慢性牙周炎唾液牙龈卟啉单胞菌的定量PCR检测

目的:定量检测慢性牙周炎患者、牙周健康人群唾液中牙龈卟啉单胞菌的含量,比较其在各组人群分布的差异。方法:应用SYBR Green模式的实时荧光定量PCR技术,针对Pg特异基因Arg-gingipain设计引物,检测20例慢性牙周炎和20例牙周健康者唾液内Pg的含量,t检验分析比较在各组人群中Pg定植的差异。结果:慢性牙周炎患者唾液中,Pg的检出数目为(1.78×10³~1.99×10⁵),检出率为85%;牙周健康者唾液中,Pg的检出数目为(2.19×10³~2.30×10³),检出率为10%。Pg在慢性牙周炎和牙周健康者唾液中检出数目和检出率的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:慢性牙周炎唾液中,牙龈卟啉单胞菌较正常人群明显升高,在今后的研究及防治中,不仅要观察龈沟液中的牙龈卟啉单胞菌,也应注意其在唾液中含量的变化。     

口腔枯草芽孢杆菌代谢产物的抑菌活性研究

目的:从口腔中分离枯草芽孢杆菌并验证其代谢产物对主要致龋菌的抑制作用。方法:搔刮法提取牙菌斑,平板稀释法筛选出细菌后,进行形态学观察及16S rDNA基因序列的比对。琼脂平板打孔法检测其代谢产物对变形链球菌、粘性放线菌及嗜酸乳杆菌的抑菌活性。结果:从牙菌斑中分离出3株细菌,通过形态学及16S rDNA基因序列检测确定为枯草芽孢杆菌;其代谢产物对变形链球菌、粘性放线菌、嗜酸乳杆菌均具有抑制作用,其中对粘性放线菌抑制作用最强。结论:牙菌斑中可以分离出枯草芽孢杆菌,并且其代谢产物对主要致龋菌具有抑制作用,枯草芽孢杆菌有望作为益生菌在龋病防治中发挥重要作用。     

16S rRNA高通量测序研究有龋者唾液微生物群落结构及多样性

目的:通过16S rRNA高通量测序研究有龋和无龋者唾液的微生物群落结构及其差异。方法:在甘肃省康乐县景古镇居民口腔检查中随机选取14位汉族居民,其中,7例有龋(caries-active, CA组,DMFT≥4)、7例无龋(caries-free,CF组)。采取唾液样本,提DNA,PCR扩增,利用Illumina Miseq测序平台对16S rRNA V4区进行双端测序;利用Mothur、MEGAN4、Cluster 3.0和Java Treeview等软件进行细菌群落结构及多样性的差异分析。结果:共得到118151条优质序列,发现5738个OTUs,2795个物种,归属27个门,218个属。CA组和CF组唾液微生物群落结构有差异,其中,门水平上,Firmicutes和SR1在CA组显著低于CF组(P<0.05)。属水平上, Rothia、 Alistipes和Catonella 在CA组显著低于CF组(P<0.05),Scardovia在CA组显著高于CF组(P<0.05);CA组和CF组OTUs分别为(550.2±26.48),(597.4±66.07),CA组和CF组Simpson多样性指数分别为(0.73±0.03),(0.49±0.01),均无统计学差异。结论:人类口腔唾液有复杂的微生物群落结构;在门水平和属水平上,有龋者的微生物种类较无龋者稍有减少;Firmicutes和SR1菌门,Rothia、Alistipes和Catonella 菌属的存在与龋病呈负相关;相反地,Scardovia等菌属的存在与龋病呈正相关。     

