胃癌组织中血管内皮生长因子的表达及临床意义

肿瘤的血管形成在肿瘤生长、浸润及转移进程中发挥重要作用。血管内皮生长因子 (VEGF)主要由肿瘤细胞分泌和激活 ,能促进肿瘤血管生成 ,加速肿瘤的生长、浸润及转移进程。VEGF是近来发现的最重要的血管生成调节因子 [1] ,研究证实 ,消化道肿瘤、膀胱癌、造血系统肿瘤均存在 VEGF过度表达。我们采用免疫组织化学染色技术检测了 1 0 0例胃癌患者癌组织中 VEGF的表达情况 ,旨在探讨 VEGF与胃癌病理因素之间的关系。1　资料与方法1 .1　一般资料　取 1 996年 1月至 1 999年 6月在我院行手术治疗的 1 0 0例胃癌患者的癌组织标本 ,均经病…     

某部五昼夜航渡驻泊训练卫勤保障的特点与对策

目的 摸索登陆兵长时间航渡驻泊训练卫勤保障的主要特点和对策。方法 与部队一起参加训练,边工作、边积累、边总结。结果 通过实践总结出登陆兵长时间航渡驻泊训练卫勤保障的4个特点：(1)艇多面广,指挥协调需加强;(2)环境恶劣,卫勤保障任务重;(3)远离码头,医疗后送难度大;(4)单艇保障,提高独立卫勤保障能力。针对这些特点,采取了4点相应的对策：(1)全面筹划,建立多级网状指挥系统;(2)突出重点,降低有害因素影响;(3)多方保障,保证医疗救治渠道畅通;(4)立足现有,提高一线保障能力。结论 根据登陆兵长时间航渡驻泊训练卫勤保障特点,采取的这4点措施是切合实际、行之有效的,从而保障了部队训练任务的完成,也为相关部队组织航渡驻泊训练的卫勤保障工作提供了参考。     

利用RNAi技术抑制ARPC2基因表达的研究

目的 构建pSUPER-ARPC2表达载体,并在真核细胞中进行表达,验证ARPC2基因表达是否受到抑制。方法 设计特异性针对ARPC2基因的寡核苷酸序列,退火后利用常规酶切、连接方法将其重组至pSUPER basic载体中。对阳性克隆进行酶切和测序鉴定后,转染HEK293细胞,利用RT-PCR和Western blot检测ARPC2基因的表达情况。结果 构建的pSUPER-ARPC2载体导入HEK293细胞时,ARPC2基因的表达受到抑制,蛋白合成减少。结论 成功构建了ARPC2的RNAi表达载体,并证实其能对ARPC2基因的表达产生抑制作用,为进一步研究ARPC2的生理功能提供了重要的实验材料。     

人eNOS启动子不同序列驱动的红色荧光蛋白载体的构建与表达

目的:为了研究人血管内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)启动子的功能,构建在哺乳动物细胞中表达的人eNOS启动子不同区段驱动的红色荧光蛋白报告基因载体。方法:从重组pDseNOSRed载体上将eNOS启动子的不同长度DNA序列亚克隆至红色荧光蛋白载体pDsRed1-1上,经PCR、酶切和DNA测序鉴定,将重组载体pDsF1033Red,pDsF494Red和pDsF166Red转染NIH3T3细胞,在倒置荧光显微镜下观察它们在细胞内的表达情况。结果:PCR、酶切和DNA测序结果均表明重组载体pDsF1033Red,pDsF494Red和pDsF166Red的构建正确,这些载体能在NIH3T3细胞中有效表达。由eNOS启动子不同区段驱动表达的95％以上的红色荧光蛋白均匀分布于整个细胞,转染后48-60h开始出现,96-144h为红色荧光蛋白(RFP)的表达高峰,RFP的荧光在144h最强,168h后红色荧光逐渐消退,21d后仍有很少量红色荧光残留。RFP的表达量和荧光强度明显低于强启动子p_CMVIE驱动的RFP。结论:成功构建了eNOS启动子不同区段驱动的红色荧光蛋白报告基因载体,它们能在哺乳动物细胞中有效表达,静息状态下呈现弱转录活性,为研究人eNOS启动子不同区及其顺式调控元件的作用提供了实用而又方便的工具。     

