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71.
河南省分离的HIV-1 B-Thai亚型流行株全基因组克隆及序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 克隆、鉴定自河南省分离的HIV-1 B-Thai亚型流行株并进行系统发育分析。方法收集河南省1份HIV-1感染者全血后分离的淋巴细胞,在植物血凝素存在下与健康献血员淋巴细胞共培养,从培养的淋巴细胞中提取前病毒DNA。在HIV-1基因的长末端重复序列的保守区设计引物,利用LA Tag长链扩增系统扩增HIV-1全长基因,纯化的PCR产物与pWSK29-T载体连接,成功克隆CNHN24株。对鉴定的3个克隆进行全长测序,利用局部同源法计算同源率,同时采用Phylip软件绘制HIV-1 Env、Gag和Pol基因的进化树。结果 V3V4环序列分析表明:本次克隆的CNHN24株病毒为HIV-1 B-Thai亚型,V3环区氨基酸序列比对发现在9个位点发生氨基酸替换。在含有9010bp,全长HIV-1基因的CNHN24株克隆中未发现明显的缺失、插入和重排现象,Gag、Pol、Vpr和Vif基因与RL42株的同源率达到95.42%~97.08%,进化分析显示,CNHN24株与RL42株的遗传距离最近。结论 HIV-1 CNHN24株为国内实验室完成的HIV-1全长基因克隆,为进一步研究HIV-1流行特征提供了基础。 相似文献
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目的考察胆固醇基磷酰齐多夫定(CPZ)自组装体的体外抗人免疫缺陷病毒(HIV)作用,为其治疗艾滋病提供实验依据。方法制备CPZ自组装体,以HIV-1感染的MT4细胞为实验模型,以合胞体产生为评价指标,与原药齐多夫定(AZT)比较,考察CPZ自组装体的抗HIV作用。同时采用MTT法考察CPZ自组装体的细胞毒性。考察了RAW264.7细胞对CPZ自组装体的吞噬作用。结果 CPZ自组装体的抗HIV活性与AZT比较大大增强,其半数有效浓度(EC50)是AZT的1/10~1/50,选择系数较大,安全性高。结论 CPZ自组装体的抗HIV作用较强,有望成为治疗艾滋病新药。 相似文献
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目的了解江津区居民的膳食结构及健康状况,为指导居民调整不平衡膳食结构及今后开展营养宣传教育提供科学依据。方法根据《中国居民营养与健康状况监测工作手册》,调查6个监测点的膳食结构。每个监测点均随机抽取30户居民,采用"连续3 d 24 h回顾法"调查食物摄入种类及数量,测量调查对象的身高、体重和血压等指标。结果居民水果和乳类摄入不足的情况比较严重。能量、蛋白质、碳水化合物和膳食纤维等营养素摄入量低于推荐摄入量水平,但油脂和食盐的摄入高于推荐摄入量。城镇居民碳水化合物提供的能量比例为50.9%,低于中国营养学会建议的标准,而脂肪提供的能量比例达37.8%,高于标准。成人超重和肥胖患病率分别为30.8%和15.4%,高血压患病率为23.3%,均高于2002年全国水平。结论江津区城乡居民膳食结构欠合理,应加强营养知识教育普及,提倡合理膳食和健康的生活方式。 相似文献
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目的 阐明HIV-1耐药相关突变N348I在中国艾滋病患者中的流行率及突变模式。方法用RT-PCR从血浆标本中扩增614例治疗失败和619例未治疗的艾滋病患者的HIV-1 pol基因蛋白酶(PR)反转录酶(RT)全长基因(2100 bp)。将获得的1233条序列提交斯坦福大学HIV-1耐药数据库,根据数据库比对结果,分析N348I出现的频率及模式。结果N348I突变在抗病毒治疗失败患者中的流行率为6.5%,在未治疗患者中的流行率为0.8%。使用含齐多夫定(AZT)方案治疗的患者,N348I突变的流行率显著高于使用不含AZT方案治疗的患者(14.1% vs.4.7%,x2=10.21,P<0.01);在出现N348I突变的接受治疗的患者中,N3481均以与其他突变联合的形式出现,与胸苷类似物耐药突变(TAMs)共同发生占85.0%(34/40)、与M184V/I共同出现占52.5%。结论使用一线方案治疗失败的艾滋病患者中,N348I突变有一定流行,该突变的发生以特有突变模式出现。 相似文献
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目的对5名北京市男男性行为者体内人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)全基因组特征进行全面分析。方法采用淋巴细胞共培养法分离出病毒,并采用RT-PCR法扩增出其近似全长基因组,测序后对其基因序列特征进行深入分析。结果经系统进化和重组分析,分离出的5株病毒分属CRF07_BC、CRF01_AE和B亚型。病毒虽然分属不同亚型,但膜区糖基化位点的数目和分布位置都趋于保守,V3环顶端序列存在GPGR和GWGR两种形式,嗜性预测皆为M嗜性。结论男男性行为人群中HIV-1流行毒株存在CRF01_AE、CRF07_BC和B亚型。本研究获得的全长序列将为研究HIV-1各亚型在男男性行为人群中的传播和进化提供理论依据。 相似文献