DC疫苗联合CIK细胞治疗非小细胞肺癌疗效观察

目的探讨自体肿瘤抗原负载的树突状细胞（DC）联合细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）在非小细胞肺癌治疗中的临床疗效.方法采集70例非小细胞肺癌患者外周血单个核细胞,加入细胞因子定向诱导成CIK及DC,培养的第5天用自体肿瘤抗原（Ag）负载DC,第8天将DC与CIK细胞共培养,14d后将联合培养的细胞（Ag-DC-CIK）分次回输给患者.治疗4周后,流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群及细胞因子水平,以评价细胞免疫功能,结合临床指标综合评价疗效,同时观察不良反应;以35例单纯的CIK细胞治疗作为对照.结果（1）培养的第14天,Ag-DC-CIK细胞的增殖达（20.6±2.16）倍,对照组仅为（12.2±2.65）倍（P〈0.05）;CD3＋CD8＋细胞及CD3＋CD56＋细胞的表达也明显高于对照组（P〈0.05）;（2）70例接受治疗的患者中CD3、CD4、CD8T细胞的百分比均较治疗前有不同程度的提高,Ag-DC-CIK组57.14%（20例）的患者CD4/CD8比例调节至正常,与对照组（42.85%,15例）相比差异有统计学意义（P〈0.05）;（3）Ag-DC-CIK治疗后51.42%（18例）的患者Thl/Th2细胞因子比例恢复正常,而对照组恢复正常者仅占37.14%（13例）（P〈0.05）;（4）Ag-DC-CIK治疗组中Ⅱ、Ⅲ期患者的有效率分别为39.30%和28.60%,与对照组的相应期别（Ⅱ期26.90%,Ⅲ期22.20%）相比差异有统计学意义（P〈0.05）;（5）治疗后的副反应包括寒颤、发热及兴奋失眠,无1例出现毛细血管渗漏综合征及实质脏器的损害.结论肿瘤抗原负载的DC细胞可增强CIK细胞在非小细胞肺癌治疗中的临床疗效,有推广运用的价值.     

shRNA抑制非小细胞肺癌H460SM细胞锚定非依赖生长和侵袭

目的:探讨慢病毒介导α6整合素(integrinα6,ITGA6)shRNA对人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)H460SM细胞生长和侵袭的影响。方法:实时定量PCR和Western blotting检测ITGA6在9种NSCLC细胞中的表达。慢病毒介导ITGA6 shRNA感染H460SM细胞后,实时定量PCR和Wesern blotting检测H460SM中ITGA6的表达,显微镜下观察H460SM细胞形态的变化,MTS法检测细胞增殖,软琼脂实验检测H460SM细胞锚定非依赖性生长,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,迁移和侵袭实验检测H460SM细胞体外迁移和侵袭能力。结果:ITGA6在7种人NSCLC细胞中均有表达,H460SM细胞中ITGA6表达水平明显高于亲本H460细胞[(8.75±0.09)vs(5.78±0.26),P<0.01]。慢病毒介导ITGA6shRNA稳定感染H460SM细胞后的H460SM-75、H460SM-76细胞中,ITGA6表达水平明显低于阴性对照组H460SM-NS细胞[(0.11±0.04)、(0.22±0.04)vs(1.00±0.01),P<0.01]。H460SM-75、H460SM-76细胞增殖活性与H460SM-NS细胞无差异(P>0.05),且凋亡率、细胞增殖指数、G0/G1期细胞的比例也无差异(P>0.05)。H460SM-75、H460SM-76细胞的克隆形成率明显低于H460SM-NS细胞[(18.87±1.47)%、(18.85±1.11)%vs(20.81±1.38)%,P<0.05],迁移率[(43.92±0.41)%、(24.10±0.33)%vs(100.00±0.50)%,P<0.01]和侵袭率[(7.04±2.96)%、(4.68±0.27)%vs(100.00±6.74)%,P<0.01]也明显低于H460SM-NS细胞。结论:抑制ITGA6的表达可以抑制NSCLC细胞锚定非依赖性生长、迁移和侵袭,但不影响NSCLC细胞增殖和凋亡。     

食管异物误诊分析一例

食管异物指任何原因导致食物性或非食物性异物滞留于食管内。常发生于于幼童及老人缺牙者。绝大多数发生在食管入口处或食管狭窄处，当尖锐异物嵌顿于食管中段损伤肌层时，可有类似心绞痛、心梗症状。现有一中年食管异物患者一度被误诊为心梗，报告如下。     

