穿心莲内酯对人肝癌细胞MHCC97H增殖的影响及其机制研究

【目的】观察穿心莲内酯(Andro)对人肝癌细胞MHCC97H增殖的影响及作用机制,探讨其体外抗肝癌作用。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Andro不同浓度(5、10、20、30、40、50μmol/L)及不同处理时间(24、48、72 h)对MHCC97H细胞增殖的影响;采用Annexin V—碘化丙啶(PI)双染法、Hoechst 33342染色法观察细胞凋亡;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测凋亡相关蛋白如Bax、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、裂解型胱天蛋白酶3(cleaved-caspase-3)、剪切型聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved-PAPR),周期相关蛋白如周期素B1(cyclin B1)、周期素依赖性激酶1(CDK1)及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白如m TOR、p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)的表达。【结果】穿心莲内酯5、10、20、30、40、50μmol/L组24、48、72 h MHCC97H细胞增殖率下降,且随着Andro浓度、处理时间的增加而逐渐降低。Andro 25、50μmol/L组12、24、48 h MHCC97H细胞凋亡率均升高,呈浓度和时间依赖性。Andro 50μmol/L组48 h MHCC97H细胞发生G2/M期阻滞。与溶剂对照组比较,Andro 50μmol/L组中促凋亡蛋白Bax、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP表达升高(P0.05或P0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(P0.01),周期蛋白cyclin B1和CDK1表达及mTOR信号通路蛋白mTOR、p70S6K的磷酸化水平均下降(P0.05或P0.01或P0.001)。【结论】Andro可能通过调控MHCC97H细胞凋亡相关蛋白Bax、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP、Bcl-2及周期相关蛋白cyclin B1、CDK1的表达及抑制mTOR-p70S6K信号通路的激活,促进细胞凋亡及细胞周期阻滞,从而发挥体外抗肝癌作用。     

中国西南地区妇女孕前体质量指数、孕期增重与妊娠期糖尿病关系的前瞻性队列研究

目的 分析中国西南地区育龄妇女孕前体质量指数、孕期不同时期体质量增长与妊娠期糖尿病（GDM）的关系。方法 采用前瞻性队列研究（GDM组3 593例,对照组15 346例）的方法,选取18 939例于2013～2015年在四川、贵州、云南定期产检的单胎孕妇,测量身高及孕期体质量,于孕24～28周进行GDM筛查。采用多因素logistic回归分析孕前体质量指数（BMI）（暴露水平1）、孕期增重（暴露水平2）与GDM结局的关系。结果 孕前超重和肥胖可增加GDM的发生风险〔比值比（OR）=2.44,95%可信区间（CI）:1.98～2.99;OR=4.98,95%CI:2.52～9.91）。采用美国国家科学院医学研究所（IOM）孕期增重标准,调整了预产年龄及孕前BMI后,与增重适宜组相比,孕早期增重过多或孕中期增重过多均是GDM的危险因素（OR=1.33,95%CI:1.03～1.70;OR=1.48,95%CI:1.26～1.72）。孕早期,高龄组（预产年龄≥35岁）中,与增重适宜者相比,孕期增重过多发生GDM的风险更大〔OR和95％CI为1.42（1.02～2.28）〕,而非高龄组（预产年龄OR值无统计学意义;孕中期,高龄组和非高龄组发生GDM的风险均是增重过多者高于增重适宜者〔OR和95％CI分别为1.59（1.14～1.88）和1.49（1.20～1.72）〕。结论 在中国西南地区的妇女中,孕前超重和肥胖、孕期增重过多均是GDM的危险因素,孕期增重过多的高龄妇女尤应注意。     

