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51.
稳定表达外源RbAp46基因的U937白血病细胞株的建立和初步特性分析 总被引:3,自引:0,他引:3
为建立RbAp46基因稳定转染的白血病细胞株,对悬浮培养的白血病细胞的电穿孔条件进行优化之后,运用电穿孔介导的转基因技术,在低电压、高电容的条件下将含RbAp46基因cDNA的表达质粒转染白血病细胞系U937,经G418筛选获得稳定转染的克隆,用PCR检测RbAp46基因的整合,用Western blot分析蛋白质的表达水平,然后筛选出表达外源RbAp46蛋白水平最高的亚克隆。用台盼蓝拒染法判定细胞活力,用细胞计数判定细胞生长速率。结果发现,转染RbAp46基因的U937细胞的生长速率比对照组低50%左右。结论:在白血病细胞系U937中建立了稳定表达外源RbAp46基因的细胞株,并发现过表达的外源RbAp46基因能抑制U937细胞的增殖。 相似文献
52.
子痫前期合并心功能衰竭(心衰)是指在重度子痫前期疾病基础上发生的,以心肌损害为特征的左心衰竭症候群,约占妊娠合并心脏病的5%,重度子痫前期患者中有4%发生此病^[1],是导致孕产妇及围生儿病率和病死率的重要原因,其发病隐匿,病情凶险,加上基层医院孕期保健工作相对薄弱,故早期诊断、正确处理极为重要,现就我院2004年7月至2005年7月发生子痫前期合并心衰58例病例进行临床分析,报道如下。 相似文献
53.
目的:研究白血病患者骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)与白血病SHI—1细胞互相接触对后者侵袭能力的影响及其作用机制。方法:收集白血病患者BMSC及其条件培养液,采用RT—PCR法检测细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)在细胞SHI-1和BMSC中的表达。按1:10比例将BMSC与SHI-1细胞进行混合,接种于铺有matrigel基质胶的Transwell小室内,并加入终浓度为2μg/mL的CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor4,CXCR4)或EMMPRIN功能阻断抗体,或以BMSC条件培养液进行侵袭实验。采用实时定量PCR法检测共同培养前后SHI-1细胞的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9、基质金属蛋白酶组织抑制因子2(tissue inhibitor of metalloproteinase 2,TIMP-2)和CXCR4 mRNA表达的改变。应用ELISA法测定无血清培养上清液中基质细胞衍生因子1(stromal cell—derived factor1,SDF-1)的含量。结果:SHI-1和BMSC细胞均表达EMMPRIN。SHI-1细胞与BMSC共培养后,其侵袭能力有显著提高,但能被CXCR4和EMMPRIN抗体阻断,条件培养液未明显提高SHI-1细胞的侵袭能力。共同培养后,SHI-1细胞的MMP-2、MMP-9、TIMP-2和CXCR4 mRNA以及无血清上清液中SDF-1的含量均有显著提高。结论:白血病患者的BMSC与白血病SHI—1细胞接触时,前者可通过其细胞表面的多种分子途径来诱导SHI-1细胞跨matrigel侵袭能力的提高,这可能是导致白血病细胞向髓外浸润的一种重要机制。 相似文献
54.
55.
目的研究基质金属蛋白酶2(MMP2)在鼻咽癌组织中的表达及其与鼻咽癌细胞生物学行为的关系。方法采用免疫组化Elivision Plus二步法对50例鼻咽癌组织、15例炎性鼻咽黏膜组织的MMP2表达活性进行检测与比较。结果鼻咽癌组织中的MMP2表达显著高于炎性鼻咽黏膜组织(P〈0.05),并随鼻咽癌临床浸润分期的升高和淋巴结转移的发生而上调,差异具有统计学意义(P〈0.01)。结论MMP2在鼻咽癌细胞突破基底膜向外扩散及转移中可能起着重要作用,对于判断鼻咽癌细胞的侵袭性及估计其预后中有一定意义。 相似文献
57.
