五子衍宗丸对化疗引起的骨髓抑制模型造血干细胞向巨核系细胞分化的影响

目的 研究五子衍宗丸对环磷酰胺造成的骨髓抑制小鼠的骨髓造血干细胞向巨核系分化的影响。方法 通过对C57BL/6J小鼠ip环磷酰胺构建化疗引起的骨髓抑制模型。根据随机数字表法将小鼠分为对照组、模型组及五子衍宗丸4、8、16 g/kg组,每组10只。于首次注射环磷酰胺后即开始进行药物干预,对照组ig生理盐水;五子衍宗丸组分别ig 4、8、16 g/kg五子衍宗丸溶液,持续给药3周。实验第1、7、14、21天称体质量,眼眶取血,并吸取20 μL溶于血细胞检测仪用稀释液,全自动血细胞分析仪检测血细胞计数。股骨苏木精–伊红（HE）染色观察巨核细胞形态及数量,流式细胞法检测骨髓造血干、祖细胞数,并分选巨核细胞,测定巨核细胞多倍体情况。结果 五子衍宗丸能够明显提升化疗骨髓抑制小鼠的外周血小板数,剂量下相关性促进造血干细胞向巨核系逐步分化,促进巨核细胞多倍体形成（P＜0.05）。结论 五子衍宗丸可一定程度恢复环磷酰胺造成的骨髓巨核系损伤,促进骨髓造血系统向巨核系分化,提高内源性血小板的产生。     

PM2.5致大鼠肺损伤模型中肺巨噬细胞NLRP3 炎性小体活化研究

摘要： 目的 探讨肺巨噬细胞NLRP3炎性小体活化在大气细颗粒物 （PM2.5） 所致肺炎症损伤中的作用。方法 采用中流量采样器收集PM2.5颗粒物制成混悬液, 经气管滴注给予高、 中、 低剂量 （分别为15、 10、 5 mg/kg） 制成大鼠肺损伤模型, 3 d后麻醉动物进行肺泡灌洗, 收集支气管肺泡灌洗液 （BALF） 中的巨噬细胞, 中性红法测定其吞噬功能, 并采用免疫荧光双染色观察肺巨噬细胞内NLRP3的表达; 处死大鼠解剖取肺组织, HE染色观察肺损伤严重程度并评分, 免疫组化法检测肺组织NLRP3表达, ELISA法测定肺组织内IL-18、 IL-1β及Caspase-1的表达情况。结果 大鼠经气管滴注PM2.5染毒后, BALF内巨噬细胞吞噬功能下降。实验组大鼠肺损伤明显, 表现为间质性肺炎; 肺泡间隔明显增宽, 部分肺泡壁断裂, 尤以高剂量组表现明显; 各实验组大鼠的肺组织病理学评分均明显高于对照组 （均 P＜0.05）。低、 中、 高剂量组大鼠肺组织内NLRP3表达均高于对照组。肺组织内IL-18、 IL-1β及Caspase-1的表达不同程度上调。结论 大鼠气管滴注PM2.5引起的肺损伤和炎症反应与肺巨噬细胞内NLRP3炎症小体的活化有关。     

急性髓细胞白血病患者CD56抗原表达与MDR1基因表达量的关系研究

目的 研究初治急性髓细胞白血病(AML)患者CD56抗原表达与多药耐药(MDR)1基因表达量的关系,探讨CD56抗原表达与MDR1基因表达量在AML耐药中的作用及相互关系.方法 采用流式细胞术(FCM)和建立实时荧光定量PCR技术分别检测79例AML患者CD56抗原表达及MDR1基因表达水平并分析两者之间的关系及临床意义.结果 24.1%AML患者表达CD56抗原,FAB亚型中M5 AML患者表达阳性率高于其他亚型.遗传学危险度分级高危组患者CD56抗原表达阳性率显著高于中危组(P<0.01),伴t(8:21)AML患者CD56抗原表达阳性率(57.1%)显著高于其他低危组AML(P<0.05).CD56抗原表达阳性初治AML患者MDR1基因表达水平显著高于表达阴性患者(P<0.001).MDR1基因高表达且CD56抗原阳性AML组的CR率(58.8%)显著低于MDR1基因低表达且CD56表达阴性组(89.2%,P<0.01).结论 AML患者CD56抗原表达与MDR1基因表达水平存在相关性;同时定量检测MDR1基因表达及CD56抗原表达更有助于判断预后.     

