Survivin-siRNA真核重组质粒对前列腺癌移植瘤的抑制作用

 目的：探讨survivin-siRNA真核重组质粒对前列腺癌移植瘤的抑瘤效应,并分析相关机制。方法：体外培养前列腺癌DU145细胞,将细胞注射到裸鼠背部皮下,待移植瘤直径达到8 mm时将瘤无菌取出,分成直径约2 mm的瘤块,手术植入另外的裸鼠皮下,将survivin-siRNA质粒或scrambled siRNA对照质粒电转染进行治疗,描记移植瘤生长曲线,并计算抑制率;通过HE染色、免疫组化染色及TUNEL染色观察survivin-siRNA对移植瘤影响。结果：成功构建裸鼠前列腺癌移植瘤模型。与mock和scrambled siRNA组相比,survivin-siRNA抑瘤率分别为两对照组的61.81%和62.87%;免疫组织化学染色发现：survivin-siRNA质粒明显抑制细胞内survivin表达;TUNEL染色证实治疗组肿瘤细胞凋亡明显增加。结论：重组质粒survivin-siRNA明显抑制DU145细胞移植瘤的生长,抑制内源性 survivin 蛋白的表达并促进细胞凋亡,针对survivin靶点的基因治疗前景广阔。     

survivin和GRIM-19在前列腺癌组织中的表达

目的:探讨survivin和GRIM-19在前列腺癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组化、RT-PCR和Western印迹法检测survivin和GRIM-19在正常前列腺(NP)组织、良性前列腺增生(BPH)组织和前列腺癌(PCa)组织中的表达情况。结果:免疫组化结果显示survivin在NP、BPH和PCa组织中的表达率分别为6.25%、18.18%和90.62%(P<0.01);GRIM-19的表达率分别为87.50%、81.82%和9.37%(P<0.01)。半定量RT-PCR结果显示,在NP和BPH组织未检测到survivinmRNA表达,而PCa组织可检测到survivinmRNA高表达。Western印迹结果证实,在NP和BPH组织中有微量的survivin蛋白表达;而PCa组织可检测到survivin蛋白高表达;在NP和BPH组织中GRIM-19蛋白表达强阳性,而PCa组织中只有微量表达,两者比较差异均有显著性(P<0.01)。结论:survivin和GRIM-19的表达可能与PCa的发生密切相关。     

siRNA-survivin与GRIM-19共表达质粒的构建及其对前列腺癌DU145细胞生长的抑制作用

目的: 构建siRNA-survivin与GRIM-19共表达质粒pGRIM-19-si-survivin并鉴定,观察pGRIM-19-si-survivin质粒对人前列腺癌DU145细胞survivin和GRIM-19 mRNA表达水平及细胞增殖能力的影响。方法:根据前期工作,利用基因重组技术构建siRNA-survivin与GRIM-19共表达质粒,将成功构建的pGRIM-19-si-survivin质粒转染人前列腺癌DU145细胞株,应用半定量RT-PCR方法检测细胞内survivin和GRIM-19 mRNA表达水平,应用MTT法观察其对细胞增殖能力的影响。结果:(1)应用酶切及质粒测序法鉴定,证明成功构建siRNA-survivin与GRIM-19共表达质粒。(2)与mock组比较,psi-survivin、pGRIM-19及pGRIM-19-si-survivin组survivin mRNA表达水平分别为0.55±0.05、0.62±0.08和0.35±0.05,差异显著(P<0.01);与psi-survivin和pGRIM-19组比较,pGRIM-19-si-survivin的抑制survivin表达作用明显增强(P<0.05);psi-survivin、pGRIM-19和pGRIM-19-si-survivin组GRIM-19表达增强,分别为mock组的1.93±0.14、2.57±0.20 和4.12±0.21(P<0.01),与pGRIM-19组比较,pGRIM-19-si-survivin增强GRIM-19表达作用更明显(P<0.05)。(3)转染48 h后,与mock组比较,psi-survivin、pGRIM-19和pGRIM-19-si-survivin 3组细胞增殖率分别为58.0%±7.2%、62.1%±6.1%和50.2%±4.8%,差异显著(P<0.05);转染72 h后,与mock组比较,3组细胞增殖率分别为43.4%±4.3%、51.3%±6.7%和26.8%±7.1%,差异明显(P<0.05,P<0.01);与psi-survivin和pGRIM-19组比较,pGRIM-19-si-survivin抑制作用明显增强(P<0.05)。结论:成功构建siRNA-survivin和GRIM-19共表达质粒pGRIM-19-si-survivin;该质粒抑制survivin表达并增强GRIM-19表达,对前列腺癌DU145细胞具有协同增殖抑制效应。     

