原发性醛固酮增多症患者术前术后胰岛B细胞功能变化的研究

目的 探讨原发性醛固酮增多症（简称“原醛症”）患者肾上腺腺瘤手术前后胰岛B细胞功能的变化。方法 北京协和医院内分泌科2004-2006年收治的17例原醛症患者，接受肾上腺腺瘤摘除术前后均进行标准的75g葡萄糖耐量试验，分析胰岛素抵抗指数，HOMA分泌功能指数、胰岛素曲线下面积（INSAUC）胰岛素和血糖增量之比（△I30／△G30）等指标的变化以及和血钾、血浆醛固酮的相关关系。结果 △I30／△G30在术后明显升高（P=0．01），按体重指数（BMI）≥25分层后肥胖或超重组术后△I30／△G30增加不明显（P=0．08）；术前低血钾的患者术后胰岛B细胞分泌功能明显改善，而术前血钾正常者改善不明显。手术前后INSAUC变化和空腹血钾正相关（r=0，71，P=0．01），和醛固酮水平的变化以及随访时间无明显相关。结论 原醛症患者肾上腺腺瘤摘除术后低血钾纠正，胰岛B细胞的分泌功能改善，其改善程度受术前血钾和体重的影响。     

牛肉中头孢喹肟残留的HPLC检测方法的研究

目的:利用高效液相色谱仪检测牛肉中头孢喹肟残留情况,分析残留水平,评估危害程度.方法:将试样经高氯酸钠缓冲液及乙腈混合提取,旋转蒸发后加水复溶,HLB固相萃取柱净化,流动相洗脱后经高效液相色谱法测定,并通过外标法完成定量.结果:头孢喹肟浓度在10～500 ng/mL的时候,同峰面积之间所呈的线性关系较佳,相关系数在0.9999以上.检测限为15 μg/kg,定量限为25 μg/kg.平均回收率为85.2％～95.1％(n=5)之间,批间相对标准偏差小于20％.结论:该方法具有重线性好、操作简便、准确度好的特点,可用于牛肉中头孢喹肟药物测定,本实验通过硫酸头孢喹肟多个浓度的考察,完成了对牛肉中头孢喹肟残留的液相色谱-紫外检测法的建立,其处理简单便捷,准确率高,可用于检测牛肉中头孢喹肟药物的残留量.     

活化淋巴细胞及其染色质诱导抗核抗体生成

目的诱导抗双链ＤＮＡ抗体和其它抗核抗体生成的免疫原是什么？迄今不明。本研究试图阐明不同原因活化的淋巴细胞是诱导抗核抗体生成的免疫原。方法用丝裂原（ＣｏｎＡ／ＬＰＳ）或ＩＬ－２活化淋巴细胞及其染色质免疫同系ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，用ＥＬＩＳＡ测定ＩｇＧ抗ｄｓＤＮＡ抗体，用免疫荧光法检测抗核抗体核型和免疫复合物沉积，用免疫印迹法测定抗Ｓｍ和抗ＲＮＰ等抗核抗体。结果上述原因活化的淋巴细胞及其活性染色质均能诱导抗双链ＤＮＡ抗体和其它抗核抗体生成，免疫小鼠的肾脏有显著的免疫复合物沉着。结论据本文结果推测活化淋巴细胞及其细胞核和染色质是诱发抗ｄｓＤＮＡ抗体和其它抗核抗体生成的免疫原。     