BAALC转录本1－6－8逆转录病毒表达载体的构建

目的 构建含BAALC（brain and acute leukemia, cytoplasmic）1-6-8转录本的逆转录病毒表达载体。方法 从KASUMI-1细胞株中提取mRNA,应用RT-PCR技术扩增BAALC1-6-8获得目的基因,选用pMD? 18-T Vector做TA克隆。分别双酶切TA克隆获得的阳性质粒和pcDNA?3.1/myc-His A质粒,琼脂糖电泳纯化回收前者的小片段和后者的大片段,应用T4连接酶连接后转化至E.coli DH5α中。PCR扩增BAALC-myc-His基因序列,双酶切PCR产物和pLXSN载体,T4连接酶连接后转化至E.coli DH5α中,挑选阳性克隆,PCR、双酶切及测序鉴定。结果 PCR分别扩增TA克隆产物和重组pcDNA?3.1/myc-His A-BAALC,在535bp处均可见一清晰的特异性扩增条带,显示TA克隆及重组真核表达载体成功;PCR扩增pLXSN-BAALC-His大小为664bp,双酶切及测序结果证实目的基因片段正确插入到逆转录病毒表达载体pLXSN中。结论 分离得到了BAALC 1-6-8转录本基因,并成功构建了pLXSN-BAALC-His表达载体。     

注射用两性霉素B胆固醇硫酸酯复合物挽救治疗侵袭性真菌病的安全性和有效性

目的 评价注射用两性霉素B胆固醇硫酸酯复合物(ABCD)挽救治疗侵袭性真菌病(IFD)的安全性和有效性。方法 回顾性收集既往抗真菌治疗失败后在2021年4—8月间接受ABCD治疗的106例患者资料。统计患者基本信息、临床结局以及ABCD相关不良反应指标。结果 106例患者中,ABCD相关不良反应主要为输液反应,包括寒颤(60.4%)、发热(54.7%)和畏寒(11.3%)。不良反应多为1～2级。106例患者的ABCD挽救治疗有效率为85.8%(91例,95%CI:77.7%～91.9%)。其中,确诊/临床诊断IFD患者有效率为92.6%(25/27,95%CI:75.7%～99.1%),包括毛霉病(9例)、肺曲霉病(5例)、隐球菌性脑膜脑炎(5例)、马尔尼菲篮状菌病(3例)、肺念珠菌病(2例)患者治疗均有效,3例念珠菌血症患者中的1例治疗有效。7例既往接受过多烯类抗真菌药物治疗的确诊/临床诊断IFD患者挽救治疗均有效。此外,确诊/临床诊断IFD患者6周内均为生存状态。结论 ABCD治疗IFD安全可耐受,肾毒性较低,用于既往抗真菌治疗不耐受或无效患者仍可有效。     

PM2.5对大鼠肺泡巨噬细胞内NLRP3炎性小体表达及细胞凋亡的影响

目的:初步探讨大气细颗粒物(fine particulate matter,PM2.5)诱导大鼠肺泡巨噬细胞内NLRP3炎性小体活化及细胞凋亡的潜在分子机制.方法:采用中流量采样器收集PM2.5颗粒物,经超声提取制成混悬液,作用于大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)后,MTT法检测细胞存活率,Western blot检测Nod样受体蛋白3(NLRP3)、组织蛋白酶B(Cathepsin-B)及凋亡相关蛋白[Bax、Bcl-2及半胱天冬酶-3(Caspase-3)]的表达水平,ELISA检测PM2.5诱导的细胞上清液中半胱天冬酶-1(Caspase-1)、白介素(in-terleukin,IL)-18和IL-1β的含量.结果:随着PM2.5浓度的增加和刺激时间的延长,NR8383细胞存活率降低(24 h:F=17.253,P=0.000;48 h:F=18.678,P=0.000;72 h:F=256.104,P=-0.000);PM2.5诱导NR8383细胞内NLRP3 (F=437.166,P=0.000)和Cathep-sin-B(F=42.062,P=0.000)蛋白的表达上调;PM2.5上调细胞内促凋亡蛋白Bax(F=72.827,P=0.000)表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2(F=390.322,P=0.000)表达,下调Caspase-3(F=169.833,P=-0.000)蛋白的表达;PM2.5上调细胞培养液中Caspase-1(F=629.866,P=0.000)、IL-18(F=587.165,P=0.000)和IL-1β(F=68.472,P=0.000)的水平.结论:PM2.5可通过溶酶体模式诱导肺泡巨噬细胞内NLRP3炎性小体活化,促进IL-18和IL-1β分泌,并引起肺泡巨噬细胞发生凋亡.     

