不同胚龄人神经干细胞的分离和培养

目的 探索不同胚龄人神经干细胞分离和培养的适宜条件。方法 在多种培养条件下，采用无血清培养和单细胞克隆技术，从7周和13周人胚脑中分离和培养神经干细胞，应用免疫荧光染色予以鉴定。结果 从两个不同胚龄的人胚脑中分离出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞，未包被组7周的人胚脑除高密度县浮培养法生长不良，其它密度及培养法均有克隆球形成；13周的人胚脑仅中等密度悬浮培养法及高密度贴壁培养法有克隆球形成；包被组各种密度培养均生长不良。结论 人胚脑中存在具有自我更新能力和多分化潜能的神经干细胞，随着胚龄增大，培养难度逐渐加大，高密度贴壁培养法适宜各胚龄神经干细胞的分离培养。     

无水温泉

泡温泉不仅在中国历史悠久，在其他国家也很盛行。据统计日本人是平均寿命最长的国家：而冰岛的女性寿命也超过80岁。这些长寿人群背后隐藏着什么？科学家们研究的结论是，这两个国家同样拥有丰富的温泉资源，其居民也同样有喜欢泡温泉的习惯。     

四川省阿坝州藏羌汉族儿童少年骨骼生长发育状况

目的了解四川省阿坝藏羌自治州藏、汉、羌族儿童少年骨骼生长发育状况,为少数民族贫困地区儿童青少年生长发育的研究提供依据。方法采用分层随机整群抽样的方法,测量四川省阿坝州7~18岁藏、汉、羌族1 822名男女儿童少年的身高、坐高、前臂长和膝高4项指标,并对其骨骼生长发育状况进行比较分析。结果藏族男女儿童少年各项指标均大于当地羌、汉族,其中7~9岁和17~18岁2个年龄段尤为明显;与全国学生平均身高相比,藏族低于全国城市水平,高于乡村水平,羌、汉族与全国乡村水平相当;除藏男9岁组和藏女7岁组外,3个民族儿童少年身高均低于四川省同年龄组平均水平。结论四川省阿坝州藏、羌、汉族男女儿童少年骨骼生长发育较差,建议加强体育锻炼,改善生活环境和营养状况。     

小腿皮肤撕裂伤64例治疗体会

小腿皮肤撕裂伤是创伤外科的常见病，我院于1994/1999期间，对64列小腿皮肤撕裂伤采用手术治疗，效果良好。现就处理方法、术中注意事项及个别病例失败原因分析如下。     

Calpain抑制剂Ⅰ对大鼠脑非断离性轴索损伤继发断离的影响

目的　研究Calpain抑制剂Ⅰ对非断离性轴索损伤 (NDAI)继发断离的影响 ,探讨NDAI的治疗途径。　方法　将 16只雄性SD大鼠随机分为Calpain抑制剂Ⅰ组和对照组各 8只 ,液压冲击致大鼠脑弥漫性损伤 ,比较两组伤后 2 4 ,72h胼胝体区、间脑中脑区、桥脑延脑区和小脑区肿胀轴索及轴索球最大密度变化。　结果　大鼠致伤后 ,NF6 8免疫组化显示肿胀的轴索及轴索球。伤后 2 4h ,Calpain抑制剂Ⅰ组桥脑延脑区、小脑区肿胀轴索及轴索球最大密度明显减少 (P <0 .0 1) ;伤后 72h ,Calpain抑制剂Ⅰ组小脑肿胀轴索及轴索球减少 (P <0 .0 5 ) ,而胼胝体区、间脑中脑区、桥脑延脑区变化不明显 (P >0 .0 5 )。　结论　Calpain抑制剂Ⅰ可减轻NDAI的继发断离 ,主要是减少损伤较轻的NDAI的继发断离。     

少数民族贫困地区农村医疗卫生事业亟待加强——新疆喀什地区12个县(市)医疗卫生状况调查与思考

随着农村家庭联产承包责任制在全国的普遍实施,边远少数民族地区也不例外,少数民族地区人口增长过快,再加上农村医疗卫生事业改革与农村经济改革的不配套及不完善性,使得农村医疗卫生事业,特别是少数民族贫困地区农村医疗卫生事业出现了严重的滑坡。少数民族贫困地区农村看病就医难作为一个社会性问题,又逐渐暴露出来了。为此,我们协助当地医疗卫生机构对新疆喀什地区少数民族聚居贫困地区的12个县(市)农村医疗卫生事业的现状进行了调查,并对存在的问题和发展作了初步探讨和分析。 一、少数民族贫困地区农村医疗卫生事业的现状及其问题     

B超引导下神经内镜手术治疗中重度原发性脑室内出血

目的 探讨术中B超引导下神经内镜手术治疗中重度原发性脑室内出血的方法和疗效.方法 应用术中B超引导下神经内镜手术治疗33例诊断为中重度原发性脑室内出血患者.结果 术后24 h内复查CT示脑室内血肿的清除率平均为85%.术后死亡2例.术后半年对患者进行ADL分级:达到Ⅰ级10例,Ⅱ级8例,Ⅲ级5例,Ⅳ5例,Ⅴ级3例.结论 应用术中B超引导下神经内镜手术治疗中重度原发性脑室内出血,具有定位准确、微创、直视下操作、手术时间短、血肿清除率高和术后疗效好等优点.     