转染胸苷磷酸化酶基因对5'-脱氧氟脲苷抗结肠癌细胞株活性的影响

目的 探讨人结肠癌细胞系SW480和LOVO细胞株转染胸苷磷酸化酶(TP)基因后转化5′-脱氧氟脲苷(5′-DFUR)为氟尿嘧啶(5-FU)能力的变化及5′-DFUR抗癌细胞株活性的变化.方法 构建包含TP cDNA的真核表达载体,用慢病毒包装后转染结肠癌细胞株SW480和LOVO.转染5代后以免疫荧光法和流式细胞技术检测转染效率;RT-PCR和Western blot法分别检测2株细胞的TP mRNA和TP蛋白表达.然后以高效液相色谱法(HPLC)检测2株细胞转染前后转化5′-DFUR为5-FU的量;MTT法检测5′-DFUR对2株细胞转染前后半数抑制浓度(IC50).结果 转染TP基因后SW480-TP与LOVO-TP 5代细胞转染效率稳定在95％左右.2株转染细胞的TP mRNA表达分别比野生型细胞增加(695±172)倍(t=-7.00,P=0.002)和(282±87)倍(t=-5.61,P=0.030),Western blot显示TP蛋白表达也明显增强.转染后的SW480-TP与LOVO-TP在培养基中分别使5′-DFUR转化为5-FU的量增加(t=19.406 ～66.921,P＜0.01).5′-DFUR对SW480的IC50由(1641±53) μmol/L降至(587±17) μmol/L(t=-32.59,P＜0.01);对LOVO的IC50由(1607±57) μmol/L降至(1088±89) μmol/L(t=-8.52,P＜0.01).结论 慢病毒载体能够高效地将TP cDNA转染至人结肠癌细胞SW480和LOVO并稳定传代,转染后2株细胞的TP mRNA和TP蛋白表达明显增高,使5′-DFUR转化为5-FU的量增加,对结肠癌细胞株SW480和LOVO的抑制作用增强.     

TNF-α启动子基因多态性与子痫前期的相关分析

目的:研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)启动子基因多态性与子痫前期的关系。方法:选取本院2014年9月-2017年9月期间收治的子痫前期患者156例作为研究组,另选取同期来本院产检无并发症的正常妊娠孕妇150例作为对照组,对两组研究对象进行TNF-α启动子基因检测,分析TNF-α启动子基因多态性与子痫前期的关系。结果:重度子痫前期患者血清TNF-α表达水平为(3.96±0.78)pg/m L明显高于轻度子痫前期的(3.22±0.71)pg/m L;轻度子痫前期患者血清TNF-α表达水平明显高于对照组的(2.43±0.64)pg/m L,差异均有统计学意义(P0.05)。研究组TNF-α-238启动子基因型分布情况与对照组对比,差异均无统计学意(P0.05);研究组TNF-α-308启动子GA和AA基因型分布率均明显高于对照组,GG基因型分布率明显低于照组,差异均有统计学意义(P0.05)。GG、GA+AA基因型在不同程度子痫前期患者中对比,差异均无统计学意义(P0.05)。GA+AA基因型患者血清TNF-α表达水平为(4.31±0.46)pg/m L,明显高于GG基因型的(3.25±0.63)pg/m L,差异有统计学意义(P0.05)。结论:TNF-α-308启动子基因多态性可影响细胞因子的表达水平,可能参与了子痫前期的发病过程。     

辛伐他汀对冠心病合并高脂血症调脂治疗的有效性和安全性

目的：观察不同剂量辛伐他汀对冠心病合并高脂血症患者的疗效和安全性。方法：选择冠心病合并高脂血症患者107例,按随机原则分为三组,A、B、C组。各组服用辛伐他汀为不同的剂量,分别为20、40、80mg/d。于服药前和服药16周分别检测血脂水平,测定总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）。记录服药期间药物的不良反应。结果：辛伐他汀治疗16周后,与治疗前比较,各组患者TC和LDL-C水平均有明显降低（P〈0.05）,HDL-C升高,TG降低;80mg组TC和LDL-C降低水平较其他两组明显（P〈0.05）。在不良反应方面各组无明显差异。结论：辛伐他汀20mg/d、40mg/d、80mg/d均有良好的降血脂作用,但80mg/d剂量下作用更强,且安全性良好。     

