基于UFLC-Q-TOF-MS/MS技术及PCA分析的不同产地杏香兔耳风药材差异研究

该研究建立UFLC-Q-TOF-MS/MS技术结合多元统计分析法快速、简便、准确鉴别不同产地杏香兔耳风药材差异性的方法。采用超高速液相-飞行时间串联质谱仪(UFLC-Q-TOF-MS/MS)对江西、云南、江苏和河南地区等产地的杏香兔耳风药材进行检测,质谱采用ESI源的负离子模式,利用Markerview等软件对数据结果进行PCA和OPLS-DA聚类分析及t检验。结果显示在负离子模式下不同产地的药材主成分得到了良好的区分,聚类结果同时体现了杏香兔耳风药材在地域间的差异性和相似性,共鉴定出40种差异成分。该研究建立的鉴别杏香兔耳风药材产地差异性的方法具有快速准确和简便等优势,为杏香兔耳风不同产地的药材质量评价奠定了基础。     

乙型肝炎肝硬化并自发性细菌性腹膜炎的病原学及耐药性分析

目的分析乙型肝炎肝硬化并发自发性细菌性腹膜炎（SBP）患者的腹水病原菌分布及其耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。 方法选取2010年1月至2017年12月成都市公共卫生临床医疗中心收治的762例乙型肝炎肝硬化并SBP患者,经患者同意后抽取腹水做病原学鉴定及药敏试验。 结果762例患者中,158例腹水培养结果显示病原菌阳性（阳性率为20.73%,158/762）,共检出病原菌166株,除7例患者为复合菌感染,余151例（95.57%）均为单菌感染。166株病原菌中,革兰阳性菌98株（59.04%）,革兰阴性菌59株（35.54%）,真菌9株（5.42%）,其中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）病原菌共22株（13.25%）。革兰阳性菌以溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌、科氏葡萄球菌及粪肠球菌为主,占革兰阳性杆菌的59.18%（58/98）;对青霉素G、红霉素、克林霉素、苯唑西林及四环素耐药率最高,而对万古霉素和替考拉宁的耐药率均为0。革兰阴性杆菌以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主,占革兰阴性杆菌的72.88%（43/59）;对氨苄西林耐药率最高（62.79%）,而对亚胺培南和美罗培南的耐药率均为0。 结论乙型肝炎肝硬化并发自发性细菌性腹膜炎患者的病原菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和溶血葡萄球菌为主,临床医生应根据腹水病原学鉴定及其药敏试验结果合理使用抗菌药物。     

hTPO和hNIS共转染胶质瘤细胞U251介导放射性碘摄取的研究

目的 将人甲状腺过氧化物酶（hTPO）基因及人钠/碘同向转运体（hNIS）基因共转入胶质瘤细胞系U251后,研究其摄碘能力的变化.方法 克隆、重组、包装并扩增纯化得到重组腺病毒（AdTPO）,测定病毒滴度,Western-Blotting检测重组腺病毒的表达.使用脂质体转染法将hNIS基因转染入人胶质瘤细胞系U251中,经过G418硫酸盐筛选获得稳定表达hNIS的细胞系（hNIS-U251）,为hNIS-U251组;使用重组腺病毒将hTPO基因转导入hNIS-U251中,使胶质瘤细胞获得hTPO基因（AdTPO-hNIS-U251）,为AdTPO-hNIS-U251组;未转入hTPO和hNIS的细胞为对照组（U251）.然后进行3组稳定表达细胞系体外摄125I实验及体外125I外流实验.3组间两两比较用q检验（Newman-Keuls法）.结果 AdTPO-hNIS-U251细胞、hNIS-U251细胞和U251细胞所摄取125I分别为（74 647.53±3605.88）、（55 769.96±4353.26）和（507.67±57.69）计数/min,3组间差异有统计学意义（F=836.17,P＜0.01）.AdTPO-hNIS-U251组较对照组（U251）摄125I能力增高约147倍（q=55.64,P＜0.01）,hNIS-U251组较对照组（U251）摄碘能力增高约110倍（q=41.47,P＜0.01）.AdTPO-hNIS-U251组较hNIS-U251组高约1.3倍（q=14.17,P＜0.01）.在体外125I外流实验中证实AdTPO-hNIS-U251组125I外流减慢,其有效半衰期延长至13 min.结论 将hTPO和hNIS基因共转染至胶质瘤细胞系U251后,能有效提高U251的摄碘能力.     