MRI活体示踪大鼠脑内超顺磁性氧化铁标记成人神经干细胞

背景：目前判断神经干细胞移植后向脑损伤部位的迁移需要处死受体动物行脑切片检查,且不能进行多点、动态的观察。 目的：探讨用MRI活体示踪移植磁化标记成人神经干细胞在创伤性脑损伤模型大鼠脑内迁移和分布的可行性。 方法：建立大鼠脑部左侧半球创伤性脑损伤模型,超顺磁性氧化铁体外标记成人神经干细胞。模型建立后2周将标记成人神经干细胞立体定向移植入大鼠脑部右侧半球。在移植后1 d、3 d、1周和2周分别行大鼠头部MRI。2周后处死大鼠取脑,用普鲁士蓝染色法进行染色,观察标记神经干细胞的迁移。 结果与结论：超顺磁性氧化铁体外标记成人神经干细胞的成功率约为85%。移植后行头颅MRI可见位于右侧半球的移植部位FSE T2WI和GRE T2序列呈环形低信号。随时间推移,创伤性脑损伤后移植标记干细胞组大鼠头颅MRI可见脑内有一低信号线,指向对侧脑挫伤部位,而创伤性脑损伤后移植未标记干细胞组,正常大鼠移植标记干细胞组无信号线。MRI显像结果与脑切片普鲁士蓝染色观察到的结果是相符合的。 结果提示用MRI活体示踪移植磁化标记成人神经干细胞在创伤性脑损伤模型大鼠脑内迁移和分布可行、有效。     

同期放化疗联合深部热疗治疗胸段食管癌的临床观察

目的:探讨同期放化疗联合深部热疗治疗胸段食管癌的近期疗效、远期疗效和不良反应。方法:90例胸段食管癌患者随机分为放化疗联合热疗组（联合组）、同期放化疗组（放化疗组）和单纯放疗组（放疗组）,各30例,分别给予不同的治疗方法,观察和比较三组的近期疗效、远期疗效和不良反应。结果:联合组的临床有效率和临床获益率优于放化疗组和放疗组,差异有统计学意义（P<0.05）。联合组和放化疗组的总体生存率优于放疗组,而远处转移率低于放疗组（P<0.05）。联合组与同期放化疗组的骨髓抑制、放射性食管炎、恶性呕吐和肝肾功能损害的发生率均高于放疗组（P<0.05）;但联合组与同期放化疗组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论:同期放化疗联合深部热疗治疗胸段食管癌的近期疗效优于同步放化疗和单纯放疗,但在提高患者的生存率和降低放化疗的不良反应等方面无明显优势,具有一定的临床使用价值。     

miR-494慢病毒表达载体的构建

目的:构建miR-494基因的慢病毒表达载体。方法:以人基因组DNA为模板,PCR扩增hsa-miR-494基因,用XhoⅠ、BamHⅠ双酶切携带EGFP的慢病毒载体pGIPZ,酶切产物电泳后回收约11kb的载体片段。使用DNA连接试剂盒中的Solution I将其与miR-494连接,连接产物转化,次日挑选单菌落,PCR筛选正向阳性克隆,随后将选定的含有阳性克隆的单菌落摇菌,提取质粒并行酶切鉴定及对插入的miR-494测序,所构建载体命名为pGIPZ-miR-494-eGFP,获pGIPZ-miR-494-eGFP后按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒包装和确认慢病毒是否成功生产。将慢病毒颗粒以最适滴度感染人体肺腺癌细胞株A549,通过Aldefluor流式分选出带有目的基因和空载病毒的细胞,用Real-Time PCR检测感染效率。结果:目的基因与慢病毒载体连接成功。共转染293T细胞包装病毒与浓缩后滴度达1.02×108TU/ml,并转染到肺腺癌细胞株A549上,Aldefluor流式分选出的细胞后通过Real-Time PCR检测结果显示miR-494慢病毒表达载体感染的A549细胞miR-494表达高于对照组达10倍以上。结论:成功构建携带人miR-494基因的慢病毒表达载体pGIPZ-miR-494-eGFP,为相关后续研究打下了良好基础。