目的:简要总结近年来国内外儿童肝母细胞瘤(HB)诊治的进展,以期提高对儿童HB的诊治水平。方法:网络检索PubMed、Springer、中国知网等数据库中的相关文献,就近年来儿童HB的治疗进展作一介绍。结果:儿童恶性肿瘤不是临床常见疾病,其中HB更少见。手术切除曾是治疗儿童HB的主要手段,但约有80%患儿确诊时已无法手术切除,预后较差,长期生存率仅20%~30%。随着新辅助化疗的引入,HB的治疗已由传统的手术治疗转变为以手术、化疗为基础的多学科综合性治疗,可切除性大幅提高,患儿长期生存率也因此明显提高。结论:儿童HB临床少见,常无特异性临床症状,术前依据年龄、AFP水平及CT增强扫描可提高其诊断率。手术切除结合化学治疗是其主要治疗方式,经过多学科综合性治疗后预后良好。随着手术技术的进步及化疗方案的进一步优化,儿童HB的预后将进一步改善。 相似文献
58.
丝/苏氨酸蛋白磷酸酶是一种调节蛋白质可逆磷酸化的酶蛋白,在细胞代谢、DNA复制、基因转录、RNA剪接、信号转导、细胞分化及凋亡、癌基因转化等细胞活动过程中发挥重要作用。该文着重对寄生虫的丝/苏氨酸蛋白磷酸酶的研究进展作简要综述。 相似文献
59.
目的探讨酪氨酸激酶抑制剂AG-490对人慢性髓系白血病急变细胞株K562细胞的增殖及凋亡的影响。方法采用MTT法观察AG-490在体外对人慢性髓系白血病急变细胞株K562细胞增殖的影响,光学显微镜下观察AG-490对K562细胞形态的变化,流式细胞术检测AG-490对K562细胞凋亡及细胞周期的影响,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及实时荧光定量PCR技术检测AG-490作用后K562细胞bcr/abl融合基因及凋亡相关基因c-myc mRNA的表达水平。结果 AG-490可明显抑制K562细胞的增殖,并随药物作用时间的延长和浓度的增加,抑制作用越明显(P〈0.05);AG-490可使细胞周期阻滞于G1期,促使其凋亡(P〈0.05)。AG-490作用于K562细胞48 h后bcr/abl融合基因的表达无明显改变(P〉0.05),而c-myc的表达水平明显降低(P〈0.05)。结论 AG-490可能通过阻断JAK2信号通路而下调c-myc的表达,使K562细胞阻滞于G1期,从而抑制K562细胞增殖,促使其凋亡。 相似文献
60.
大多数费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ ALL)患者在使用酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗后常表现为复发时间短及易出现ABL激酶区突变现象.为进一步研究Ph+ ALL患者使用TKI治疗后易复发特点,本研究采用直接测序法检测了35例TKI耐药Ph+ALL患者ABL激酶区突变.结果发现,77.1%(27/35)患者存在ABL激酶区突变,其中T315I突变患者占ABL激酶区突变患者55.6%,特别是首次发现G∶C→A∶T突变Ph+ ALL患者占总ABL激酶区突变Ph+ ALL患者77.8% (21/27),包括T315I、E255K和E459K.其次,8例具有两种或两种以上ABL激酶区突变Ph+ ALL患者染色体均为复杂核型,5例染色体由初诊单纯t(9;22)进展为复杂核型的TKI耐药Ph+ ALL均出现ABL激酶区突变;并且,尿嘧啶-N-糖基化酶2(UNG2)在耐药Ph+ ALL组中转录水平表达显著低于初诊组,具有统计学差异(P<0.05),而细胞核内UNG2缺失能增加G∶C→A∶T突变几率.结论:中国人群TKI耐药Ph+ ALL具有高比例ABL激酶区G∶C→A∶T突变和高度基因组不稳定性.耐药Ph+ ALL患者低表达UNG2可能是耐药Ph+ ALL患者发生高比例ABL激酶区G∶C→A∶T突变的因素之一. 相似文献