水蛭粉合微创术治疗高血压性脑出血40例

目的：观察水蛭粉合微创颅内血肿清除术（微创术）治疗高血压性脑出血的临床疗效。方法：将79例无凝血功能障碍的患者随机分为治疗组40例与对照组39例,2组均予内科常规治疗,治疗组加服水蛭粉并施以微创术。治疗3周后进行疗效评估。结果：血肿体积、神经功能缺损评分治疗前2组无明差异（P＜0.05）,治疗前后2组组内相比差异显著（P＜0.05）,治疗组改善优于对照组（P＜0.05）。结论：水蛭粉合微创术治疗高血压性脑出血疗效显著。     

成人急性淋巴细胞白血病患者骨髓ERG基因表达水平及其与预后的相关性

目的:探讨成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者ETS相关基因(ERG)的表达水平及其临床意义.方法:实时荧光定量PCR法检测91例初治成人ALL患者ERG的表达水平,并分析其与临床预后的关系.结果:91例ALL骨髓标本中ERG表达水平显著高于对照组,P<0.001.ALL患者ERG表达水平与就诊时外周血白细胞计数(WBC)、血红蛋白(HGB)、血小板计数(PLT)和血清乳酸脱氢酶(LDH)水平均无明显相关性,P均>0.05.B-ALL患者ERG表达水平与T-ALL组比较差异无统计学意义,P=0.547.BCR/ABL基因阳性ALL患者ERG表达水平与BCR/ABL阴性者比较差异无统计学意义,P=0.889.伴有髓系抗原表达组ALL患者与未伴有髓系抗原表达组之间ERG表达水平也差异无统计学意义,P=0.150.尽管ERG高表达ALL患者的CR率(72.7%)与低表达组(75.4%)比较差异无统计学意义,P=0.804,但ERG高表达ALL患者的复发率(62.5%)显著高于ERG低表达组(34.6%),P=0.047.ERG高表达ALL患者的总生存率显著低于ERG低表达组,P=0.016.结论:ERG高表达可能是ALL一个重要的预后不良因素,检测ALL患者ERG表达水平有助于判定预后,指导治疗.     

强化培门冬酶化学药物治疗方案降低成人费城染色体阴性ALL移植后复发

目的分析成人费城染色体阴性急性淋巴细胞白血病(ALL)移植后复发的影响因素。方法总结南方医科大学南方医院血液科2016年至2018年期间,接受异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的成人费城染色体阴性ALL患者移植前后临床资料,进行回顾性分析。65例费城染色体阴性成人ALL接受首次allo-HSCT的患者,男性37例,女性28例,年龄14～58岁,中位年龄25岁。结果中位随访27个月,2年的总存活(OS)率为78.8%(95%CI 67.8%～89.8%),2年的无复发生存(RFS)率为70.7%(95%CI 58.2%～83.2%);移植前化学药物治疗3～7疗程(中位数4疗程),培门冬酶中位剂量为3剂(2 000 IU/m2,每次1剂)。多因素分析发现,强化培门冬酶组(移植前化疗方案中培门冬酶剂量≥4剂)是移植后复发的保护性因素(HR=4.067,P=0.046),高危染色体核型是移植后复发的高危因素(HR=0.193,P=0.009)。生存分析显示,强化培门冬酶组(32例)2年RFS显著高于对照组(33例)(90.0%,95%CI 79.2%～100%和56.9%,95%CI ...     

方剂配伍增加中药方剂活性——一项来自毒理学的实验研究

[目的]比较不同制备方法对清热解毒方水煎剂毒性的影响。[方法]清热解毒方中各味药材分别制备成不同待测样品:合煎样品、分煎样品及单味药给药样品,采用简化机率法测定各样品对小鼠灌胃给药的半数致死量(LD50),并比较测定结果。[结果]所测得合煎样品和分煎样品的LD50分别为(91.26±7.92)g/kg和(111.47±9.12)g/kg,与合煎样品比较,分煎样品的毒性显著降低(P0.05),且动物死亡时间及死前表现不同。单味药样品给药后多未出现明显毒性反应。[结论]与单味中药比较,复方配伍确能提高中药的生物活性。