荒漠植物牛心朴子内生真菌的分离与鉴定

目的:研究荒漠植物牛心朴子内生真菌类群在不同器官中分布的多样性及其与生态环境的关系,并初步筛选牛心朴子具有潜在生物活性的内生真菌.方法:采用PDA培养基,分别对陕西、宁夏野生牛心朴子内生真菌进行分离、纯化;根据菌落的形态特征并结合真菌的ITS序列进行菌株鉴定;采用稻瘟酶模型,初步筛选活性菌株..结果:从牛心朴子中共分离得到内生真菌94株,鉴定为6目9科13属9种,其中宁夏产地47株,根5株,茎14株,叶28株,鉴定为4目5科9属8种;陕西产地47株,其中根16株,茎18株,叶13株,鉴定为4目6科8属5种;18株真菌代谢产物能完全抑制稻瘟霉孢子萌发,其中N4和S17菌株的发酵液病原菌菌丝生长的抑制作用均比较强.结论:荒漠植物生心朴子内生真菌具有多样性,不同地理环境和组织类型对内生真菌的数量和种群组成存在显著差异;宁夏牛心朴子菌株分布于叶中较多,陕西牛心朴子菌株分布于茎、叶中较多;牛心朴子内生真菌具有显著的抗稻瘟菌活性.     

增强型绿色荧光蛋白和大鼠血管生长素-1基因共表达的重组慢病毒体外转染大鼠骨髓间充质干细胞

目的：观察共表达的血管生成素-1（Ang-1）基因和增强绿色荧光蛋白（EGFP）基因的重组慢病毒体外转染大鼠骨髓间充质干细胞（rMSC）．方法：体外包装Ang-1基因和EGFP基因共表达的重组慢病毒,测定病毒滴度．转染rMSCs,荧光显微镜下观察EGFP的表达、转导效率,实时荧光定量PCR,Western blot分别在不同时间点行Ang-1基因mRNA以及蛋白表达的相对定量分析．将转染的rMSCs（Ang-1-rMSCs）与对照组rMSCs培养48h的上清液分别与人脐带静脉内皮细胞（HUVECs）共培养,MTT法检测HUVECs的吸光度值．结果：包装的浓缩慢病毒,滴度为6．1×10^10TU／L．转染rMSCs,5d转染效率为（92．7±3．01）％;实时荧光定量PCR和Western Blot结果显示Ang-1-rMSCs中Ang-1基因mRNA及蛋白表达水平均以转染后3—7d为高峰,随后开始呈缓慢下降趋势．Ang-1-rMSCs与HUVECs共培养,与对照组rMSCs比较,MTT法检测显示Ang-1-rMSCs能明显促进HUVECs的增殖（P〈0．01）．结论：在体外重组的慢病毒成功转染rM—SCs,其Ang-1基因表达以转染后3—7d为高峰,且转染的rMSCs具有Ang-1基因的生物学活性．     

新型冠状病毒肺炎疫情下定点收治医院护士职业认同在组织支持感与工作倦怠间的中介作用

目的 探讨新型冠状病毒肺炎疫情下定点收治医院护士职业认同在组织支持感与工作倦怠间的中介作用。方法 选取新型冠状病毒肺炎疫情下定点收治医院的313名护士作为研究对象,采用护士职业认同量表、组织支持感量表及修订的Maslach工作倦怠量表对其进行问卷调查,分析新型冠状病毒肺炎疫情下定点收治医院护士职业认同在组织支持感与工作倦怠间的中介作用。结果 313名护士工作倦怠总分为(42.97±13.58)分,组织支持感得分为(49.53±9.95)分,职业认同得分为(105.64±16.60)分。工作倦怠得分与职业认同、组织支持感得分均呈负相关,组织支持感得分与职业认同得分呈正相关(均P<0.05);路径分析显示职业认同在组织支持感与工作倦怠间起部分中介效应,中介效应为-0.485,占总效应的65.72%。结论 新型冠状病毒肺炎疫情下定点收治医院护士的工作倦怠水平较高,其与职业认同感、组织支持感均呈负相关,组织支持感可以直接预测临床护士的工作倦怠水平,也可以通过职业认同间接预测工作倦怠水平。     

卵巢恶性类固醇细胞瘤1例

患者女性、14岁。13岁月经初潮之后曾停经2次。患者家属发现其嗓音变粗。查体:喉结较明显,毛发较浓密,上唇周可见较浓密汗毛。B超示左附件区有一5.4 cm×5.7 cm×6 cm的分隔状囊性占位。术中见左卵巢有一约7 cm×6 cm×6 cm囊性占位,包膜表面光滑,其内为血性液及较多朽烂组织,左卵巢失去正常形态。病理检查巨检:灰白、灰褐色组织一堆,共7 cm×6 cm×2 cm大小,其内可见血凝块样物及黄体样物,质中,囊壁内可见灶性褐色细乳头样突起。镜检:肿瘤细胞弥漫,片状或巢状分布,间质富于血管;主要由两种细胞组成,一种细胞较小,为多边形或近似立方体,胞…     

长白山区几种植物油中脂肪酸成分的研究

我省长白山区野生植物资源丰富，为了及早开发利用，我们筛选了几种植物油进行药效学试验，发现它们都具有明显的降低胆固醇和改善脂肪肝等作用，本文仅对几种植物种子中所含脂肪酸成分进行报道。     

