云南地区多结节肺腺癌EGFR突变及其临床意义

目的 探讨使用下一代测序(Next-generation sequencing,NGS)技术检测云南地区多结节肺腺癌患者肿瘤组织中EGFR基因突变与临床病理特征的关系。方法 收集2018年1月至2020年5月云南省分子诊断中心共检测的79例多结节肺腺癌患者送检的111枚肺结节肿瘤组织样本,以NGS法检测EGFR突变情况分析其与临床病理特征的关系,Logistic回归分析其独立危险因素。结果 111枚肺结节组织样本中EGFR总突变率58.55%(65/111),其中L858R点突变和19号外显子缺失最常见,占总突变的53.8%(35/65)。稀有突变率27.02%(30/111),单点突变率37.84%(42/111),复合突变率20.72%(23/111)。χ²检验显示女性、年龄≥56岁、无吸烟史、云南区域性高发肺癌地区患者EGFR基因突变率较高,差异具有统计学意义(P=0.024、P=0.008、P <0.001、P=0.024)。Logistic回归分析显示：年龄≥56岁、无吸烟史、云南区域性高发肺癌地区是EGFR基因突变的独立危险因素(P <0....     

纳米二氧化硅对BEAS-2B细胞的毒性研究

目的 评价纳米二氧化硅颗粒物对人正常支气管上皮细胞(BEAS-2B)的毒性作用及可能机制。方法(1)扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope,SEM)观察经100μg/ml的20 nm二氧化硅和结晶型二氧化硅(MinU-Sil 5)暴露24~72 h后的BEAS-2B细胞形态变化;(2)应用3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT)比色法检测实验组(纳米二氧化硅处理组)、阳性对照组(Min-U-Sil 5处理组)的细胞活力变化,分别测定不同实验条件下的还原型谷胱甘肽(GSH)、细胞内活性氧(ROS)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;(3)流式细胞仪分析经暴露不同浓度20 nm二氧化硅后的细胞周期变化。结果 (1)经20 nm二氧化硅刺激24 h后BEAS-2B细胞体积增大,胞浆疏松,细胞数量减少,并随刺激时间延长而加重,阳性对照组上述变化不明显;(2)BEAS-2B细胞活力随暴露浓度和暴露时间的增加而下降,暴露浓度>50μg/ml时20 nm二氧化硅组的细胞活力下降与阳性对照组间比较,差异有统计学意义(P<0.05),暴露浓度为100和200μg/ml时20 nm组与50 nm组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。100μg/ml浓度暴露24 h后,20 nm二氧化硅组细胞活力下降情况与阳性对照组间比较,差异有统计学意义(P<0.05),暴露72 h后各组间细胞活力下降差异均有统计学意义(P<0.05)。BEAS-2B细胞培养基中的细胞内活性氧(ROS)升高、还原型谷胱甘肽(GSH)下降和乳酸脱氢酶(LDH)升高,并随暴露时间延长和二氧化硅粒径减小而变化;(3)纳米二氧化硅可使G2/M期停滞和G1期细胞增多,并呈现浓度效应。结论 纳米二氧化硅造成BEAS-2B细胞的细胞毒性作用强于结晶型二氧化硅(Min-U-Sil 5),纳米二氧化硅对BEAS-2B细胞的细胞毒性作用,具有浓度-效应、时间-效应和粒径-效应现象,细胞毒性作用并最终引起细胞氧化损伤。     

慢病毒介导ITGB4 shRNA对H460SM细胞增殖的抑制作用

目的 体外实验研究β4整合素shRNA对非小细胞肺癌H460SM细胞增殖的抑制作用,为非小细胞肺癌早期诊断和治疗提供新的靶点.方法 实时定量RT-PCR验证β4整合素表达水平的变化,显微镜下观察细胞形态的变化.通过细胞计数和MTS实验分析抑制β4整合素表达对H460SM细胞增殖的影响;流式细胞术分析抑制β4整合素表达对H460SM细胞凋亡和细胞周期的影响.结果 与阴性对照组(H460SM-NS)比较,稳定表达β4整合素shRNA的实验组(H460SM-68、H460SM-71)细胞β4整合素表达水平明显降低(P＜0.01);与阴性对照组比较,实验组细胞的增殖受到明显抑制(P＜0.05);实验组细胞凋亡率明显高于阴性对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);实验组细胞增殖指数PI明显低于阴性对照组(P＜0.05),G0/G1期细胞数明显高于阴性对照组(P＜0.05),提示抑制β4整合素的表达,细胞周期可能被阻滞在G1/S检测点,导致细胞增殖受到抑制.结论 抑制β4整合素的表达,可以抑制非小细胞肺癌H460SM细胞增殖,并可能诱导H460SM细胞凋亡.癌细胞增殖受到抑制可能与细胞周期调控有关.抑制β4整合素的表达,可能不影响非小细胞肺癌细胞凋亡.     

