大黄素对豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动的影响及相关机制

目的:观察大黄素(emodin)对豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动的影响及相关机制.方法:用四道生理记录仪记录豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动;用膜片钳记录豚鼠胃窦环形肌细胞上L型钙电流,观察L型钙电流在大黄素增强豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动中的作用.结果:大黄素在一定的浓度范围内增强豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动并呈剂量依赖性,给予5、10、15、20、25、50mol/L的大黄素后豚鼠胃窦环形肌自发性收缩的幅度分别为对照组的108.2%±6.2%、150.6%±8.3%、198.2%±7.6%、200.2%±8.6%、160.0%±6.8%、81.2%±6.2%.预先加入10mol/L的硝苯地平,完全阻断大黄素增强豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动.10mol/L和20mol/L的大黄素明显增强豚鼠胃窦环形肌细胞上钡电流(IBa),用10mol/L的大黄素灌流开始后200s左右时IBa电流峰值变化趋于稳定,20mol/L的大黄素灌流开始后170s左右时IBa电流峰值变化趋于稳定.加药后IBa电流峰值分别增加到对照组电流最大值的137.88%±5.79%和158.69%±6.11%.结论:大黄素增强豚鼠胃窦环形肌自发性收缩,细胞外钙通过L型钙通道内流入细胞内引起平滑肌收缩是大黄素促进豚鼠胃窦环形肌自发性收缩的作用机制之一.     

糖化血红蛋白检测在糖尿病诊治中的临床价值

糖尿病是一种很常见的内分泌代谢疾病,其病因和发病机制尚未完全明确,然而它引起的并发症严重危害人们的身体健康.目前糖尿病已经成为威胁人类生命健康的第三大慢性病,不仅发病率高,且呈增长趋势,故糖尿病的早期发现和早期诊断刻不容缓.由于早期糖尿病起病隐匿,缺乏或无典型的临床症状,监测和控制血糖水平对糖尿病及其并发症的诊治非常关键.血糖检测容易受到药物、饮食、情绪等因素的影响[1],而且即时血糖的检测结果只能代表患者采样即时的血糖情况,仅通过监测即时血糖诊断糖尿病特别是治疗过程中监测患者的血糖值有很大的局限性,即时血糖水平用于筛查糖尿病可能会使相当一部分早期糖尿病患者漏诊[2].     

糖尿病患者血清GAD-Ab、ICA、IAA联合检测的临床意义

[目的 ]探讨糖尿病患者血清谷氨酸脱羧酶抗体 (GAD -Ab)、胰岛细胞抗体 (ICA)和胰岛素自身抗体 (IAA)的联合检测在临床中的重要意义。 [方法 ]用ELISA法测定 4 3例 1型糖尿病 (ID DM )患者、5 5例 2型糖尿病 (NIDDM )患者和 5 0例正常人血清中的GAD -Ab、ICA、IAA。 [结果 ]1型糖尿病组中GAD -Ab、ICA、IAA的阳性率分别为 76 .7%、37.2 %、2 5 .6 % ;2型糖尿病组中 3种抗体的阳性率分别为 9.1 %、1 0 .9%、1 0 .9% ;正常对照组中GAD -Ab、ICA、IAA均为阴性。 1型糖尿病患者的GAD -Ab、ICA、IAA阳性率都高于 2型糖尿病患者 (P <0 .0 5 )及正常对照组 (P<0 .0 5 )。 [结论 ](1 )测定GAD -Ab在糖尿病分型及预测中优于ICA和IAA。 (2 )GAD -Ab、ICA、IAA的联合检测是鉴别 1型糖尿病和 2型糖尿病的重要血清学指标。 (3)在预测 1型糖尿病发病及早期诊断中 ,GAD -Ab、ICA、IAA的联合检测可提高检出阳性率 ,避免漏诊 ,也提高了诊断的特异性及敏感性     

