伴淋系抗原阳性表达的急性髓细胞性白血病的临床及生物学特征研究

对16例伴淋系抗原阳性表达的急性髓细胞性白血病（ly AML）的临床及生物学特征研究发现,与无淋系抗原阳性表达的AML（ly－AML）有所不同。ly AML的发病率为165％,其中T系10例.B系2例,T、B混合4例。14例有染色体异常,以t（8;21）多见。ly AML对常规化疗反应差,加用对ALL的化疗药物对缓解有帮助,但CR率、CR期及生存期较ly－AML低,预后差,多死于颅内出血及严重感染。     

急性单核细胞白血病免疫表型研究

目的　探讨急性单核细胞白血病（Ｍ５）的免疫表型特征及其诊断价值。方法　采用一组系列相关单克隆抗体和流式细胞术及间接免疫荧光技术对６０ 例ＦＡＢ分型拟诊为Ｍ５ 的患者进行免疫表型分析。结果　４ 例诊断为急性巨核细胞白血病,５ 例为急性淋巴细胞白血病;５１ 例最后诊断为Ｍ５ 的患者中,免疫分型显示８％ 裸型,４９％ 表达ＣＤ３４ ,髓系标志以ＣＤ１３ 表达最高,其次为ＣＤ３３ 和ＣＤ１４,分别有２４ ％ 和１８％ 的患者表达Ｔ 系和Ｂ系相关抗原。结论　免疫分型对于急性单核细胞白血病的诊断具有重要价值     

4例无染色体特殊变化的急性早幼粒细胞白血病的临床和实验观察

４例无染色体特殊变化的急性早幼粒细胞白血病的临床和实验观察王阳夏学鸣薛永权陆定伟近年来，急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）成为白血病中研究的热点，原因在于其显著的两大特点［１］：（１）可以通过诱导剂－全反式维甲酸而不是化疗获得缓解。（２）原始细胞中含有一...     

弥散性血管内凝血的诊断与治疗

弥散性血管内凝血(disseminated intravascular coagulation,DIC)是一种可由多种原发病引起的获得性出血综合征。其特征为微循环内广泛形成微血栓、血小板和凝血因子被大量消耗,并可发生继发性纤维蛋白溶解和微循环障碍,临床上导致出血、栓塞、休克及溶血等表现。DIC病情复杂,进展迅速,预后凶险,现简述如下。     

应用Southern 印迹杂交法检测转移基因在宿主细胞中的整合

目的　应用Southern印迹杂交法（Southernblot）证实转移基因整合至宿主细胞基因组DNA。方法　酚氯仿法提取基因转导的PA317/AIM及K562/AIM细胞基因组DNA,以聚合酶链反应（PCR）扩增转移基因片段;随机引物法标记     

醛脱氢酶基因转移介导的环磷酰胺耐受性研究

醛脱氢酶基因 (ＡＬＤＨ1)能氧化环磷酰胺 (ＣＴＸ)的中间代谢产物醛磷酰胺 ,形成无毒的羧基磷酰胺 ,发挥对ＣＴＸ的解毒作用。我们利用逆转录病毒介导ＡＬＤＨ1转染人造血细胞系Ｋ5 6 2 ,体外实验观察ＡＬＤＨ1基因转移过表达与ＣＴＸ耐受程度间的关系。一、材料和方法1.主要试剂 :Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ转染试剂购自ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｎｈｅｉｍ公司 ;4 氢过氧化ＣＴＸ(4 ＨＣ)由美国Ｄｕｋｅ大学癌症研究中心ＳｕｓａｎＬｕｄｅｍａｎ博士惠赠 ;Ｇ4 18、总ＲＮＡ试剂ＴＲＩｚｏｌ、Ｍ ＭＬＶ逆转录酶为ＧＩＢＣＯ ＢＲＬ…     

