Calponin对培养的自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用

Ｃａｌｐｏｎｉｎ是一种抗细胞增殖基因，在多种病理情况下表达失调。用脂质体＋载体质粒ｐＣＡＧＧＳ作介导向培养的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌细胞内导入人重组Ｃａｌｐｏｎｉｎ（ｈＣＮ），目的基因可在该细胞组织内表达，并持续较长时间（４周以上）。ＭＴＴ法的检测结果表明，导入ｈＣＮ基因能明显抑制ＳＨＲ平滑肌细胞的增殖。这种作用对血管成形术后再狭窄的防治和高血压时血管壁肥厚的逆转具有潜在的实用价值。     

深低温保存兔角膜细胞体外培养的实验研究

本文采用体外组织培养技术对深低温保存的兔角膜的上皮细胞、内皮细胞和基质细胞进行培养和观察。结果表明，上皮细胞一般在培养5－7天贴壁，2周以后出现老化和脱落，仅能传1代。内皮细胞2－3天可贴壁，不易传代。基质细胞1周后贴壁，能传2－3代。     

r—干扰素和地塞米松抑制成纤维细胞的实验研究

成纤维细胞的增殖与许多眼病有关，作者采用ＭＴＴ比色法检测，ｒ－干扰素和地塞米松对成纤维细胞的抑制作用。结果表明，ｒ－干扰素在０．１－１００００μ／ｍｌ剂量时对成纤维细胞增殖没有直接抑制作用，地塞米松在０．０１－１０００μｇ／ｍｌ剂量对成纤维细胞有明显抑制作用。     

KAI1基因对原发胰腺癌生长的调控作用

目的已知KAI1基因是一种肿瘤转移抑制基因,属第4家族跨膜成员,并对胰腺癌的转移有抑制作用,但其对原发胰腺癌的影响尚不清楚.     

低KAI1mRNA水平与胰腺癌的浸润转移有关

目的为了解ＫＡＩ１ｍＲＮＡ水平与胰腺癌的浸润转移关系。方法用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ法对１２例正常胰腺组织和３０例原发性胰腺癌组织中ＫＡＩ１ｍＲＮＡ基因的表达进行检测分析。结果正常胰腺组织中该基因的表达水平呈阴性或弱阳性。相比之下，该基因在８３．４％（２５／３０）胰腺癌组织中有稳定的表达水平。在早期胰腺癌中出现的高表达ＫＡＩ１基因水平，与进展期伴有淋巴结及远处转移的晚期原发性胰腺癌比较。差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１）。在低分化的胰腺癌中该基因的翻译水平显著高于高中分化的胰腺癌（Ｐ＜０．０５）。该基因与胰腺癌患者的性别、年龄和肿瘤的大小无关。结论高调节的ＫＡＩ１基因出现在早期胰腺癌中，而低表达的ＫＡＩ１基因可能与胰腺癌的浸润转移有密切关系。     

胰腺癌细胞中KAI1蛋白的表达分析

目的研究KAI1基因在人高转移胰腺癌细胞株PANC Ⅰ和MiaPacaⅡ中的表达,并进行KAI1基因在胰腺癌中抗转移作用的有关研究,为今后利用KAI1基因治疗胰腺癌提供实验和理论依据.     

FasL基因转染诱导类风湿关节炎患者滑膜细胞凋亡的实验研究

目的通过构建FasL重组质粒并转染原代培养的类风湿关节炎(RA)患者滑膜细胞,研究FasL基因对体外培养的RA滑膜细胞的凋亡诱导作用,寻找针对RA关节腔内基因治疗的有效靶基因.方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增FasL cDNA全长片段,经BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切,将FasL基因导入真核表达载体pcDNA3.1-neo;体外原代培养RA患者及正常人的滑膜细胞:脂质体包裹真核表达质粒pcDNA3.1-FasL及空质粒pcDNA3.1-neo,分别转染处于指数生长期的RA患者及正常人的滑膜细胞;经G418筛选,采用形态学、TUNEL法及Annexin Ⅴ/碘化丙啶(PI)染色等方法检测各组滑膜细胞的凋亡情况.结果FasL基因原核及真核重组质粒载体顺利构建,基因序列检测结果与国外报道完全一致;RA患者及正常人的滑膜细胞原代培养、传代顺利完成;RA患者滑膜细胞转染FasL重组质粒(rhFasL)15 h后,光镜下可见大量细胞体积缩小、扭曲、变形,胞核中出现颗粒样物质,少数细胞脱落底壁,G418筛选2周后仅有1～2个/低倍视野细胞存活,且生长相对静止;RA患者滑膜细胞在转染空质粒及正常人滑膜细胞在转染pcDNA3.1-FasL及空质粒后仅有少数细胞变形、反光度下降,很少脱离底壁,G41 8筛选2～4周后细胞再次生长并形成克隆;经TUNEL方法检测可见大量转染rhFasL的RA滑膜细胞的细胞核呈棕黄或棕褐色,胞核浓缩,呈环行、小圆形或颗粒状,而其他3组对照组滑膜细胞的细胞核呈蓝色或浅黄色,未见明显凋亡标记阳性细胞;基因转染后的各组滑膜细胞予Annexin Ⅴ/PI染色、流式细胞仪检测后均查到少量早期的凋亡细胞,但各组间差异无统计学意义.结论pcDNA3.1-FasL基因可诱导体外培养的RA滑膜细胞间的凋亡增加.