贵州苗族药吉祥草化学成分的分离鉴定

目的:研究贵州苗药吉祥草(Reineckia camea)中的化学成分,以期能为吉祥草药理活性的阐明以及吉祥草药材的进一步开发利用提供科学依据。方法:取吉祥草全草药材20 kg,用80%乙醇加热回流提取3次,提取时间分别为2,2,1 h,将3次提取液合并,滤过,减压浓缩成浸膏。浸膏加适量的蒸馏水溶解后,依次用石油醚、乙酸乙酯、水饱和的正丁醇多次萃取,各部分萃取液经减压浓缩,干燥,得石油醚部位浸膏28 g,乙酸乙酯部位浸膏305 g,正丁醇部位浸膏812 g。对乙酸乙酯和正丁醇部位浸膏,利用硅胶柱,大孔树脂,小孔树脂(MCI)柱,ODS中压柱,LH-20型羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)及Pre-HPLC等分离手段进行分离纯化,并通过理化性质,HR-ESI-MS,核磁波谱及文献数据进行结构鉴定。结果:从吉祥草的乙酸乙酯和正丁醇部位分离得到13个化合物,分别为2α,3β-dihydroxy-5α-pregn-16-en-20-one(1),(25R)-26-hydroxycholesterol(2),薯蓣皂苷元(3),β-谷甾醇(4),β-胡萝卜苷(5),异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷(6),杜鹃素(7),木犀草素(8),1,2,8-trihdroxy-5,6-dimethoxyxanthone(9),獐牙菜苦苷(10),二(2-乙基己基)邻苯二甲酸酯(11),交链孢酚单甲醚(12),N-反式阿魏酸酪酰胺(13)。结论:化合物1,2,6~10,12,13均为首次从吉祥草中分离得到。     

贵州苗药吉祥草中皂苷类化学成分研究

目的研究贵州苗药吉祥草Reineckia carnea中的皂苷类成分。方法用95%乙醇提取,萃取后利用常规硅胶柱、大孔树脂、ODS C18、Sephadex LH-20及Pre-HPLC等进行分离纯化,通过理化性质、HR-ESI-MS和核磁波谱进行结构鉴定。结果从吉祥草的正丁醇部位分离得到10个皂苷类化合物,分别鉴定为(1β,3β,16β,22S)-cholest-5-ene-1,3,16,22-tetrol-1,16-di-(β-D-glucopyranoside)(1)、(1β,3β,16β,22S)-cholest-5-ene-1,3,16,22-tetrol1-[O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside]-16-(β-D-glucopyranoside)(2)、(20S,22R)-spirost-25(27)-en-1β,3β,4β,5β-tetraol-5-O-β-D-glucopyranoside(3)、kitigenin 5-O-β-Dglucopyranoside(4)、蜘蛛抱蛋苷A(5)、(17,20-S-trans)-5β-pregn-16-en-1β,3β-diol-20-one-1-O-β-D-xylopyranosyl-(1→2)-[α-L-rhamnopyranosyl]-3-O-α-L-rhamnopyranoside(6)、薯蓣皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、麦冬皂苷T(8)、prosaikogenin D(9)、柴胡皂苷b2(10)结论化合物3、5、8~10均为首次从吉祥草中分离得到,为进一步阐明和开发吉祥草中皂苷类成分提供了一定的参考。     

我国县级中医药发展的现状和策略

目的：分析县中医院和县综合医院业务变化趋势,为县级中医药发展提供政策参考。方法：利用1993--2010年全国所有县中医院执业医师人员数、县级医院医师服务量和收入数据,进行描述性分析。结果：1993--2010年,县中医院院均中医执业医师构成比从62．5％下降到38．3％;县中医院的每医师日均门急诊人次数、县中医院和县综合医院每医师日均住院床日数均呈现先降低后增长趋势,而县综合医院每医师日均门急诊人次数持续增长;县中医院门诊和住院中药收入分别仅占其药品收入的35．0％-40．9％和10．8％～14．2％。结论：县中医院中医人力资源减少,医师服务效率低于县综合医院,收入结构趋近于县综合医院,中药收入少于西药。县中医院仍体现门诊服务优势,而县综合医院体现住院服务优势。建议：建立有效的中医人才激励机制,加强中医人才队伍建设,调整中医药服务价格尤其是门诊服务价格,新农合在分病种的基础上加强补偿中医药门诊服务。     

