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小鼠骨髓间充质干细胞移植异体睾丸的研究 总被引:4,自引:1,他引:3
目的:研究小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)移植异体睾丸。方法:①分离5~6周龄的BALB/c小鼠胫骨、股骨,冲出骨髓,用Percoll密度梯度离心法和贴壁法分离、培养、纯化MSCs。②取第3代MSCs,用Hoe-chest33342标记并观察,制备细胞悬液。③用睾丸网注射法将标记的MSCs移植入异体小鼠睾丸内,于各时相点取睾丸组织,在3个位点连续制作快速冰冻切片,镜下观察。结果:①传至3代即可得到数量较多的纯化的MSCs。②在荧光显微镜下,标记的MSCs细胞核呈亮黄色。③用睾丸网注射法行小鼠MSCs移植异体睾丸成功,未见免疫排斥反应发生。移植后1、3d,只在中间的切片上见到MSCs,细胞核呈亮黄色,两侧的切片未查到MSCs,移植后1d细胞较集中,移植后3d细胞散在分布;移植后6、9、12d,3个位点的切片均见MSCs,部分MSCs排列呈管状;移植后15、18d,MSCs的核荧光有所减弱;移植后21d,荧光消失。结论:用睾丸网注射法将小鼠MSCs移植异体睾丸获得成功,未见免疫排斥反应发生,移植后的MSCs存活。 相似文献
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目的 观察碘过量(high iodine,HI)和多聚肌苷酸-聚胞苷酸[Polyinosinic-Polycytidylic acid,Poly (I:C),Poly]及甲状腺球蛋白(Thyroglobulin,TG)诱发小鼠甲状腺炎对Toll样受体3(Toll-like receptor 3,TLR3)表达的影响,探讨TLR3在自身免疫性甲状腺炎发病中的作用.方法 NOD(Non-obese diabetic)小鼠42只,体质量(20±3)g.按体质量将小鼠随机分为6组:对照组、HI组、Poly组、TG组、HI+TG组、HI+Poly组,每组7只.对照组:饮用去离子水,腹腔注射生理盐水0.1 ml,每天1次,连续1周,在处死小鼠前1周隔日1次,同样剂量生理盐水再注射3次;HI组:饮用0.05%的碘化钠去离子水,腹腔注射生理盐水(同对照组);Poly 组:饮用去离子水,腹腔注射0.1 ml Poly(1 g/L,按5 mg/kg体质量),每天1次,连续1周,处死前1周隔日1次,同剂量Poly再注射3次;TG组:饮去离子水,腹腔注射生理盐水(同对照组),皮下免疫猪TG 0.1 mg,在喂养第4、8周时分别再加强免疫1次,剂量减半;HI+Poly组:给药方法同HI组和Poly组;HI+TG组:给药方法同HI组和TG组.喂养8周后处死小鼠,取出甲状腺组织,冰冻切片、常规HE染色,光镜下观察小鼠甲状腺组织形态学变化:根据甲状腺组织炎细胞浸润数量及浸润范围、滤泡破坏范围等进行炎症程度分级;应用TLR3抗体对甲状腺切片进行免疫荧光染色,荧光显微镜下观察TLR3的表达,体视学分析甲状腺TLR3阳性细胞数密度变化.结果光镜下,Poly组甲状腺未见炎细胞浸润,HI组和TG组小鼠甲状腺都有不同程度的炎细胞浸润,HI+TG组和HI+Poly组甲状腺炎症细胞浸润和甲状腺滤泡破坏严重,炎症分级均在"++"以上.免疫荧光显示.HI组和Poly组的甲状腺滤泡上皮细胞可见到TLR3表达,在HI组和HI+Poly组炎症区域出现TLR3表达强阳性的炎症细胞.体视学分析甲状腺TLR3阳性细胞数密度,对照组、HI组、Poly组、TG组、HI+TG组、HI+Poly组组间比较差异有统计学意义(F=7.870,P<0.01);与对照组[(0.062±0.025)mm2]比较,HI+Poly组[(9.287±0.522)mm2]增加最为显著(P<0.01),而且HI+Poly组高于HI组[(2.570±0.257)mm2]和Poly组[(1.361±0.148)mm2,P均<0.01],HI+TG组[(4.843±0.405)mm2]高于HI组和TG组[(1.601±0.268)mm2,P均<0.01].结论 HI和TG免疫可诱发NOD鼠发生甲状腺炎,并刺激甲状腺滤泡上皮表达TLR3,Poly加重了HI诱发的NOD鼠甲状腺炎的病理变化过程;浸润的炎症细胞中亦有TLR3强阳性的细胞,提示TLR3途径参与了自身免疫性甲状腺炎的发病过程. 相似文献
45.
滋肾育胎丸为岭南名优中成药,上市40余年,临床广泛用于先兆流产、复发性流产。通过现代科学技术及前瞻性、大样本、多中心、随机双盲对照临床研究证实了滋肾育胎丸能够提高辅助生殖技术的胚胎种植率、临床妊娠率、活产率,改善卵巢储备功能和子宫内膜容受性,科学地验证了滋肾育胎丸在辅助生殖、卵巢储备功能下降的良好疗效和安全性,拓展了滋肾育胎丸原有的功能主治,创新性地开发了其临床新应用。对标《中成药创新内涵专家共识》,滋肾育胎丸具备中成药创新内涵特征。本文就滋肾育胎丸临床应用研究新进展和循证医学证据进行综述,以期为临床提供有价值的参考。 相似文献
46.