肝细胞生长因子对神经干细胞分化的影响

目的体外培养获得神经干细胞并初步研究重组人肝细胞生长因子(human recombinant hepatocyte growth factor,HGF)对神经干细胞(neutal steal cells,NSCs)分化能力的影响。方法从胚胎大鼠脑组织中分离得到神经干细胞,并行免疫荧光鉴定。检测不同浓度的HGF(5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、40ng/ml)对神经干细胞分化的影响。结果体外培养的神经干细胞球巢蛋白(nestin)表达阳性,由神经干细胞球分化的细胞神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)和胶质纤维酸性蛋白(galial fibrillary acidic protein,GFAP)表达阳性。并且不同浓度HGF作用下的神经元细胞分化率不同。结论HGF对NSCs分化及较长时间存活具有重要作用,20ng/ml的HGF可以促进较好的分化效果。     

慢性淋巴细胞白血病免疫表型及凋亡相关蛋白分析

目的 探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)免疫表型和凋亡相关蛋白表达特征及其临床意义.方法 应用CD45/SSC设门方案,通过三色流式细胞术对150例CLL患者、105例急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者骨髓或外周血进行免疫分型.结果 150例CLL患者均高表达CD19;HLA-DR、CD20、CD5、CD22、CD38、CD23阳性率依次为96.67％、95.33％、84.67％、86.67％、40.67％、60.66％;CD10、cCD79a、CD3、CD25、CD34、ZAP70、FMC7阳性率较低,依次为3.33％、15.33％、4.67％、1.33％、3.33％、11.43％、8.67％.其他抗体均无表达;与B-ALL患者相比,CLL患者CD5、CD20阳性率升高(P＜0.05),CD10、CD34、CD22、Ccd79a阳性率降低(P＜0.05),CD19、HLA-DR表达率无统计学差异(P＞0.05).CLL患者凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax阳性率分别为74.67％和7.33％.结论 CD5、CD20、CD19是CLL特异性免疫表型,ZAP70、CD38可作为预后判断指标,CLL细胞Bcl-2高表达、Bax低表达,在疾病发生、发展中意义重大.     

雄黄对人结肠癌LoVo细胞生长及凋亡的作用

 目的 研究雄黄对结肠癌LoVo细胞生长及凋亡的调控作用及其机制。方法 用雄黄作用于体外培养的人结肠癌LoVo细胞，分别用细胞计数和MTT（四甲基偶氮唑蓝）比色法分析其对LoVo细胞生长的抑制作用，采用流式细胞仪测定细胞周期分布和凋亡率，用光镜观察细胞形态。结果 雄黄在（2.5～160.0）μg／ml质量浓度范围内呈剂量依赖方式抑制结肠癌LoVo细胞生长（P＜0.05），雄黄（12.5～50.0）μg／ml作用24 h后，光镜可见LoVo细胞呈典型的凋亡形态学改变；流式细胞仪检测出现凋亡峰，其测得的细胞凋亡率与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 雄黄对人结肠癌LoVo细胞生长具有抑制作用，其机制与诱导肿瘤细胞凋亡有关，对细胞周期的影响表现为G2／M阻滞。     

流式细胞术检测急性白血病P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白及bcl-2的临床意义

目的 研究急性白血病(AL)患者的P-糖蛋白(p170)、多药耐药相关蛋白(MRP)及bcl-2三种相关蛋白的表达情况,探讨其在AL患者多药耐药中的作用及相互关系.方法 AL患者44例,其中急性非淋巴细胞白血病(ANLL)29例,急性淋巴细胞白血病(ALL)15例,采用不同的化疗方案分别进行2个疗程的标准剂量化疗,按照治疗效果分为完全缓解(CR)组和诱导缓解失败(NR)组.选用12例同期就诊的健康人及良性血液病患者为对照,采用流式细胞术分别测定其p170、MRP、bcl-2的表达情况.结果 AL患者p170、MRP、bcl-2蛋白的表达均显著高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).p170和MRP表达在各型白血病中CR组均低于NR组;NR组24例中22例至少有一或二种蛋白表达增高,且表达具有一定的一致性(P＜0.01).bcl-2的高表达与治疗反应差有关,CR组患者的bcl-2表达明显低于NR组(P＜0.05).结论 p170、MRP、bcl-2均与AL多药耐药的发生有关,是导致预后不良的重要因素.提示bcl-2导致耐药的机制不同于经典的p170途径.     

