喉癌来源黑色素瘤抗原A3在小鼠黑色素瘤细胞模型的表达

目的:建立pIRES2-EGFP/MAGE-A3真核质粒在小鼠黑色素瘤B16细胞稳定表达的肿瘤细胞模型。方法:将喉癌来源的黑色素瘤抗原A3(Melanoma-associated antigen A3,MAGE-A3)构建成真核质粒pIRES2-EGFP/MAGE-A3,脂质体法将pIRES2-EGFP/MAGE-A3转染小鼠黑色素瘤B16细胞,G418筛选阳性克隆,荧光显微镜检测阳性克隆中增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的表达,荧光定量PCR(qRT-PCR)检查MAGE-A3在B16细胞中的转录。结果:pIRES2-EGFP/MAGE-A3真核质粒转染B16细胞后筛选得到阳性克隆,可见融合蛋白表达产生明亮的绿色荧光,qRT-PCR可检测到MAGE-A3 mRNA的转录。结论:pIRES2-EGFP/MAGE-A3真核质粒通过脂质体法能有效转染,并在B16稳定表达,成功建立了MAGE-A3肿瘤细胞模型。     

豚鼠变应性鼻炎模型的建立和观察

目的 了解变应性鼻炎的免疫、病理生理和形态学的改变.方法 用橄榄油将甲苯-2,4-二异氰酸酯配成10%溶液作为致敏剂,滴鼻,建立豚鼠变应性鼻炎模型8例.另8例正常豚鼠作对照.致敏结束、模型成功后取血,测定红细胞C3b受体花环率和红细胞IC花环率.取鼻中隔中黏膜,采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连结法行免疫组化染色,观察P物质在鼻黏膜中的分布.用双抗夹心ELASA方法 测定血清组胺的含量.鼻黏膜做光镜和透射电镜观察.结果 (1)鼻部症状评分比较,模型组高于对照组(P＜0.01).(2)模型组的红细胞C3b受体花环率和红细胞IC花环率均低于对照组(P＜0.05).(3)模型组比对照组鼻黏膜P物质阳性细胞染色加深,阳性颗粒增多,密度增大,阳性细胞计数增多(P＜0.05).(4)组胺含量高于对照组(P＜0.01).(5)光镜下见对照组鼻黏膜上皮层为正常的假复层纤毛柱状上皮.模型组黏膜上皮增生、转化、坏死,固有层和黏膜下层改变,并见特征性的嗜酸性粒细胞、肥大细胞浸润.(6)透射电镜见对照组鼻黏膜上皮细胞结构完整,纤毛微管整齐、清晰,胞质内细胞器丰富,嗜酸性粒细胞正常.模型组黏膜上皮、细胞、纤毛、微管、微绒毛改变,细胞体积、核、细胞器改变,肥大细胞、嗜酸性粒细胞改变,血管扩张.浆液腺体旺盛增生.结论 豚鼠变应性鼻炎模型在免疫、病理生理和形态学出现的改变与临床类似.     

豚鼠变应性鼻炎模型鼻黏膜形态学的观察

目的：探讨变应性鼻炎鼻黏膜在光镜和电镜超微结构下的病理变化。方法 用橄榄油将甲苯-2，4-二异氰酸酯配成浓度为10％溶液作为致敏剂滴鼻，建立豚鼠变应性鼻炎动物模型8例。另取8例正常豚鼠作对照。致敏结束、模型成功后，取两组鼻黏膜进行光镜、透射电镜观察。结果：①光镜下见对照组鼻黏膜上皮层为假复层纤毛柱状上皮，连续、完整，可见正常的黏膜上皮层、固有层和黏膜下层。模型组鼻黏膜上皮脱落，杯状细胞增生，鳞状上皮组织转化，上皮坏死，固有层和黏膜下层腺体增生，血管扩张，组织水肿，并见特征性的嗜酸性粒细胞、肥大细胞浸润。②透射电镜见对照组鼻黏膜上皮细胞结构完整，纤毛整齐，微管规则，胞质内细胞器丰富。模型组鼻黏膜上皮破损，杯状细胞破损，纤毛微管紊乱，微绒毛消失，细胞体积、核、细胞器改变，见大量嗜酸性粒细胞和肥大细胞，嗜酸性粒细胞发生脱颗粒的改变，可见巨噬细胞及浆细胞，血管扩张，浆液腺体旺盛增生。结论：变应性鼻炎鼻黏膜出现变态反应性形态学的病理改变。     

豚鼠变应性鼻炎模型鼻黏膜的病理改变

目的:观察变应性鼻炎鼻黏膜的病理变化。方法:用橄榄油将甲苯-2,4-二异氰酸酯配成浓度为10%的溶液作为致敏剂,滴鼻,建立豚鼠变应性鼻炎动物模型8例。8例正常豚鼠作对照。致敏结束、模型成功后,取两组鼻黏膜组织,光镜下观察病理变化。结果:模型组鼻黏膜上皮脱落,杯状细胞增生,鳞状上皮组织转化,上皮坏死,固有层和黏膜下层腺体增生,血管扩张,组织水肿,并见特征性的嗜酸性粒细胞、肥大细胞浸润,这种病理改变与变应性鼻炎的临床表现大致吻合。对照组鼻黏膜上皮层为假复层纤毛柱状上皮,连续、完整、清晰,可见正常的黏膜上皮层、固有层和黏膜下层。结论:变应性鼻炎鼻黏膜出现特征性的炎症病理改变。     