IL-6 和 VEGF 在宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨IL-6在宫颈癌组织中表达的临床意义及其与VEGF的关系。方法：选择45例宫颈癌患者作为研究对象，另外同期选取23例因子宫肌瘤合并慢性宫颈炎行子宫全切的患者及20例因宫颈上皮内瘤样病变（CIN）行手术治疗患者的术后常规蜡块作为对照，采用免疫组织化学方法研究IL-6和VEGF在上述组织中的表达和临床意义探讨。结果：通过免疫组化法，IL-6和VEGF在宫颈癌和CIN组织中主要表达于癌细胞和异型细胞的胞膜和（或）胞质，IL-6在炎症宫颈组织中主要表达于上皮基底层细胞和上皮细胞的胞膜和（或）胞质。IL-6在炎症宫颈、CIN和宫颈癌中的阳性表达率分别为21．7％、55．O％和84．4％，阳性表达率显著升高（P〈0．05或P〈0．001）。VEGF在炎症宫颈、CIN和宫颈癌中阳性表达率分别为0％、50％和80％，阳性表达率也显著升高（P〈0．05或P〈0．01）。IL-6的表达与肿瘤大小、间质浸润深度和VEGF表达有关（P〈0．05）。结论：IL-6在宫颈癌组织中的表达是增高的，作用可能是促进了宫颈癌细胞的生长并且参与了血管生成过程。     

原发干燥综合征的观察与护理

原发性干燥综合征(Primary sjogren syndrome 简称SS)是一种侵犯外分泌腺体尤以唾液腺和泪腺为主的慢性全身性自身免疫性疾病.本病发病女性占90%以上,年龄大多在40岁以上,儿童罕见.     

IL—6与宫颈癌

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤，它的恶性进展伴随着细胞生长的不平衡、浸润和转移、生物学特性的获得和逃避免疫监视。在宫颈癌患者的体液、癌组织中都有IL—6的表达，在调节细胞的生长、凋亡、转移和对局部、全身的免疫调节都起到重要的作用。而功能上的多效性及复杂性是由它的受体系统决定的。现对IL-6在宫颈组织发生癌变过程中的作用做一综述。     

人乳头瘤病毒16型L1基因真核表达载体的构建及表达

目的从感染人乳头瘤病毒（HPV）的新鲜宫颈癌组织中扩增HPV16型晚期蛋白L1基因全长，构建表达载体，并验证目的蛋白的表达。方法根据基因全长设计一对特异引物，用PCR的方法从宫颈癌组织DNA，中获得L1基因，以pMD18T为克隆载体，构建重组质粒进行亚克隆，再以pcDNA3．1（＋）为载体构建表达质粒，转染至人肝细胞系H7702，提取蛋白，采用Western Blot方法检测HPV16-L1蛋白的表达。结果从长春地区宫颈癌临床标本克隆到的HPV16型L1蛋白编码序列与Genebank报道序列高度同源，其真核表达产物与特异性抗体能够特异性结合。结论成功构建重组表达质粒pcDNA3．1（＋）-HPV16-L1，为进一步研制HPV预防性疫苗创造基础条件。     

