微量固相(聚苯乙烯珠)放射免疫法检测乙型肝炎核心抗体初步研究(摘要)

1971年以来报告了乙型肝炎核心抗原(简称HBcAg),抗体(简称抗-HBc)系统的发现及临床应用情况后,有关此系统的研究发展很快。抗-HBc的检测在肝炎临床、流行病学调查及疫苗安全性检查方面具有广泛的应用价值。但由于来源困难影响了充分展开工作。     

微量固相(聚苯乙烯小珠)放射免疫法检测HBcAb的初步研究

自发现乙型肝炎核心抗原(HBcAg)、抗体(抗-HBc)系统以来,有关此系统的研究进展很快。国内已有应用微量补结法、免疫粘连血凝法(IAHA)及间接血凝法(PHA)检测抗-HBc的报道。国内外还先后报道了用取自     

利用多组套式引物检测庚型肝炎病毒RNA

利用庚型肝炎病毒（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ）ＮＳ３～５区序列合成了四组套式引物，建立了灵敏、特异的庚型肝炎病毒ＲＮＡ双扩增聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测方法。用此方法检测了１０份庚型肝炎病毒抗体阳性患者血清及１０份阴性的健康人血清。前者不同组引物的检出率为ＮＳ３（１）引物９份阳性，ＮＳ３（２）引物８份阳性，ＮＳ４引物４份阳性，ＮＳ５（１）引物５份阳性，ＮＳ５（２）引物９份阳性；后者各组引物检测均为阴性。结果表明，庚型肝炎病毒不同区域引物用于ＲＴ－ＰＣＲ检出率差异较大。ＮＳ３（１）及ＮＳ５（２）这两组引物检出率最高，更适合用于ＲＴ－ＰＣＲ检测庚型肝炎病毒ＲＮＡ。     

用抗-(抗HBc)抗体在同系小鼠中诱导抗-抗Id抗体

用单克隆抗-(抗HBc)抗体(抗-Id)免疫BALB/c鼠,诱生出具有与抗-HBc相同反应性的抗-抗Id抗体(Ab_3)。这种抗体在ELISA试验中可与HBc-Ag特异性反应,并能抑制单克隆抗-HBc与HBcAg的结合。表明我们建立的抗-H-Bc的抗Id能模拟HBcAg刺激小鼠产生免疫反应。     

乙型、丙型和非甲～戊型肝炎患者血清TTV抗体的研究

TTV是近年发现的一种新的DNA病毒,它在肝脏疾病中的致病作用尚未确定。国内外资料均表明,TTV在全世界有广泛的分布,而且在各种人群中有较高的感染率。为了解TTV在本地区各类肝炎患者及正常人群中的感染率,本室用ELISA方法对264份血清样品进行了TTV抗体的检测。其中乙型肝炎109份,丙型肝炎67份,正常人115份,非甲-戊型肝炎47份,阳性率分别为6.4％,6.0％,5.2％和19.1％。统计学分析结果表明,前三组TTV感染率相互之间没有显著性差异(P>0.05),而非甲-戊型肝炎组TTV感染率与前三组差异均非常显著(P<0.01),说明在既往病因不明的肝炎中,可能有一部分患者是由于TTV感染所致。但因所测定的病例数有限,TTV在肝脏疾病中的致病作用仍有待于进一步研究。     

IRM-2近交系小鼠的遗传监测

目的 观察IRM-2小鼠基因纯合性和遗传质量。方法用电泳法对IRM-2近交系小鼠进行了生化标记基因检测,并做了毛色基因和皮肤移植试验。结果分析测定了第23代小鼠13条染色体上25个基因位点和第38代的13个生化标记基因,所查基因位点全部纯合;同系异体问背部皮肤移植100d后,未见排斥现象,为同系组织遗传性;与BALB／c白化系小鼠交配进行的毛色基因测试,杂交第一代小鼠的毛色与IRM-2小鼠一致,均为浅桂皮色,基因型为AAbbCCDD。结论可以认为,IRM-2小鼠是遗传上高度纯合的近交系小鼠。     

来源于HBcAg的HBeAg单克隆抗体特性及其在检测HBeAg中的应用

用变性的HBcAg免疫小鼠制备出一组分泌抗血清肝炎eAg的单克隆抗体的鼠杂交瘤。这组杂交瘤广义地可分为两大组。在每一组内,被称为e—α或e—β的单克隆抗体识别单一抗原位点,这些抗体常有高度的交叉抑制。对比之下,两组之间则很少或没有交叉抑制。血清HBeAg和变性的HBcAg极为相似,尽管天然血清HBeAg分子量为300,000,但两者都表现为仅携带单—e—α或e—β抗原位点的分子。这就意味着e—α或e—β位点可能包含在HBeAg聚合的HBcAg聚合物之中。在聚合过程中,可能会产生两种抗原位点所共有的掩蔽物。     

重组抗原检测戊型肝炎病毒IgM抗体及其意义

用戊型肝炎病毒(HEV)重组抗原建立酶联免疫吸附试验(ELISA)，检测肝炎患者和健康供血人群血清中抗戊型肝炎病毒IgM类抗体(抗-HEV IgM)，并评价其检测意义。在与合成肽抗原比较检测的77份急性戊型肝炎患者血清中，有54份(70.1%)由重组抗原捡测抗-HEV IgM阳性。其阳性率明显高于台成酞抗原(21/77,27．3％)。15例戊型肝炎患者双份血清用重组抗原ELISA检铡，急性期血清有11份抗-HEV IgM阳性，恢复期血清仅1份阳性。抗-HEV IgG阳性的健康供血者(8人)和甲、乙、丙型肝炎患者(11例)无1例IgM抗体阳性。结果表明，抗-HEV IgM可以作为戊型肝炎病毒新近感染的标志。HEV重组抗原检铡抗-HEV IgM敏感性高，特异性强，有助于戊型肝炎病毒感染的早期诊断。     

人IL-10基因的克隆表达及表达产物活性的初步鉴定

目的:构建含人IL-10全基因序列的原核表达载体,并进行表达及产物活性的鉴定。方法:利用RT-PCR方法,从人肝癌细胞系HepG2的总RNA中扩增IL-10的全长编码序列。编码序列经测序验证后,将其克隆入表达载体PET-28 a( ),构建IL-10基因的重组原核表达载体。在大肠杆菌中诱导表达目的蛋白,表达产物采用Western blot和ELISA进行鉴定。结果:表达产物主要位于包涵体内。经Western blot分析和ELISA检测显示,表达产物的相对分子质量(Mr)同预期的结果相符,有结合抗体活性。结论:成功地扩增人IL-10全基因序列,并构建了含该基因序列的原核表达载体,在大肠杆菌中高效表达的表达产物具有抗原活性,为下一步制备抗IL-10的单克隆抗体(mAb)提供了必要的前提。     

抗人IgG单克隆抗体在IgG抗-HBc检测中的初步应用

本文对分泌高滴度抗人IgG的杂交瘤进行克隆化培养,获得了单克隆抗人IgG抗体。其中一株(HE_(15)D_3)经免疫扩散等试验证实为抗人IgGγ链特异性抗体。但抗人IgG的亚类特异性尚待鉴定。 用此株单克隆抗体包被聚苯乙烯板(ELIA抗体捕获法)检测了236例肝炎患者及40例健