与TLRs通路相关的炎性反应因子在大肠癌中的表达及意义

目的 探讨与Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)通路相关的炎性反应因子在大肠癌中的临床意义.方法 收集56例大肠癌组织和36例结肠腺瘤组织,以癌旁正常肠黏膜组织为对照,应用免疫组织化学法检测TLR2、核因子κB(nuclear factor κB,NF-κB)及白细胞介素8(interleukin 8,IL-8)的表达情况,并分别找出与大肠癌临床病理特征的相关关系.结果 在大肠癌组织、癌旁正常组织及结肠腺瘤组织中TLR2蛋白的阳性表达率分别为71.4％、42.9％、58.3％,NF-κB的阳性率分别为78.6％、46.4％、83.3％,IL-8阳性率分别为75.0％、46.4％、72.2％,3种组织中的表达差异均具有统计学意义(均P＜0.05);大肠癌组织中NF-κB的表达与TLR2及IL-8密切相关(P＜0.05);此外,大肠癌组织中TLR2的表达与分化程度、有无淋巴结转移及TNM分期相关(P＜0.05),NF-κB及IL-8的表达与脉管受侵、有无淋巴结转移及TNM分期相关(P＜0.05).结论 TLRs通路介导的慢性炎性反应因子的高表达与大肠癌的临床病理特征密切相关,提示TLRs信号通路在大肠癌的发生、发展中有重要的作用.     

类固醇生成因子1和DAX-1在肾上腺皮质肿瘤中的表达及临床意义

目的 探讨类固醇生成因子1(SF-1)和DAX-1在肾上腺皮质肿瘤中的表达及其临床意义.方法 应用实时荧光定量PCR检测39例肾上腺皮质肿瘤:包括对血管紧张素Ⅱ无反应的醛固酮瘤(AⅡ-U-APA)12例、有反应的醛固酮瘤(AⅡ-R-APA)5例、分泌醛固酮的肾上腺皮质癌2例、皮质醇瘤10例、肾上腺无功能瘤10例及8例正常肾上腺皮质的SF-1、DAX-1、ACTH受体和内参β3-actin mRNA的表达.应用Western印迹检测SF-1和DAX-1蛋白在上述组织中的表达,比较不同组织中SF-1、DAX-1mRNA及蛋白表达的差异.对SF-1和DAX-1在肾上腺皮质肿瘤中的表达差异与患者的临床资料行相关性分析.结果 SF-1和DAX-1 mRNA及蛋白在正常肾上腺皮质、AⅡ-U-APA、AⅡ-R-APA、肾上腺皮质醛固酮癌、皮质醇瘤和无功能瘤中的表达存在差异[ SF-1 mRNA相对值:24.58±2.45、23.89±3.17、21.59±3.00、(38.75,44.16)、14.17±2.80和36.38±3.50; DAX-1 mRNA:0.57 ±0.06、0.37±0.05、0.43±0.05、(1.52,1.21)、0.39±0.04和0.83 ±0.08:SF-1蛋白:0.76±0.11、0.76±0.10、0.73±0.07、(1.24,1.40)、0.55±0.04和0.98±0.10:DAX-1蛋白:0.65±0.14、0.39±0.13、0.43±0.14、(1.18,1.02)、0.56±0.04和1.03±0.13;均P＜0.05或P＜0.01];AⅡ-U-APA组织中SF-1正常、DAX-1表达减低、SF-1/DAX-1比值增高且与醛固酮瘤的大小呈明显负相关；SF-1在皮质醇瘤中明显低表达,且与皮质醇瘤大小呈正相关；SF-1和DAX-1 mRNA及蛋白在肾上腺无功能皮质瘤中高表达、在肾上腺醛固酮分泌癌中表达有明显高于其他各组的趋势、而在嗜铬细胞瘤中无表达.结论 SF-1和DAX-1在不同肾上腺皮质肿瘤中表达各异,提示他们可能参与肾上腺皮质肿瘤的生长和激素分泌.     

血管内皮损伤与子痫前期

目前对子痫前期的研究发现,在患者血液循环中存在的某些因子参与介导母体血管功能障碍及血管内皮细胞损伤的发生。其中某些血管损伤的标志物可作为子痫前期发病的预测指标,指导临床早期诊断和早期治疗,防止该病发展到严重阶段,危及母儿安全。     

IFN-γ与肿瘤免疫逃避的研究进展

干扰素 (IFN γ)由T细胞产生 ,具有直接抑制肿瘤细胞增殖 ,增加表面MHC抗原和肿瘤坏死因子表达 ,抗肿瘤血管生成等多种抗肿瘤作用。近年来研究发现 ,IFN γ可以通过调控肿瘤细胞的Fas/FasL表达以及增强肿瘤细胞对Fas所介导凋亡途径的敏感性 ,使肿瘤细胞逃避免疫系统攻击的能力降低 ,从而抑制肿瘤细胞的恶性增殖。     