生物技术 DE 15个主要研究领域

早期的生物技术集中于重组DNA药物和治疗性抗体的研制上,下面的内容概述了当今产业界是如何着眼于生物界的复杂性与内在联系。 1.人类基因组计划 人类基因组的全部测序与分析将会揭示遗传医学上有治疗价值的基因。该项工作正在顺利进行。三分之一的表达基因已经测序,且许多疾病的基因业已定位。一旦了解所有DNA编码区,下一个目标是要了解含有DNA调控开关的“沉默”基因。这些功能强大的调节基因不编码蛋白质但对基因的表达有调控作用。     

通络生骨方治疗激素性股骨头坏死的回顾性临床研究

目的:观察通络生骨方治疗激素性股骨头坏死筋脉凝滞证的临床疗效。方法:回顾性分析2010年2月至2013年6月收治住院的随访24个月以上的ARCO分期Ⅱ-Ⅲ期的108例激素性股骨头坏死患者,将行通络生骨方治疗者设为治疗组(54例),行健骨生方治疗者设为对照组(54例),依据Harris评分法,对治疗后患者的疼痛程度、关节功能、关节畸形、关节活动度依次评分,并计算其总分;观察X线片并记录其股骨头坏死的修复等级及治疗期间药物不良反应发生情况。结果:治疗组Harris评分的优良率与对照组接近,差异无统计学意义(P0.05);治疗组在改善关节活动度、关节畸形,缓解疼痛及Harris总评分方面优于对照组(P0.05);影像学资料表明,治疗组死骨总吸收率、死骨明显吸收率、新骨总形成率、新骨明显形成率均高于对照组(81.48%、64.81%;51.85%、35.19%;83.33%、61.11%;51.85%、31.48%,P0.05);2组患者在治疗期间药物不良事件发生率较低,且能自行缓解。结论:通络生骨方治疗ARCOⅡ-Ⅲ期激素性股骨头坏死安全有效,可考虑在早中期激素性股骨头坏死患者中推广。     

不同膀胱冲洗方法的选择及注意点

在临床护理工作中，膀胱冲洗是一项常见而重要的技术操作，通过冲洗可以做到：清洁膀胱，使尿液引流通畅；治疗某些膀胱疾病，如膀胱炎、膀胱肿瘤等泌尿外科的术前准备和术后护理。针对不同冲洗目的，可选择不同的冲洗方法，现根据我院情况介绍两种常见的冲洗方法。     

3D细胞培养在药物研发中的研究进展

3D培养模型的引入是细胞培养技术的一个里程碑,随着新型支架、基质的发明与应用及细胞成像和分析系统的日新月异,三维细胞培养可模拟体内微环境而获得传统2D细胞培养所没有的优势,已在基础研究、干细胞及组织工程等领域崭露头角。本文通过回顾3D细胞培养在药敏实验、药物筛选、药物研发、临床应用中的贡献,从药物效应、药物代谢及药物敏感性着手,枚举3D细胞培养通过改变基因/蛋白质差异表达来进行药物研发,并对其应用趋势、潜在优势和不足作一综述,为基础研究和临床应用提供理论依据。     

云南地区卵巢癌患者的基因同源重组缺陷状态和BRCA1/2基因突变频率及其临床意义

目的：采用基于中国人群单核苷酸多态性位点开发的同源重组缺陷（HRD）检测工具评估云南地区卵巢癌患者的HRD状态和BRCA1/2基因突变频率并探讨其临床意义。方法：共纳入2021 年1月至2023 年5月间在云南省肿瘤医院收治的卵巢癌患者248 例，HRD状态采用基因组瘢痕评分法（GSS）（主要依据拷贝数的长度、类型、位置及基因组断片）或HRD评分法（杂合性缺失、端粒等位基因失衡及大片段移位等基因组不稳定事件的总和）进行评估，当组织样本的GSS≥50 分或HRD评分≥42 分者或检测到有害的BRCA1/2基因突变时HRD被定义为阳性。分析患者HRD状态与临床病理特征的关系。结果：248 名卵巢癌患者中70.97%的患者HRD呈阳性，其中BRCA1/2基因突变率为30.65%。Ⅲ~Ⅵ期、高级别浆液腺癌的卵巢癌患者具有更高的HRD阳性率（均P<0.01），HRD评分更高的患者其合并其他基因突变的频率也越高（P<0.05）。HRD状态与卵巢癌的病理类型、临床分期和其他基因突变均有关联（均P<0.01）。结论：云南地区卵巢癌患者HRD阳性率较高，HRD阳性的卵巢癌患者可以从聚ADP核糖聚合酶（PARP）抑制剂治疗中获得更大的收益。     

长轴穿刺治疗高血压性梭形脑内血肿46例

2001年8月～2005年10月，我们采用沿血肿长轴锥颅穿刺抽液加尿激酶注射，治疗高血压性脑出血梭形血肿46例，疗效满意。