蛋白磷酸酶对丝裂原激活的蛋白激酶信号通路的调节

丝裂原活化蛋白激酶是非常重要的生长信号调节蛋白,是细胞内一类丝氨酸 /苏氨酸蛋白激酶。蛋白磷酸酶通过底物的特异性分为酪氨酸特异性磷酸酶、丝氨酸 /苏氨酸特异性磷酸酶、双位点特异性 (苏氨酸 /酪氨酸 )磷酸酶。其中酪氨酸特异性磷酸酶和双位点特异性磷酸酶的非催化性氨基末端介导的特异性蛋白 蛋白相互作用在底物特异性中起关键作用,它们通过与不同底物形成复合物而使蛋白激酶去磷酸化失活,从而对各种蛋白激酶活性进行调节。     

pNTAP-PRAK真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达

目的: 构建pNTAP-PRAK真核表达质粒,并建立其稳定表达的HEK293细胞系。方法: 将人的PRAK亚克隆至串联亲和纯化(tandem affinity purification, TAP)载体pNTAP质粒上,构建成重组质粒pNTAP-PRAK,转化该重组质粒至感受态大肠杆菌DH5α,阳性克隆进行PCR、酶切及DNA测序验证正确后,利用PolyFect脂质体介导将其转染至HEK293细胞中,再通过G418筛选建立稳定表达TAP tag-PRAK融合蛋白的HEK293细胞系;利用Western blotting和细胞免疫荧光标记法检测融合蛋白TAP tag-PRAK的表达及细胞内定位情况。结果: 重组真核表达载体构建正确,该重组质粒能在HEK293细胞中稳定表达,表达产物TAP tag-PRAK主要分布在核内。结论: 成功构建pNTAP-PRAK真核表达载体并建立了其稳定表达的HEK293细胞系,TAP标签未对PRAK定位产生明显影响。     

毛冬青叶的化学成分研究

目的 研究毛冬青Ilex pubescens叶的化学成分.方法 采用正相硅胶、反相ODS、Sephadex LH-20等柱色谱及半制备高效液相色谱法进行分离纯化,并通过理化性质与光谱分析法鉴定化合物的结构.结果 从毛冬青叶70％乙醇提取物中分离鉴定了16个化合物,分别为大豆苷元(1)、染料木苷(2)、山柰酚-3-O-β-龙胆二糖苷(3)、山柰酚-3-O-β-刺槐双糖苷(4)、山奈酚-3-O-β-半乳糖苷(5)、槲皮素-3-O-β-龙胆二糖苷(6)、3β,19α-二羟基齐墩果-12-烯-24,28-二酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、毛冬青皂苷A1(8)、毛冬青素A(9)、2-羟甲基-3-咖啡酰氧-1-丁烯-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)、2-咖啡酰甲基-3-羟基-1-丁烯-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(11)、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸(12)、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸(13)、1,5-O-二咖啡酰基奎宁酸(14)、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸(15)、2-苯乙基-O-α-L-阿拉伯糖基(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(16).结论 化合物1～6、12～16为首次从该植物中分离得到.     

周剂量紫杉醇对局部晚期食管癌的放疗增敏作用

目的探讨周剂量紫杉醇对局部晚期食管癌的放疗增敏作用。方法将44例不宜手术的局部晚期食管癌患者随机分为放疗增敏组和单纯放疗组,每组22例。2组放疗方法相同,均采用常规设野,常规分割外照射,总剂量60—66Gy。放疗增敏组在放疗同期每周接受1次紫杉醇（40mg·m-2）化疗,连用6周。结果44例患者均可评价疗效,放疗增敏组与单纯放疗组有效率分别为86．4％和63．6％（P〈0．05）;1a局部控制率分别为77．3％和50．0％（P〈0．05）;1a无复发生存率分别为72．7％和45．5％（P〈0．05）;1a生存率分别为81．8％和54．5％（P〈0．05）。2组毒副反应相似,患者均可耐受。结论周剂量紫杉醇对局部晚期食管癌放疗具有明显的增敏作用,能提高患者的局部控制率和生存率,且毒副反应未明显增加。     

鼻咽癌放射治疗后原发肿瘤体积变化的分析

目的观察鼻咽癌放疗后原发肿瘤体积的变化并分析其相关因素。方法回顾性分析46例接受放射治疗的鼻咽癌患者的临床资料,主要包括患者的年龄、性别、病理类型和生长类型、原发肿瘤体积（VO）以及放射治疗结束时残留肿瘤体积（V70）、原发肿瘤最大截面积、T分期和N分期、照射剂量等因素。采用二项分类Logistic回归分析法分析这些因素和放疗50Gy时肿瘤退缩率的关系。结果分析结果显示,肿瘤病理类型和生长类型、T分期、N分期、照射剂量与肿瘤消退有密切关系（P〈0．05）。结论肿瘤体积的变化可较好的反映放疗的效果,明确肿瘤消退的相关因素,可以指导临床治疗,预后判断,提高患者生存率。