人脐静脉内皮细胞体外培养的影响因素

人脐静脉内皮细胞体外培养对于血管内皮细胞的结构和功能研究提供了一条十分有效的途径。本文研究了影响人脐静脉内皮细胞体外培养的几个因素。实验提示:存活细胞数随脐带离体时间而减少,脐带离体24h 尚有50%的存活细胞;培养液中血清的最适浓度为10～16%;胶原和纤维结合蛋白等细胞外基质成分均有利于内皮细胞粘附和生长;肝素、凝血酶单独应用对内皮细胞生长繁殖无明显促进作用     

基因探针在大肠杆菌中的扩增及其提纯

本文报道了基因探针在大肠杆菌中的扩增与提纯方法。含基因探针的质粒用氯化钙方法转染大肠杆菌,被转染的细菌与质粒在培养液中同步扩增,然后用碱裂解法抽提扩增后的质粒。结果表明:(1)质粒的转化效率与其浓度有关;(2)经转染、扩增与抽提后,获得了大量的纯化质粒DNA;(3)纯化后的基因探针能满意地用于DNA 标记及分子杂交。     

聚合酶链反应条件控制与优化

聚合酶链反应作为一种强有效的DNA 体外扩增技术,已被广泛地应用于一些遗传性疾病的临床基因诊断。然而,它对反应条件的变化颇为敏感.本文观察了不同反应物成分及时间/温度参量对聚合酶链反应产量和特异性的影响.通过探讨这些因素如何影响扩增结果,以及它们之间在扩增过程中如何相互作用等问题,加深了对影响条件优化的相互关联的各生物化学及生物物理参量的理解,为优化扩增条件提供依据。     

Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶的最新研究进展

Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶(TTSPs)是一类通过氨基末端跨膜区域锚定在细胞膜上的丝氨酸蛋白酶.激活后的TTSPs通过其特异性底物参与多种生理和病理过程,功能异常可导致肿瘤、耳聋、缺铁性贫血、心血管疾病等.     

医源性胆道损伤的一期修复

胆管损伤是腹腔镜胆囊切除术(LC)的严重并发症,发生率约为0.32%～0.75%[1],修复后易形成狭窄[2],由此引起的后期不良反应不断受到关注,已成为较以往任何时候都更为复杂的问题[3],引发的法律诉讼不断增加[4].上海市闸北区市北医院2003-2009年在LC中意外损伤肝外胆管5例,现将治疗经过及体会报告如下.     

术前术后介入化疗联合术中腹腔温热灌洗预防胃肠道癌术后复发的临床研究

降低进展期胃肠道癌术后腹膜复发和肝转移是改善预后的关键,且成为近年肿瘤外科研究的热点[1]。1999年1月起我们将新辅助化疗与术中腹腔温热灌洗化疗(IPHC)联合用于进展期胃肠道癌手术病人,取得较好疗效,现报告如下。临床资料1.一般资料本组共86例,男50例,女36例。年龄45～83岁,平均69.2岁。病人均经手术病理证实,其中胃癌28例,结肠癌58例,抽签随机分为治疗组和对照组。治疗组46例,男26例,女20例,平均69.5岁。胃癌15例,其中Ⅱ期3例,Ⅲ期9例,Ⅳ期3例;结肠癌31例,其中DukesB期3例,C期22例,D期6例。对照组40例(其中28例为1997年1月～1998年…     

以健择为主的介入化疗联合全身化疗治疗30例晚期胰腺癌的疗效观察

由美国Eli Lily研制成功的健择（吉西他宾），于1998年被美国FDA批准用于治疗晚期胰腺癌一线药物，我们自2003年起用健择联合顺铂治疗晚期胰腺癌30例，分析了其客观有效率及改善肿瘤的相关症状的情况。     

从绒毛细胞中抽提DNA的体会

近年来应用孕早期的绒毛组织作DNA分析,对某些遗传性疾病进行产前诊断,具有早期,快速、准确的优点。DNA 分析的第一步就是要从绒毛细胞中抽提NDA。本文以     

SOCS-3基因在结肠癌中的表达及其甲基化测定

目的通过对SOCS-3基因在结肠癌和癌旁组织中的表达及其启动子甲基化状态的测定,探讨其与结肠癌发生、发展和转移的关系。方法收集40例结肠癌患者的肿瘤标本、20例癌旁组织及10例正常结肠组织,运用甲基化特异性PCR测定SOCS-3基因CpG岛甲基化状态,同时运用实时定量PCR分析SOCS-3基因在结肠癌组织中的表达水平。结果40例结肠癌组织中有34例(85%)存在SOCS-3基因CpG岛的异常甲基化,癌旁组织中有2例(10%),而正常结肠组织中未检测到SOCS-3基因CpG岛的异常甲基化;结肠癌组织中SOCS-3基因CpG岛甲基化组与无甲基化组相比,其SOCS-3基因的相对表达量明显减少(P0.05),表明SOCS-3基因CpG岛甲基化可导致SOCS-3基因表达降低。SOCS-3基因CpG岛甲基化与性别、年龄无关(P0.05),而与肿瘤病理分级、TNM分期有关(P0.05)。结论结肠癌中存在SOCS-3基因CpG岛异常甲基化,且CpG岛的甲基化导致其基因表达降低。SOCS-3基因CpG岛甲基化可能参与了结肠癌的发生、发展和转移。