47.
目的探讨体外受精-胚胎移植(in vitrofertilization-embryo transfer,IVF-ET)过程中胚胎培养液中氨基酸浓度与选择性单胚胎移植妊娠结局的关系。方法 50例接受选择性单胚胎移植患者,收集胚胎移植当日的胚胎培养液50份,根据妊娠结局分为妊娠组与未妊娠组,采用高效液相色谱法检测培养液中20种氨基酸含量,分析培养液中氨基酸浓度与选择性单胚胎移植后妊娠结局的关系。结果临床妊娠者17例,妊娠成功率为34.00%;妊娠组胚胎培养液中甘氨酸和丙氨酸浓度((67.5±8.9)、(62.0(15.0,83.6)μmol/L)明显低于未妊娠组((85.7±65.0)、(93.2(21.2,124.3)μmol/L),差异均有统计学意义(P〈0.05);校正混杂因素后,胚胎培养液中甘氨酸(OR=0.980,95%CI:0.970-0.990,P=0.025)和丙氨酸(OR=0.990,95%CI:0.980-1.000,P=0.018)浓度与妊娠结局呈负相关。结论胚胎培养液中甘氨酸和丙氨酸浓度与选择性单胚胎移植是否妊娠有关;2种氨基酸浓度较低时妊娠成功率较大。 相似文献
48.
检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)在子宫腺肌病中的免疫组化定位和表达,探讨TNF-α在子宫腺肌病发生中的临床意义。方法采用SABC免疫组化技术观察子宫腺肌病(33例)标本中TNF-α的组织定位和表达,并按照其染色强度进行统计学分析。结果子宫腺肌病中存在TNF-α的表达;TNF-α在原位子宫内膜中的表达强度,分泌期高于增生期,并且呈周期性变化;TNF-α在异位子宫内膜中的表达强度分别高于原位子宫内膜和正常子宫内膜,但是异位子宫内膜和子宫肌层中表达无周期性变化。结论TNF-α在异位子宫内膜中的高表达提示子宫腺肌病的发生发展受卵巢激素和多种细胞因子的调节。 相似文献
49.
目的:探讨体外受精/卵胞质内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)周期中hCG注射次日血清雌二醇(E2)水平较hCG注射日的增幅对超促排卵临床结局的预测价值。方法:回顾性分析362例行黄体中期长方案IVF/ICSI-ET患者的临床资料。hCG注射次日E2增幅=(hCG注射次日血清E2水平-hCG注射日E2水平)/hCG注射日E2水平×100%。根据增幅的不同分成4组:A组增幅20%,B组增幅为0.1%~20%间,C组为-20%~0%间,D组增幅-20%。分析4组患者基本临床资料、超促排卵情况以及临床结局各项指标。结果:各组患者的取卵年龄、不孕年限、基础FSH(bFSH)值、降调节剂量、rFSH天数、hCG用量、hCG注射日LH值、2原核(2PN)胚胎数、优质胚胎数、冷冻胚胎数各组间差异均无统计学意义。各组患者的Gn启动剂量、Gn总用量、hCG注射日P值差异均有统计学意义(P0.05),且各值随着E2增幅的降低逐渐升高。A组的临床妊娠率(56.30%)显著高于B、C、D组(40.27%、42.85%和20.00%),差异有统计学意义(P0.05)。A组的胚胎种植率(33.86%)虽高于B、C、D组(26.23%、28.65%和16.67%),但差异无统计学意义(P0.05)。结论:监测黄体中期长方案垂体降调节IVF/ICSI-ET患者hCG注射次日E2增幅水平对临床结局有预测意义,E2水平在hCG注射次日较hCG注射日增幅高达20%以上时,临床结局较好。 相似文献
50.
目的 了解上海某地区泌尿生殖道衣原体属和支原体属与脲支原体属的感染情况及耐药情况.方法 对1464例泌尿生殖道感染者标本进行衣原体属抗原鉴定、支原体属和脲支原体属培养、鉴定和药敏试验.结果 衣原体属、支原体属、脲支原体属总检出率为49.3%,其中单纯沙眼衣原体(Ct)阳性率6.4%,单纯解脲脲支原体(Uu)为28.7%,人支原体(Mh)为2.3%,Uu+Mh为7.9%;衣原体属的感染率低于支原体属和脲支原体属,女性衣原体属、支原体属、脲支原体属的感染率高于男性;支原体属对米诺环素和多西环素最敏感,Uu分别为96.4%和95.5%,Mh分别为66.7%和69.7%,Ct+Uu分别为92.7%和90.2%,Uu+Mh分别为80.9%和79.1%;耐药性最高的抗菌药物为环丙沙星、诺氟沙星和大观霉素.结论 该地区支原体属和脲支原体属感染率要高于衣原体属感染率,且以Uu为主,女性高于男性;与Uu相比,Mh和Uu+Mh感染后抗菌药物的敏感率有下降的趋势,耐药性有升高的趋势,治疗泌尿生殖道支原体属感染的首选抗菌药物为四环素类米诺环素和多西环素. 相似文献