外伤性鼓膜穿孔用玻璃纸灼贴的观察

将84例外伤性鼓膜穿孔完全随机分组,对未中缀的灼贴组(移位的鼓膜瓣复位,玻璃纸灼贴)40例及自然愈合组38例进行观察比较,经统计学处理后发现灼贴组具有如下优点:(1)穿孔愈合时间缩短;(2)穿孔愈合率提高;(3)听力增进较好;(4)穿孔缘内斜生长较少;(5)多为全层愈合;(6)感染率及感染程度降低。性别、年龄对两组穿孔愈合率无影响。结果表明外伤性鼓膜穿孔早期灼贴效果满意,值得推崇。本文对灼贴的依据、愈合机制、影响因素及玻璃纸贴补的优点等进行了讨论。     

电离子治疗鼻部疾病的临床报告

电离子近年来才开始应用于临床。我们采用GX-Ⅲ型多功能电离子手术治疗机（广西科学院应用物理研究所研制），治疗153例鼻部疾病，效果满意，报告如下。材料和方法一、临床资料153例患者中，①单纯性鼻炎：74冽，男41例，女33例，年龄14～66岁，病程6个月～10年。②肥厚性鼻炎：3O例，男21例，女9例，年龄18～45岁，病程2～20年。③常年变应性鼻炎：25例，男16例，女9例，年龄ZO～54岁，病程9个月～10年。所有鼻炎病例均为治疗未愈迁延、无效者。35例接受过强的松花及高渗搪液下鼻申注射，6例变应性鼻炎接受过康宁克通注射。①外鼻、鼻前…     

慢性鼻窦炎病理因素对中耳功能影响的评价

目的 探讨慢性鼻窦炎对中耳功能的影响.方法 53例慢性鼻窦炎患者和10例健康成人,分别进行声导抗检查和纯音测听,采用多状态Logistic回归模型评价慢性鼻窦炎影响中耳功能的可能因素.结果 本组慢性鼻窦炎患者中,鼓室导抗图A型33例（62.26%）,As型4例（7.55%）,B型2例（3.77%）,C型14例（26.42%）;听力检查示正常听阈35例（66.04%）,轻度聋16例（30.19%）,中度聋2例（3.77%）.经过Logistic回归分析,最后确定了2项可能影响患者的鼓室导抗图和纯音听阈的因素,即筛窦的CT分型呈硬化型和提示病情较重的鼻窦炎临床分型和分期.结论 慢性鼻窦炎可影响中耳功能,尤其是筛窦呈硬化型、病变分型分期提示疾病病情重时,效应最为明显.     

头颈部肿瘤组织中纤溶酶原激活物的测定

采用纤维蛋白板测定头颈肿瘤组织中纤溶酶原激活物（ＰＡ），结果表明：①头颈恶性肿瘤原发灶、颈淋巴结转移癌ＰＡ活性增高，比活性均值高于相应癌灶邻近正常组织和头颈良性肿瘤组织（Ｐ＜０．０１）；②在原发灶中ＰＡ比活性均值随肿瘤分期的进展而递增。提示ＰＡ可能是参与头颈恶性肿瘤生长、浸润及转移的机制之一，ＰＡ使头颈癌细胞激活纤溶系统降解癌周组织而浸润、转移。     

葡萄球菌肠毒素A和黑色素瘤抗原A3基因重组真核共表达载体的构建及其在293T细胞的表达

目的构建葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal endotoxinA,SEA)和喉癌来源的黑色素瘤抗原A3(melanoma-associated antigenA3,MAGE-A3)基因共表达的真核表达载体,检测、鉴定其在293T细胞中的表达情况。方法分别用RT-PCR方法 及人工化学合成法获得MAGE-A3和SEA基因片段,然后依次将MAGE-A3和SEA基因克隆至含内部核糖体进入位点的真核表达载体IRES序列的上、下游,构建成重组质粒pMGEA3-IRES-SEA。经脂质体转染至293T细胞以后,用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹分别鉴定SEA和MAGE-A3基因的表达。结果限制性内切酶酶切分析证实MAGE-A3和SEA基因均正确地克隆在pMAGEA3-IRES-SEA中,基因测序结果与GenBank公布的MAGE-A3、SEA序列完全一致,实现了双基因的正确重组。重组质粒转染293T细胞后能检测到MAGE-A3、SEA基因的高水平的有效表达。稳定表达双基因的293T细胞上清对外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)增殖有促进作用,与细胞中SEA的表达和分泌有关。结论成功地构建了pMAGEA3-IRES-SEA真核表达质粒,并能在293T细胞中有效表达MAGE-A3和SEA蛋白,由此奠定了其作为抗喉癌DNA疫苗应用的基础。