Survivin-siRNA对前列腺癌DU145细胞的促凋亡作用

目的:探讨survivin-siRNA对前列腺癌细胞株DU145的促凋亡作用。方法:构建针对survivin的siRNA表达载体pSi-sur,与脂质体和scramble-siRNA(pSi-scrambled)对照组分别转染前列腺癌细胞DU145后,利用半定量RT-PCR和Western blotting分别检测细胞survivin mRNA及蛋白表达水平;吖啶橙染色、Annexin V-FITC流式细胞术和TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:转染72 h后,实验组细胞的survivin mRNA水平是脂质体组的0.28±0.07(n=3),蛋白表达水平是脂质体组的0.34±0.05(n=3),与对照组比较,差异显著(P0.05);吖啶橙染色、Annexin V-FITC和TUNEL法均观察到实验组细胞呈现明显的凋亡现象。结论:利用survivin-siRNA可明显抑制前列腺癌细胞DU145 survivin基因和蛋白表达,并诱导细胞凋亡,结果为进一步进行动物体内研究奠定了基础。     

白细胞介素-17A及其受体与巨噬细胞在肠癌、肠炎和肠息肉组织中表达及意义

目的探讨白细胞介素(IL)-17A及其受体(R)A与巨噬细胞在肠炎、肠息肉及肠癌组织中表达及意义。方法应用免疫组织化学染色法分别检测15例肠炎、6例肠息肉及30例肠癌标本中IL-17A、IL-17RA表达情况及巨噬细胞浸润情况。结果IL-17A主要表达于腺细胞,单个核细胞和血管内皮细胞,也可见于部分癌细胞,IL-17A在肠炎和肠息肉表达明显高于肠癌组织(P<0.05)。IL-17RA主要表达于腺上皮,单个核细胞和血管内皮细胞,也可见于部分癌细胞,与肠癌表达相比,在肠炎及息肉中表达明显增高(P<0.05)。IL-17A及IL-17RA在肠癌中表达呈正相关(r=0.844,P=0.001)。巨噬细胞主要浸润在间质,其在肠炎、肠息肉和肠癌组织中阳性浸润密度三者之间无统计学差异(P>0.05)。肠癌组织内IL-17A及IL-17RA阳性表达与巨噬细胞的浸润明显正相关(均P<0.05)。结论 IL-17A及IL-17RA可能主要由巨噬细胞分泌,与肠癌的发生发展关系密切。     

自体组织"桥"式修复术与传统阴道后壁修补术治疗阴道后壁膨出的比较

目的比较自体组织"桥"式修复术与传统阴道后壁修补术治疗阴道后壁膨出临床效果。方法对照比较南京医科大学附属南京第一医院妇产科1995年6月至2004年5月间32例行传统阴道后壁修补术和2004年6月至2006年6月间36例行自体组织"桥"式修复术治疗阴道后壁膨出的患者,比较分析两组的年龄、阴道后壁膨出分度、术中出血量、手术并发症、手术时间以及随访近远期复发情况。结果桥式修复缝合时间(12.45±3.65)min,术中出血量(44.67±5.88)mL,无手术并发症。传统术式缝合时间(30.22±2.34)min,术中出血量(45.43±5.95)mL,术中肠管损伤3例、阴道后壁、直肠阴道瘘各1例。两组手术并发症、手术时间和术后复发情况差异均有统计学意义(P<0.05),术中出血量两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论自体组织"桥"式修复术简便易行,体现了自体移植的优势,临床效果优于传统修复术,且效果肯定。     

Survivin-siRNA真核重组质粒的构建和鉴定及其对前列腺癌DU145细胞的影响

目的 应用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对凋亡抑制因子survivin的siRNA,并检测其对DU145细胞株内源性survivin基因和蛋白表达的影响.方法 构建重组质粒shRNA-sur1和-sur2并分别转染 DU145细胞株,通过半定量 RT-PCR和Western印迹检测survivin mRNA转录水平和蛋白表达的变化.结果 成功构建针对survivin干扰的两种真核表达质粒;两种重组质粒shRNA-sur1和-sur2均能明显抑制内源性survivin基因表达,其抑制率分别为72%±8%和77%±5%;两种质粒均能明显抑制survivin蛋白的表达,其抑制率分别为75%±8%和80%±6%.结论 重组质粒shRNA-sur1和-sur2均可明显抑制DU145细胞内源survivin 蛋白表达和mRNA转录,为survivin介导的肿瘤基因沉默提供良好的基础.     

TCT和DNA倍体分析在子宫良性疾病术前检查中的临床价值

目的:探讨液基细胞学检查(TCT)技术和DNA倍体分析系统在子宫良性肿瘤术前检查中的临床价值及其重要性。方法:回顾性总结子宫良性病变158例患者,术前行宫颈脱落细胞TCT和DNA倍体分析,以术后病理诊断为标准,计算两种方法对宫颈病变的检出阳性率。结果:DNA倍体分析中见异倍体的50例,阳性检出率为76.0%(38/50);TCT检测阳性者98例,CIN和宫颈癌49例,阳性检出率为50%(49/98)。结论:对于子宫良性病变需行全子宫切除术的患者,应以TCT检查和DNA倍体分析相结合的方法常规筛查,以提高宫颈病变检出率,确定手术方案。     

子宫动脉栓塞术治疗子宫肌瘤50例

目的 探讨子宫动脉拴塞术治疗子宫肌瘤的临床应用效果及其相关并发症的防治.方法 对50例子宫肌瘤患者采用Seldinger技术行双侧子宫动脉插管,造影确认后注入栓塞剂,阻断血供.结果 50例随访3-6个月,显效72%(36/50),有效20%(10/50),无效8%(4/50),总有效率92%.所有病例无严重并发症发生.结论 子宫动脉栓塞术治疗子宫肌瘤安全、有效,是一种创伤小,恢复快,并发症少的好方法.     