慢性肾功能衰竭患者使用第三代头孢菌素致中枢神经系统不良反应病例分析

目的分析第3代头孢菌素对慢性肾功能衰竭患者的中枢神经系统造成的不良反应情况,并研究其相应的临床防治对策。方法在我院内科住院患者中,随机选取接受过第3代头孢菌素治疗的慢性肾功能衰竭患者79例,统计其中枢神经系统的不良反应情况,以及相应的对症治疗措施,分析、评价患者的临床治疗效果。结果 77例患者在服药约1周时,出现不同程度的注意力减退、容易疲劳、嗜睡、记忆力下降、呆滞、妄想、幻听、幻视、烦躁不安、意识障碍、认知能力异常等中枢神经系统一般不良反应;4例患者在服药约1~2周时,表现出中枢神经系统肾性脑病的严重不良反应。经过及时抢救和对症治疗后,其临床症状均明显减退或痊愈。结论第3代头孢菌素能够引起慢性肾功能衰竭患者中枢神经系统的不良反应,因此,在治疗期间需严格控制药量,不可长期大剂量应用,在发现不良反应症状后应立即停止用药,并给予相应的对症治疗。对于用药时间过长而引起的严重中枢性肾性脑病患者应积极抢救,必要时行血液透析治疗以确保患者的生命安全。     

脑弥漫性轴索损伤的CT与MRI对比分析及评价其诊断价值

目的分析CT、MRI对弥漫性轴索损伤（DAI）的影像学表现,评价CT与MRI对脑弥漫性轴索损伤的诊断价值;方法收集本院3年来临床确诊的10例脑弥漫性轴索损伤的MRI及CT表现。所有患者均在伤后3d内接受CT与MRI检查,MRI采用自旋回波T1WI、T2WI序列、液体衰减反转恢复序列（FLAIR）,CT采用常规程序扫描。结果DAI在CT影像上可见弥漫性脑肿胀,皮层下及脑深部小出血灶,中线结构无明显移位,其中3例患者CT表现正常;MRI检查10例患者均表现异常,可见弥漫性脑肿胀,单发或多发的脑白质小灶性损伤,多数病灶为非出血性,脑干和胼胝体病灶多见于重度头部损伤患者。10例患者中,MRI共检出42个病灶,CT仅检出15个病灶。MRI对脑内非出血性病灶及脑干、胼胝体病灶的敏感性优于CT。结论CT及MRI为DAI的临床诊断提供了直接可靠的影像学依据,MRI是诊断脑弥漫性轴索损伤最敏感的影像学方法。     

IL-17A 及IL-17RA 在不同恶性程度胶质瘤中表达的研究

摘要： 目的 研究白细胞介素 （IL） -17A 及其受体 （IL-17RA） 在不同恶性程度胶质瘤中表达的差异。方法 收集胶质瘤患者 50 例, 按照世界卫生组织的分类系统分为Ⅰ级 12 例, Ⅱ级 18 例, Ⅲ级 13 例, Ⅳ级 7 例。取患者外周血以及胶质瘤组织, 荧光实时定量 PCR 检测 IL-17A 及 IL-17RA 的 mRNA 水平, 采用免疫组化和 Western blot 检测 IL-17A 及 IL-17RA 的蛋白表达水平。结果 免疫组化染色结果显示, 随着胶质瘤恶性程度增加, IL-17A 及其受体 IL-17RA 表达增加。外周血中, IL-17A 及其受体 IL-17RA 的 mRNA 水平随着胶质瘤恶性程度增加而上升 （F 分别为 8.96、 10.34, 均 P＜0.05）。胶质瘤组织中 IL-17A 及其受体 IL-17RA 的 mRNA 水平随着胶质瘤恶性程度增加而上升 （F 分别为 11.21、 14.11, 均 P＜0.05）。在外周血和胶质瘤组织中, IL-17A 及其受体 IL-17RA 的蛋白水平随着胶质瘤恶性程度增加也上升 （外周血 F 分别为 9.90、 11.80, 均 P＜0.05; 胶质瘤组织 F 分别为 8.15、 14.46,均 P＜ 0.05）。结论 IL-17A 及其受体 IL-17RA 的表达与胶质瘤恶性程度呈正相关性。