痰液癌基因突变的检测在肺癌诊断中的应用

目的从分子生物学检测角度来寻求敏感的肺癌诊断新方法。方法应用多聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合限制性长度片段多态性分析法（ＲＦＬＰ）及免疫组化技术（ＩＨＣ），检测６２例肺癌和３４例肺部良性疾病患者痰标本中ｋｒａｓ、ｐ５３基因的突变状况，检测结果与组织学、脱落细胞学诊断进行对比分析。结果肺癌痰标本的脱落细胞学敏感性为６１％、阴性预计值（ＮＰＶ）为５９％；ｐ５３阳性表达的敏感性为７７％、ＮＰＶ为６６％；ｋｒａｓ变异阳性的敏感性为３４％、ＮＰＶ为４２％；ｐ５３、ｋｒａｓ和痰脱落细胞学联合检测：敏感性提高至９２％（Ｐ＜０．０５）、ＮＰＶ为８４％（Ｐ＜０．０５）。２４例痰细胞学假阴性痰标本中ｐ５３或ｋｒａｓ变异阳性１７例（７１％）。结论痰标本ｐ５３、ｋｒａｓ的联合检测可增加痰检的敏感性，补充和提高脱落细胞学的诊断价值。     

急性非淋巴细胞白血病P-糖蛋白表达及排出活性检测的临床意义

目的探讨成人初治急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）Ｐ糖蛋白（Ｐｇｐ）表达及罗丹明１２３排出活性（Ｒ１２３Ｅ）与预后的关系。方法流式细胞术检测ＡＮＬＬ白血病细胞Ｒ１２３Ｅ及Ｐｇｐ表达。结果Ｒ１２３Ｅ＋率及Ｐｇｐ＋率分别为３９５％及３４２％。Ｍ３的Ｒ１２３Ｅ＋率（０／６）明显低于其他亚型（４３８％）（Ｐ＜００５）。Ｐｇｐ表达与活性存在明显相关性（Ｐ＜０００１），７８９％的患者表达与活性一致（１０例Ｐｇｐ＋Ｅ＋，２０例Ｐｇｐ－Ｅ－）；２１１％存在表达与活性分离（３例Ｐｇｐ＋Ｅ－，５例Ｐｇｐ－Ｅ＋），Ｐｇｐ－Ｅ＋提示非Ｐｇｐ介导的排出活性在ＡＮＬＬ耐药中可能具有重要作用。Ｒ１２３Ｅ＋完全缓解（ＣＲ）率（２／１１，１８２％）及Ｐｇｐ＋者的ＣＲ率（２／１０，２０％），明显低于Ｒ１２３Ｅ－的９２９％（１３／１４）及Ｐｇｐ－的８６７％（１３／１５）（Ｐ分别＜００１及＜０００１）。结论Ｐｇｐ表达及活性检测在成人ＡＮＬＬ中均具有重要的预后意义     

双耐药基因导入脐血干／祖细胞降低联合化疗骨髓毒性作用的临床前研究

目的　探讨转染醛脱氢酶基因 (ALDH3)和多药耐药基因 (mdr 1)的人脐血CD3 4 细胞能否同时增强对活性环磷酰胺 (4 HC)和mdr 1基因靶药的抗性。方法　构建含ALDH3和mdr 1双耐药基因的逆转录病毒表达质粒G1Na ALDH3 IRES MDR1,经LipofectAMINE介导转染包装细胞 ,采用含 4 HC和长春新碱 (VCR)的培养基克隆选择后收集重组病毒上清于单向型GP E86与双嗜型PA317包装细胞行乒乓交互感染 ,将含ALDH3和mdr 1双耐药基因重组病毒的上清在细胞生长因子刺激下重复感染经免疫磁珠分离系统 (MACS)纯化后的人脐血CD3 4 细胞 ,用PCR、RT PCR、Southernblot、Northernblot、FACS和MTT等方法检测外源ALDH3与mdr 1基因在CD3 4 细胞中的转移和表达。结果　MACS分离纯化后的人脐血CD3 4 细胞纯度平均达 91% ,回收率为 72 % ,含双耐药基因重组病毒的上清最高滴度为 6 .5× 10 5CFU/ml,应用集落计数、PCR和FACS方法测定基因转导效率分别为 18.0 %、2 0 .0 %和16 7% ,未检测到辅助病毒存在 ,有P170功能的细胞占 16 0 % ,经双耐药基因修饰的脐血CD3 4 细胞对 4 HC的IC50 较对照组提高 3.5倍 ,对VCR和柔红霉素的IC50 较未转染细胞分别高 6 .8和 5 .5倍。结论　逆转录病毒载体介导双耐药基因转导脐血造血干 /祖细胞获高效共表