论著外周DDAVP兴奋试验在促肾上腺皮质激素依赖性库欣综合征鉴别诊断中的价值

目的 评价外周1-脱氨-8-精氨酸血管加压素(DDAVP)兴奋试验,在促肾上腺皮质激素(ACTH)依赖性库欣综合征鉴别诊断中的价值。方法 回顾性分析2012年1月至2013年6月在北京协和医院诊断明确的ACTH依赖性库欣综合征患者的临床资料,包括外周DDAVP兴奋试验、岩下窦静脉取血、鞍区MRI和手术病理的结果,评价外周DDAVP兴奋试验对诊断垂体ACTH腺瘤的敏感度和特异度。另收集10例文献报告的异位ACTH肿瘤患者资料,纳入统计分析。通过比较岩下窦静脉取血和外周DDAVP兴奋试验结果的差异,分析外周DDAVP兴奋试验中ACTH不升高的原因和此项检查的局限性。结果 (1)共纳入41例ACTH依赖性库欣综合征患者,其中28例为垂体ACTH腺瘤(简称库欣病),13例为异位分泌ACTH肿瘤。(2)如以ACTH升高到基础值1.5倍作为阳性反应标准,82%(23/28)库欣病和38%(5/13)的异位ACTH肿瘤患者可达到此反应。如以ACTH升高到基础值3倍为反应标准,50%(14/28)的库欣病患者达此标准,而异位ACTH肿瘤为0(0/13)。(3)有12例库欣病患者同时进行岩下窦静脉取血。其中7例外周DDAVP试验中ACTH水平未达到基础值的3倍,但岩下窦ACTH水平在DDAVP刺激后明显升高。结论 外周DDAVP兴奋试验有助于ACTH依赖性库欣综合征的鉴别诊断。ACTH升高幅度越大,越支持库欣病的诊断。如ACTH升高到基础值3倍以上,可确诊为库欣病。     

支气管肺类癌导致的异位ACTH综合征

目的通过对支气管肺类癌引起的异位ACTH综合征患者的临床资料分析,总结其临床特点,以提高对该病的认识和诊治水平。方法回顾性分析北京协和医院1984～2009年经病理证实的13例支气管肺类癌引起的异位ACTH综合征患者的临床资料。结果13例患者就诊时的平均年龄35．4岁,就诊时的病程为19．9±18．3个月（1．3～60个月）,从初诊至发现肺部占位的时间为15．6±36．1个月（1．0—132个月）。11例（84．6％）患者存在低血钾（2．60±0．61mmol／L）。4例（30．8％）患者大剂量地塞米松抑制试验不被抑制。11例（91．7％）患者初诊时进行了肺CT检查发现了肺部病变。肿瘤平均直径为2．1cm。结论支气管肺类癌是导致隐性异位ACTH综合征的常见原因,但在临床上有时与库欣病很难鉴别。因此对于ACTH依赖的库欣综合征应常规筛查肺部病变,对可疑病例进行全面检查以明确肿瘤定位。     

基因工程人干细胞因子原核表达、纯化及生物学活性研究

目的摸索一种适合于中试生产的重组人干细胞因子(recombinant human stem cellfactor,rhSCF)的发酵表达与纯化工艺.方法研究不同培养基和热诱导时间对rhSCF表达量影响;探索最佳纯化工艺和各因素对rhSCF得率和生物学活性的影响.结果rhSCF工程菌在含甘油、酪蛋白水解物、酵母浸出粉、胰蛋白胨及微量元素的培养基中表达量最高.灰度扫描显示热诱导后2 h开始表达,6 h表达量最高,目的蛋白约可达菌体总蛋白30%.高表达蛋白经复性后,可用酸沉淀作粗分离纯化,随后用阳离子交换层析分离,纯度达80%,经反相层析去除二聚体后,最后用DEAE柱浓缩后并经S200转换缓冲液,最终获得纯度＞95%和比活性＞6×105 U/mg的rhSCF制品.结论成功地建立了注射用rhSCF的中试生产工艺,为随后进行的临床前研究及临床试验奠定基础.