成年牛及胎牛β-磷酸三钙煅烧骨骨块的制备、表征和细胞相容性研究

目的:对比研究焦磷酸钠(Na₄P₂O₇.10H₂O,NP)和磷酸二氢铵(NH₄H₂PO₄,MAP)制备的成年牛及胎牛β-TCP煅烧骨骨块的表征及细胞相容性,以期制备出一种理化性能较好且生物安全性可靠的纯相β-TCP煅烧骨骨块。方法:以XRD衍射分析、EDX能谱分析、电镜扫描、Micro-CT扫描及材料力学性能检测研究煅烧骨骨块的表征,以体外细胞毒性实验及细胞与材料的复合实验探究煅烧骨骨块的细胞相容性。结果:NH₄H₂PO₄制备的两种煅烧骨骨块其β-TCP纯度较高,Ca/P比值也均接近于1.47;胎牛煅烧骨骨块的孔隙率、抗压强度及抗弯曲强度均高于成年牛煅烧骨骨块(P<0.05);NH₄H₂PO₄制备的两种煅烧骨骨块细胞毒性均为0级,但胎牛煅烧骨骨块上细胞的粘附与增殖速率高于成年牛煅烧骨骨块。结论:NH₄H₂PO₄制备的胎牛β-TCP煅烧骨骨块具有较好的理化性能及细胞相容性,较适用于非承重区骨缺损的修复。     

杓状软骨拨动术12例

本科收治12例单侧环杓关节脱位患者,均行杓状软骨拨动术,报告如下。1资料与方法1．1资料2005-2009年我科共收治环杓关节脱位患者12例,其中男性3例,女性9例;年龄18—72岁;病程1周内7例,     

降低医用牛心包致热原性研究

目的比较不同浓度酒精溶液洗脱医用牛心包中残留戊二醛的效果,通过酒精溶液洗脱作用降低其致热反应。方法牛心包经戊二醛固定后,再用酒精溶液处理,未经酒精溶液处理组作为对照组。分别采用50％、60％、70％、80％、90％酒精溶液对医用牛心包进行浸泡洗脱处理,应用气相色谱法测定洗脱液中戊二醛的浓度,比较不同浓度酒精溶液洗脱戊二醛效果;并采用2005年版《中华人民共和国药典》附录热原检查的方法,检测经60％、70％、90％不同浓度酒精溶液洗脱后牛心包致家兔体温升高的差别。结果洗脱实验中,60％和70％酒精溶液对医用牛心包冲洗后,洗脱液中戊二醛含量分别达18．21‰±0．14％。和11．91‰±0．09‰,优于其余浓度组（n=3,P〈0．01）,60％酒精溶液组优于70％酒精溶液组（n=3,P〈0．05）;热原实验,60％、70％、90％酒精溶液处理组、戊二醛对照组家兔体温升高值分别为0．5℃、0．6℃、0．9℃、0．8℃,其中以60％的酒精溶液效果最优,与对照组相比差异有统计学意义（n=3,P〈0．05）,其余两组与对照组比较差异无统计学意义。结论60％酒精溶液处理可以有效洗脱医用牛心包中残留戊二醛,并且可明显降低其致热原性。     

鼻内镜下双极电凝烧灼在急症鼻出血中的临床运用

目的 探讨鼻内镜下双极电凝烧灼在治疗急症鼻出血中的疗效.方法 回顾性分析95例急诊非外伤、经前鼻镜检查未窥见出血点的鼻出血患者临床资料.按病史治疗方法不同分为2组:A组(首发鼻出血,未经鼻腔填塞治疗)急症行鼻内镜下检查并针对出血点双极电凝烧灼,局部明胶海绵精确填塞.B组(鼻腔填塞法)经规范的前鼻孔和/或前后鼻孔填塞治疗.观察各组一次治愈率、平均住院日及鼻腔并发症的发生率.结果 一次治愈率:A组94.0%(47/50),B组46.7%(21/45).A组一次治疗失败3例均为合并严重鼻中隔偏曲,二次手术校正后治愈.A一次治愈率显著高于B组(P＜0.05).平均住院日:A组(1.2±0.14)d,B组(5.7±1.40)d.组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).鼻腔并发症发生率:A组8.0%(4/50),B组35.6%(16/45).经鼻腔填塞治疗的B组鼻腔粘连等并发症的发生率显著高于未经鼻腔填塞治疗的A组(P＜0.05).结论 鼻内镜下双极电凝对出血部位进行准确电凝烧灼是治疗鼻出血的安全有效的治疗手段.     