谷氨酸信号通路在人外周血淋巴细胞活化及白癜风免疫发病机制中的作用

目的 探讨谷氨酸信号通路在人外周血淋巴细胞活化及白癜风免疫发病机制中的作用。方法 流式细胞仪测定离子型谷氨酸受体NMDAR的非竞争性拮抗剂MK801对健康对照外周血淋巴细胞CD25表达及IFN-γ水平的影响;NMDAR的激动剂NMDA和拮抗剂MK801对淋巴细胞内活性氧簇水平的影响。实时定量PCR和流式细胞仪测定白癜风患者和健康对照外周血淋巴细胞中NMDAR亚型NMDAR1和NMDAR2A表达差异。免疫组化方法观察白癜风患者皮损和健康对照皮肤组织中NMDAR1和NMDAR2A的表达。结果 MK801组外周血淋巴细胞CD25表达（7.28 ± 0.18）%较阴性对照组（16.02 ± 0.42）%明显下降（P < 0.01）;MK801组淋巴细胞中CD25+ IFN-γ+ 比例（1.79 ± 0.09）%较阴性对照组（0.78 ± 0.06）%明显增高（P < 0.01）。NMDA组淋巴细胞内ROS水平（101.1 ± 3.50）明显高于阴性对照组（69.80 ± 2.08）（P < 0.01）。白癜风患者外周血淋巴细胞NMDAR1的表达（3.85 ± 2.17）较健康组（0.97 ± 0.55）明显增高（P < 0.05）。结论 谷氨酸信号通路对活化淋巴细胞的IFN-γ分泌及ROS水平的影响有可能是白癜风的免疫发病机制之一。     

谷氨酸信号通路对黑素细胞树突形态的调节作用

[目的]探讨谷氨酸信号通路在黑素细胞中的作用机制.[方法]培养人原代黑素细胞.采用多巴染色法及透射电镜鉴定细胞;以Western Blot方法测定人原代黑素细胞内NMDAR2A的表达.采用扫描电镜观察谷氨酸受体激动剂N-Methyl-D-aspartic acid(NMDA),Quisqualate(Q-LA)和非竞争性拮抗剂MK-801作用下黑素细胞树突形态的变化.[结果]Western Blot实验发现人原代黑素细胞内有NMDAR2A蛋白的表达.扫描电镜观察发现谷氨酸受体激动剂NMDA及Q-LA作用后细胞树突长度明显变短,树突末端明显变宽,二、三级树突增加;谷氨酸受体拮抗剂MK801作用后细胞树突末端明显变窄,二、三级树突减少.[结论]除神经系统外,黑素细胞内存在谷氨酸信号通路,且该信号通路与细胞形态有关.     

抗核糖体P蛋白在神经精神病性系统性红斑狼疮的临床诊断价值

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythemato-是可累及全身任何脏器的自身免疫性疾病,侵犯中枢神经系统可表现为各种各样的神经、精神症状,此类型患者被称作神经精神病性系统性红斑狼疮（neuropsychiatric SLE, NPSLE）,是SLE病情严重的表现,也是导致SLE患者死亡的主要原因之一,约17％-75％的SLE患者在病程中出现中枢或周围神经系统受累,所以早期发现系统性红斑狼疮的神经精神病损尤为关键。本研究利用ELISA监测SLE患者Rib—P,探讨Rib-P蛋白抗体对早期发现SLE神经狼疮的诊断价值。