过表达程序性细胞死亡基因5 提高脑神经胶质瘤细胞对替莫唑胺的化疗敏感性

[摘要] 目的：探讨抑癌基因程序性细胞死亡基因5（programmed cell death 5 gene, PDCD5）对脑神经胶质瘤细胞增殖及替莫唑胺（temozolomide，TMZ）化疗敏感性的影响。方法：收集吉林大学第一临床医院神经外科2009 年1 月至2014 年12 月间收治的脑神经胶质瘤患者116 例。分别利用qPCR、WB及免疫组化方法检测神经胶质瘤细胞系U87、U251、稳定克隆U87-PDCD5 细胞、转染si-PDCD5 后的脑胶质瘤细胞以及原发性神经胶质瘤组织中PDCD5 mRNA及蛋白质的表达情况。MTT法检测过表达或敲降PDCD5 对胶质瘤细胞生长及TMZ化疗敏感性的影响。建立脑胶质瘤细胞系U87 裸鼠皮下荷瘤模型，随机分为对照组、TMZ组、PDCD5 组和TMZ+外源性PDCD5 重组表达载体联合组，治疗20 d 后断颈处死动物，切取瘤组织，测量瘤体积并称瘤质量。采用qPCR、WB 法检测移植瘤组织中PDCD5 的表达水平，分析PDCD5 联合TMZ 治疗对脑神经胶质瘤生长的影响。结果：PDCD5 mRNA和蛋白在U87 细胞中的相对表达量明显低于在U251 细胞中的相对表达量（均P<0.05）；在高级别脑神经胶质瘤组织中，PDCD5 mRNA和蛋白的表达明显低于低级别组织（均P<0.05）；U87-PDCD5 和U251 细胞对TMZ的敏感性均高于U87 细胞（均P<0.05），U87-PDCD5-siRNA、U251-siRNA 组细胞对TMZ的敏感性均明显低于对照组（均P<0.05）。比较裸鼠移植瘤的瘤体积和质量，对照组>TMZ组>PDCD5 组>联合组（均P<0.05）；各组移植瘤组织内PDCD5 mRNA及蛋白的表达水平趋势与之相反（均P<0.05）。结论：PDCD5 过表达可增强脑神经胶质瘤细胞对TMZ的化疗敏感性，而沉默PDCD5 表达作用则相反，PDCD5 与TMZ联合应用可更好地抑制脑神经胶质瘤裸鼠移植瘤的生长。     

二氧化碳激光治疗外阴白色病变 15例疗效观察

目的观察二氧化碳激光治疗外阴白色病变的临床疗效。方法选取 2016年 5月至 2017年 5月南京医科大学附属南京医院门诊外阴白色病变病人 34例,单双号法分组, 15例为激光组,采用二氧化碳激光治疗,余 19例为超声组,采用超声聚焦治疗。从治疗前后瘙痒评分、疗效评分、术后并发症发生、治疗满意度调查等情况进行比较。结果两组病人治疗后均取得较好疗效。治疗后瘙痒评分超声组为( 1.11±0.88)分,而激光组为( 1.13±0.83)分,两组比较, t＝0.244,P＝0.80。激光组显效 4例,好转 11例,超声组显效 6例,好转 13例,两组比较, Uc＝135.5,P＝0.811。超声组 5例术后出现水泡,激光组的满意度高于超声组。结论二氧化碳激光治疗外阴白色病变副作用轻;治疗剂量易掌握,安全性高;疗效肯定,病人依从性好。     

miR-423-5p调控PDCD5表达增强神经胶质瘤细胞替莫唑胺耐药性

目的：探讨miR-423-5p在人脑神经胶质瘤组织和细胞中的表达及其调控程序性细胞死亡蛋白5（programmed cell death protein 5,PDCD5）增强胶质瘤细胞对替莫唑胺（temozolomide,TMZ）的耐药性。方法：收集2017年1月至2018年12月北 华大学附属医院神经外科手术切除的20例脑神经胶质瘤患者的瘤及瘤旁组织标本,以及胶质瘤细胞系U251、 U87、SHG-44和人 脑小胶质细胞株HMC-3, 用qPCR法检测胶质瘤组织及细胞系中miR-423-5p和PDCD5的表达水平。用合成的miR-423-5p mimics 和miR-NC分别转染U251和U87细胞,同时用不同浓度（50、100、150和200 μmol/L）的TMZ处理细胞,检测转染细胞对TMZ的 耐药性,用MTT法、克隆形成实验检测转染细胞的增殖活力,用Western blotting检测U251、 U87细胞中c-caspase 3、Bcl-2和 PDCD5蛋白的表达。用双荧光素酶报告基因实验验证 miR-423-5p 与 PDCD5 的靶向关系。结果：miR-423-5p 在脑神经胶质 瘤组织和胶质瘤细胞系中均高表达（均P<0.01）。与miR-NC组比较,miR-423-5p mimics组U251和U87细胞的增殖能力明显增 强（均P<0.01）, 对TMZ的耐药性增强。双荧光素酶报告基因实验证实miR-423-5p可与PDCD5 3'' UTR结合,抑制PDCD5的表 达。结论：miR-423-5p高表达增强胶质瘤细胞对TMZ的耐药能力,其可作为临床胶质瘤治疗的潜在新靶点。