难治性癫痫与FDG-PET显像

难治性癫痫是指采用目前的抗癫痫药物进行正规的治疗，在有效治疗期内，通过多种努力仍不能控制其发作的癫痫。一般认为其病程应在3～4年以上，每月发作至少4次，经过长期系统抗癫痫药物的治疗不能控制其发作，并且因为频繁发作而影响病人的工作、学习和生活。本文就难治性癫痫的发病     

颅脑损伤后局部组织一氧化氮合酶表达的实验研究

目的研究一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)基因在实验性大鼠颅脑创伤后局部组织中表达.方法应用免疫组化技术和高清晰度彩色病理图像分析系统,对大鼠脑组织神经细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达进行了检测.结果颅脑创伤后大鼠局部及周围神经细胞中有NOS阳性产物表达并具时程特点,伤后2h平均积分光密度(ODI)较0.5h升高不显著(P0.05),伤后6h、12h、24hODI较0.5h升高非常显著(P<0.01).结论在急性脑损伤后的病理过程中,脑组织中诱导型一氧化氮合酶被大量合成,可能是造成机体一氧化氮(Nitricoxide,NO)升高的直接原因.     

RNA干扰对XWLC-05肺癌细胞水通道蛋白3表达的影响

目的构建靶向水通道蛋白3（AQP3）的siRNA表达载体,探讨其对XWLC-05肺癌细胞系AQP3表达的影响。方法构建AQP3特异性siRNA表达载体和对照组表达载体,以脂质体法转染XWLC-05肺癌细胞,用RT—PCR检测AQP3mRNA的表达,用Westernblot方法检测APQ3蛋白的表达。结果成功构建靶向AQP3的siRNA表达载体1和2,分别命名为pAQP3-siRNAl、pAQP3-siRNA2。转染48h后pAQP3-siRNA1和pAQP3．siRNA2转染组AQP3 mRNA的表达量分别是对照组的65％和79％,组间比较有统计学差异（P〈0．05）;pAQP3-siRNAI和pAQP3-siRNA2转染后的蛋白表达量分别是对照组的53％和。73％,pAQP3-siRNA1干扰效果明显高于pAQP3-siR—NA2（P〈0．05）。结论AQP3特异性siRNA能够有效地抑制XWLC-05肺癌细胞系AQP3的表达。     

凝血酶诱导非小细胞肺癌血管内皮生长因子分泌的实验

 目的 探讨凝血酶对非小细胞肺癌细胞株A549分泌血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）的促进作用及其机制。方法 采用ELISA法检测凝血酶对AS49细胞分泌VEGF的浓度以及水蛭素对其阻断作用。采用RT-PCR法检测凝血酶受体PAR-1在A549细胞中的表达。结果 凝血酶在0．5～3U／ml的浓度范围内可以明显地增加VEGF的分泌，而〈0．5U／ml时这种促进作用则不明显，水蛭素能够完全阻断凝血酶的这种促进作用。PAR-1在A549细胞中表达，而在正常的胎肺细胞（KM13-17）中并不表达。结论 在一定浓度范围内，凝血酶能有效地促进A549细胞VEGF的分泌，而这种促进作用可能与PAR-1受体的表达有关。     

女性肺癌患者中SOX4的表达及临床意义

全球女性肺癌死亡率从1930年到1997年上升了600%,1987年首次超过乳腺癌,成为美国女性恶性肿瘤的首位死因[1]。近20年我国女性肺癌发病率也持续增长,严重危害女性健康。因此迫切需要探讨女性肺癌发生、发展及转移的分子机制,采取有效的干预措施。SOX4基因(SRY-     

Notch1和Notch2表达与宣威女性肺癌的关系及意义

目的 研究Notch1和Notch2在宣威女性肺癌中表达的临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测54例宣威女性肺癌患者癌组织及远端正常肺组织中Notch1和Notch2表达,结合患者的临床病理特征及随访资料,探讨Notch1和Notch2在宣威女性肺癌患者病情评估及预后判断中的作用.结果 Notch1和Notch2蛋白主要表达于细胞质,在宣威女性肺癌中的阳性表达均显著高于远端正常肺组织(P＜0.05);Notch1和Notch2蛋白在不同临床分期、分化程度及淋巴结转移与否患者中的表达差异有统计学意义(P＜0.05).Notch1、Notch2蛋白在宣威女性肺癌中的表达呈正相关(P＜0.05).结论 宣威女性肺癌组织中存在Notch1和Notch2基因异常表达升高,Notch1和Notch2蛋白的表达水平结合临床分期作为宣威女性肺癌患者预后判断的参考指标有一定的指导意义.