP1与P16蛋白的阳性表达率及协同表达率可在一定程度上反映胶质瘤细胞的恶性生物学行为,可以作为一项判断其恶性程度的有效指标。     

胃癌细胞来源的exosomes诱导Jurkat T细胞凋亡及其机制初探

目的 研究胃癌细胞来源的exosomes对JurkatT细胞凋亡的影响,初步探讨NF-κB通路在此过程中的作用.方法 采用离心超滤和蔗糖密度梯度超速离心的方法从胃癌SGC7901细胞的上清液中分离出胃癌来源的exosomes.透射电子显微镜下观察exosomes形态.台盼兰拒染法检测细胞增殖能力,瑞氏-姬姆萨染色检测细胞凋亡,Western blot检测蛋白的表达.结果 透射电子显微镜下观察胃癌SGC7901细胞来源的exosomes具有特征性的盘状结构,由双层膜构成,它们的直径在30～100nm之问.Exosomes能抑制Jurkat T细胞增殖,并能诱导Jurkat T细胞凋亡,在此过程中伴随有p-IKK表达的下调.结论 胃癌细胞来源的exosomes能抑制Jurkat T细胞凋亡,其机制可能与抑制NF-κB通路有关.     

一种经济高效的人外周血NK细胞纯化方法的建立

目的:建立一种经济并且纯化率高的人外周血NK细胞分离方法.方法:对用RosetteSepR法直接从全血分离NK细胞的方法进行改进,先从全血中获得单个核细胞(PBMC),与红细胞按比例混合后再进行分离,利用流式细胞仪检测纯度,并且用CCK-8法检测NK细胞对K562细胞的杀伤活性.结果:改进后分离每毫升血所需RosetteSep抗体复合物用量仅为直接分离法的1/50;NK细胞的纯度由纯化前的(11.02±3.15)%提高到(96.52±2.42)%,细胞回收率为(70.24±10.51)%;纯化的NK对靶细胞K562有较强的杀伤作用,与直接分离法比较杀伤活性差异无统计学意义(P＞0.05).结论:改进后的方法可以获得高纯度的NK细胞,该分离方法不影响NK的杀伤活性,同时极大的降低了分离成本.初步建立了一种经济高效,快速简便,并且纯化率高的人外周血NK细胞纯化方法.     

奥沙利铂通过上调死亡受体表达增强TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的实验研究

目的:研究奥沙利铂对TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的影响,探讨死亡受体5(DR5)在TRAIL诱导细胞凋亡中的作用.方法:采用MTT法测定细胞活力、采用流式细胞仪检测细胞凋亡,采用Western blot检测DR5蛋白表达.结果:100ng/ml的TRAIL导致轻度的增殖抑制,诱导不超过5%的细胞凋亡;TRAIL(100ng/ml)联合奥沙利铂(23.44μg/ml)引起明显的细胞增殖抑制和细胞凋亡(P＜0.05),TRAIL没有明显改变死亡受体5(DR5)的表达,而23.44 μg/ml奥沙利铂作用胃癌细胞24小时后,明显上调了DR5的表达.结论:奥沙利铂通过上调DR5的表达增强TRAIL诱导的胃癌细胞凋亡.     

Src激酶在胃癌细胞来源的exosome促进肿瘤细胞增殖中的作用

目的:研究胃癌细胞来源的外泌体(exosome)对肿瘤细胞增殖的影响,初步探讨Src蛋白激酶在此过程中的作用.方法:采用离心超滤和蔗糖密度梯度超速离心的方法从胃癌SGC7901细胞的上清液中分离出胃癌细胞来源的exosome.透射电子显微镜下观察exosome形态.MTT法检测细胞增殖能力,Western blot检测...     

PI3K/Akt和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞来源的Exosome促进同源肿瘤细胞增殖中的作用

目的:研究胃癌细胞来源的Exosome对同源肿瘤细胞增殖的影响,初步探讨PI3K/Akt和MAPK/ERK信号转导通路在此过程中的作用.方法:采用离心超滤和蔗糖密度梯度离心的方法从胃癌MGC803细胞的上清液中分离出胃癌细胞来源的Exosome.应用透射电子显微镜观察Exosome的形态,MTT检测细胞活力,Weste...     

1994～2001年我院科研论文发表情况分析

我们拟对1994～2001年我院科研论文发表的变化趋势及与年龄、职称等关系,在核心期刊、源期刊和被BA、CA收录所占比重的变化势态等进行分析,为不断提高我院科研论文发表的数量和质量及有针对性地对不同年龄段和职称段医护人员进行促进提供理论依据.