聚乙二醇干扰素α-2a联合恩替卡韦治疗高病毒载量HBeAg阳性慢性乙型肝炎的临床研究

目的分析研究聚乙二醇干扰素α-2a联合恩替卡韦(ETV)治疗高病毒载量HBeAg阳性慢性乙型肝炎的临床疗效。方法选取我院2012年8月至2013年8月收治的180例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者,根据患者治疗方法的不同分为3组:联合组60例,应用聚乙二醇干扰素α-2a联合恩替卡韦治疗;ETV组60例,单纯行恩替卡韦治疗;派罗欣组60例,单纯行派罗欣聚乙二醇干扰素α-2a治疗,对比三组患者的疗效。结果治疗2个月后,联合组总有效率为88.3%,派罗欣组为60.0%,ETV组为61.7%,联合组疗效显著优于ETV组、派罗欣组(P<0.05),而ETV组、派罗欣组疗效比较差异无统计学意义(P>0.05)。此外,联合组患者病毒学和化学应答与ETV组比较差异无统计学意义(P>0.05),但联合组患者HBeAg血清学应答显著优于ETV组(P<0.05);联合组患者病毒学和化学应答以及HBeAg血清学应答均优于派罗欣组(P>0.05);ETV组患者病毒学和化学应答以及HBeAg血清学应答与派罗欣组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论聚乙二醇干扰素α-2a联合恩替卡韦治疗高病毒载量HBeAg阳性慢性乙型肝炎疗效显著,且不良反应小,值得临床推广。     

基于代谢组学的广陈皮治疗脾虚痰湿证大鼠模型的研究北大核心CSCD

该研究采用代谢组学方法分析广陈皮对脾虚痰湿证内源性代谢产物的影响,并探究广陈皮治疗脾虚痰湿证的相关作用机制。采用多因素造模法建立脾虚痰湿证大鼠模型。通过观察大鼠肝组织病理变化,并测定血浆中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等病理生化指标含量,初步评价广陈皮对脾虚痰湿证模型大鼠的干预作用。采用免疫组化技术检测大鼠肾AQP2、结肠AQP3、颌下腺AQP5的表达,评估陈皮对脾虚痰湿证大鼠的水通道蛋白表达作用。进一步采用UHPLC-ESI-MS/MS技术对大鼠血浆样本进行代谢轮廓分析,应用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)等多种方法进行模式识别,结合t检验和变量投影重要性(VIP)筛选差异代谢物,并基于MetaboAna-lyst 5.0进行通路分析。实验表明广陈皮可改善脾虚痰湿证大鼠肝组织病理变化,升高大鼠血浆中HDL-C水平,并降低TG、TC、LDL-C水平,增强对脾虚痰湿证大鼠肾AQP2、结肠AQP3以及颌下腺AQP5的表达。此外,UHPLC-ESI-MS/MS共筛选出脾虚痰湿证差异代谢物87个(其中39个代谢物水平明显上调升高,48个代谢物水平显著下降),差异最大的代谢物依次为甘氨酸、L-异亮氨酸、N-乙酰-L-酪氨酸、黄嘌呤、次黄嘌呤、葫芦巴碱等。差异代谢物主要富集于类固醇激素生物合成、亚油酸代谢、嘌呤代谢等通路。该研究采用代谢组学方法能区分并揭示脾虚痰湿证的特征性代谢模式,OPLS-DA判别模型的初步构建为脾虚痰湿证的中医证候辨识提供了客观辨证依据,为从小分子层面及整体水平探究中医证候的生物学基础提供思路与方法。     

腹腔镜下诊治妇科腹腔内出血的体会

目的 探讨腹腔镜对妇科腹腔内出血诊治的价值.方法 采用腹腔镜下诊治60例妇科腹腔内出血患者,均在入院24h内接受急诊LSC手术.结果 60例妇科腹腔内出血手术全部在腹腔镜下完成,无中转开腹,均无并发症发生.结论 腹腔镜诊治妇科腹腔内出血为首选,具有创伤小、疼痛轻、恢复快、并发症少等优点.     

心理护理对未婚人工流产患者不良情绪的影响

近年来,青少年婚前性行为发生率逐年上升,未婚先孕的发生率有所增加,未婚先孕行人工流产的人数相应增加,人工流产后导致了诸多的身心健康问题。我们对318例在我院妇科门诊未婚早孕妇女分别实行人工流产方法终止妊娠,并对两组流产患者给予心理护理及观察对照研究。现