光氧化处理脱细胞牛心包构建组织工程心肌补片的实验研究

目的 探讨经染料介导光氧化处理的脱细胞牛心包构建组织工程心肌补片的可行性。方法 新鲜牛心包先脱细胞,再经光氧化法处理,消毒后种植雄性SD骨髓间充质干细胞(MSCs)。结扎雌性大鼠左冠状动脉前降支,制作心肌梗死模型,1周后将符合心肌梗死标准的大鼠随机分成3组,心肌梗死对照组(MI)、补片组(P)、种细胞补片组(P+C)分别进行干预。4周后,超声评价心功能;2周、4周取材行组织学和免疫组化检查。结果 脱细胞处理完全去除了牛心包组织中的细胞,光氧化处理使组织结构致密;种植的细胞在组织表面形成连续的细胞层。P+C组牛心包心肌补片降解程度、微血管密度在2周、4周时均较P组大。超声评价补片4周后大鼠心功能,P+C组左室射血分数(LVEF)、左室缩短分数(LVFS)均较MI组和P组大,与MI组的差异有统计学意义。结论 光氧化处理脱细胞牛心包构建的组织工程心肌补片可以延缓心功能恶化,该处理方法具有良好的应用潜力。     

Short term in vivo thrombosis evaluation of FW-Ⅱ axial blood pump for left ventricular assist

Objective To evaluate in vivo antithrombosis property of optimized FW-Ⅱ axial blood pump and provides evidence for future clinical use.Methods A left ventricle-pump-descending aorta bypass model was established in five healthy sheep (60-70 kg) and the circulation of these sheep was assisted by FW-Ⅱ axial blood pump for 2 weeks.In preoperative and postoperative day 1,2,3,7,10 and 14,blood was drawn from the jugular vein to examine platelet activation and leukocyte-platelet aggregation respectively quantified with Annexin V,CD41/61 and CD14-PE by flow cytometry assays.Immediately after termination of the experiment,FW-Ⅱ axial blood pumps were explanted and each part was inspected for thrombus formation.Macroscopic and histological examinations were checked on heart,brain,kidney and spleen,respectively for thrombosis.Results Compared with preoperative baseline,the number of platelet activation and leukocyte-platelet aggregation reached a peak at postoperative day 2,it retained a high level within 7 days,then gradually decreased,but was still higher than preoperative level at dayl4.According to rotating speed,the number of platelet activation and platelet-leukocyte aggregation were lowest at the speed of 8000 r/min Minus thrombus were found in the front and rear hub of the pump rotor,and there was no thrombus at other components (flow straighter,impeller and pump housing).There were no ischemia and infarction evidences in macroscopic and histological examination of the heart,brain,kidney and spleen.Conclusion FW-II axial blood pump can be used to assist left ventricular circulation for 2 weeks with a satisfactory antithrombosis property.The level of platelet activation and leukocyte-platelet aggregation can be reduced to a lowest level at an optimized pump rotating speed.     

不同浓度透明质酸水凝胶的细胞相容性

背景：水凝胶呈半凝固的胶体状态,可以实现细胞的三维立体培养,消除普通培养皿中出现的“接触抑制”现象,从而提高培养效率,透明质酸水凝胶作为三维培养基质在干细胞和组织工程研究领域的应用已有报道. 目的：探讨透明质酸水凝胶浓度的改变对其基本性能以及对大鼠骨髓间充质干细胞三维培养形态和增殖的影响. 方法：制备4,8,12 g/L的透明质酸水凝胶,观察其凝胶时间、溶胀率、降解速率以及黏弹性;用这3种浓度透明质酸水凝胶包封骨髓间充质干细胞进行三维培养,并以普通培养皿的二维培养作对照.通过激光扫描共焦显微镜观察不同培养条件下骨髓间充质干细胞的形态,采用细胞计数法描绘骨髓间充质干细胞在不同浓度透明质酸水凝胶内的生长曲线. 结果与结论：对于4-12 g/L 的透明质酸水凝胶,其浓度越大,凝胶时间越短,溶胀率越低,降解速率越慢,水凝胶弹性强度越大（P 〈0.05）.激光扫描共焦显微镜见骨髓间充质干细胞在透明质酸水凝胶内呈立体圆球形,与二维培养时呈现的梭形明显不同;同时,细胞计数结果显示骨髓间充质干细胞在透明质酸水凝胶内的增殖率高于二维培养,并以8 g/L透明质酸水凝胶的促增殖作用最明显（P〈0.05）.可见不同浓度的透明质酸水凝胶性能存在差异,对大鼠骨髓间充质干细胞的生长、增殖也有影响,8 g/L 的透明质酸水凝胶更适合大鼠骨髓间充质干细胞的三维培养.