血管生长素-1基因慢病毒载体的构建及其在间质干细胞的表达

目的： 构建带有血管生长素-1（Ang-1）基因的慢病毒载体并实现该基因在大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）中的表达。方法： RT-PCR获得大鼠Ang-1基因，限制性内切酶酶切和基因重组构建慢病毒载体质粒PNL-Ang-1-IRES₂-EGFP，在脂质体介导下与包装质粒HELPER,包膜质粒VSVG共转染293T细胞包装生产慢病毒颗粒并感染rMSCs。 PCR检测Ang-1基因的插入，细胞RT-PCR检测Ang-1 mRNA表达，免疫细胞化学和Western blotting检测Ang-1蛋白的表达。结果： 所获Ang-1基因经测序证实与GenBank报道的序列一致。慢病毒载体质粒PNL-Ang-1-IRES₂-EGFP经SalⅠ和BamHⅠ双酶切后电泳显示 1 512 bp Ang-1目的基因片段和10.5 kb PNL-IRES2-EGFP载体片段。病毒基因组PCR证实Ang-1基因插入。荧光显微镜观察到EGFP表达。细胞RT-PCR检测到Ang-1 mRNA表达。免疫细胞化学和Western blotting检测到Ang-1蛋白表达。结论： 成功构建带有Ang-1基因的慢病毒载体并实现在rMSCs中的表达，为Ang-1基因修饰干细胞的应用研究奠定了基础。     

定量检测T细胞受体重排删除DNA环含量评价急性非淋巴细胞白血病患者胸腺近期输出功能

目的检测急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者T细胞受体重排删除DNA环(signaljoint T-cell receptor exc ision DNA c irc les sjTRECs,TRECs)的含量,从而探讨患者的初始型naive T细胞水平和胸腺近期输出功能特点。方法利用实时定量PCR(TaqM an)方法,检测77例ANLL患者外周血单个核细胞(PBMC)TRECs的水平,并根据外周血中CD3阳性率计算CD3细胞中TRECs水平。14例ANLL缓解期患者和14例正常人外周血作为对照。结果ANLL患者外周血中TRECs含量为(0.43±0.92)拷贝/1 000 PBMCs,(2.02±3.25)拷贝/1 000 CD3+细胞,明显低于正常人TRECs水平[(4.10±3.65)拷贝/1 000 PBMCs和(6.84±4.71)拷贝/1 000 CD3+细胞,P=0.0000和P=0.0001]和缓解期患者[(2.19±2.49)拷贝/1 000 PBMCs和(6.30±7.13)拷贝/1 000 CD3+细胞,P=0.0000和P=0.0005]。各亚型ANLL患者的TREC水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论绝大多数ANLL型患者胸腺近期输出naive T细胞功能明显降低,缓解期患者的胸腺近期输出功能有一定程度恢复。     

慢性粒细胞白血病相关的TCR Vβ T细胞的诱导及其限制性和克隆性分析

目的:了解体外诱导CML细胞相关TCRVβ亚家族T细胞克隆性增殖及其杀伤性的情况。方法:采用混合淋巴细胞/白血病细胞培养法(MLTC)体外将CML细胞、K562细胞和bcr-abl多肽与供者外周血单个核细胞混合培养和扩增,利用RT-PCR-基因扫描技术分析培养后T细胞的TCRVβ谱系的限制性利用和克隆性增殖情况,并经LDH法分析诱导增殖T细胞的杀伤性。结果:经bcr-abl多肽、CML细胞和K562细胞诱导扩增1-2周后,供者外周血T细胞表达10-13个Vβ亚家族,在Vβ16和Vβ21出现克隆性增殖T细胞,在Vβ5和Vβ13出现寡克隆生长趋势T细胞。诱导扩增后的T细胞对CML和K562细胞具有特异性杀伤作用。结论:利用CML细胞、K562细胞和bcr-abl多肽可在体外诱导出CML细胞特异性CTL,该CTL可能为优势表达的Vβ亚家族克隆性T细胞。     

Neuropilin-1基因在CML骨髓基质细胞中的表达及其意义

目的了解Neruophlin-1基因在慢性粒细胞白血病(CML)骨髓基质细胞中的表达情况.方法收集14例CML和20例正常对照骨髓标本,分离单个核细胞.进行体外长期培养,收集贴壁细胞(骨髓基质细胞).利用RT-PCR方法分析两组骨髓基质细胞中的cDNA,了解Neuropilin-1 基因表达情况.结果建立了CML和正常人骨髓基质细胞培养方法,CML骨髓基质细胞中的Neuropilin-1基因表达率(50%)明显低于正常对照(85%)(p<0.05).结论参与调控骨髓基质细胞的Neuropilin-1基因可表达于大部分正常人和部分CML患者骨髓基质细胞中,Neuropilin-1基因在部分CML骨髓基质细胞中的表达缺失可能与其调节造血功能异常有关.     

转录因子GATA-2的研究进展

转录因子GATA-2是具有锌指结构的GATA家族中的一员,它在造血系统中广泛表达,且与造血细胞的分化、发育关系密切.GATA-2主要调控造血干/祖细胞的增殖和分化,亦可调控其他造血相关因子的表达,并与白血病等血液病的发生有一定的相关.