从药物不良反应谈老年高血压患者未来的社区管理

目的　将高血压药物不良反应（ADR）与慢性非传染性疾病（简称慢性病）患者的社区管理政策相结合,分析高血压患者ADR现状,并从社区管理的角度提出政策建议。方法　2017年1—6月采用实证研究法,从2013年1月—2015年12月陕西省高血压患者ADR终端用户数据平台选取高血压ADR病例报告5 405例。从高血压ADR病例报告中筛选出9种数量最多的药物（硝苯地平、氨氯地平、卡托普利、依那普利、美托洛尔、吲达帕胺、氢氯噻嗪、厄贝沙坦、替米沙坦）,统计分析病例报告的年龄、用药情况、ADR分类及主要临床表现。结果　5 405例高血压ADR病例报告中,>50岁3 621例（66.99%）。使用的药物类别为：（1）钙离子拮抗剂（CCB）：硝苯地平1 364例（25.24%,其中联合用药424例）,氨氯地平623例（11.53%,其中联合用药192例）;（2）血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）：卡托普利1 024例（18.94%,其中联合用药287例）,依那普利899例（16.63%,其中联合用药308例）;（3）β-受体阻滞剂：美托洛尔380例（7.03%,其中联合用药173例）;（4）利尿剂：吲达帕胺429例（7.94%,其中联合用药156例）,氢氯噻嗪253例（4.68%,其中联合用药78例）;（5）血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂（ARB）：替米沙坦266例（4.92%,其中联合用药88例）,厄贝沙坦167例（3.09%,其中联合用药45例）。共发生ADR 6 770例次,主要为中枢及外周神经系统损害（22.38%）、呼吸系统损害（21.21%）、胃肠系统损害（19.23%）。CCB所致ADR主要为中枢及外周神经系统损害（42.59%）;ACEI所致ADR主要为呼吸系统损害（67.90%）;β-受体阻滞剂所致ADR主要为胃肠系统损害（45.78%）;利尿剂所致ADR主要为胃肠系统损害（52.53%）;ARB所致ADR主要为中枢及外周神经系统损害（41.25%）。结论　高血压作为常见的慢性病,老年患者居多,患者常用药物服用基数大、联合用药较多、ADR较多,累及器官和系统广泛。因此,针对老年高血压患者的社区管理,应重视用药安全并积极开展健康宣教,丰富慢性病管理内容,合理使用基本药物,加强专业人员配备,建立慢性病管理数据信息平台。     

塑化与根充联合运用治疗磨牙牙髓病和根尖周病的疗效观察

目的观察塑化与根充联合运用治疗磨牙牙髓病及根尖周病的疗效。方法对79例83颗磨牙的牙髓病或根尖周病联合运用塑化及根管充填。结果通过2年的术后观察,塑化与根充联合运用治疗磨牙牙髓病及根尖周病取得满意疗效。结论塑化与根充联合运用能综合两者的优势,取得满意疗效。     

老年患者腹腔镜胆囊切除的护理体会

我院2000年至今,已做腹腔镜胆囊切除1000余例,它具有切口小、损伤小、痛苦少、恢复快等优点,适用于胆囊疾患。但因老年人生理功能的退行性改变,加大了手术难度和风险,护理工作量及难度亦随之增加。因此,加强老年腹腔镜胆囊切除术患者的护理,是保证手术成功、促进患者康复的重要环节。现将79例老年患者的护理体会,报告如下。     

卡维地洛治疗慢性充血性心力衰竭的临床疗效观察

目的：评价卡维地洛治疗慢性充血性心力衰竭患者的疗效和安全性。方法：充血性心力衰竭患者48例随机分为治疗组（n=26）和对照组（n=22）。两组给予利尿剂、强心剂、血管紧张素转换酶抑制剂,有心绞痛或心肌缺血者应用硝酸酯类药物;治疗组在上述治疗基础上口服卡维地洛,起始剂量3.125mg,2次/d,每2周调整剂量1次,直到最大耐受量（预定目标剂量为50mg/d）。疗程6个月。比较两组治疗前和疗程结束时临床疗效及心功能。结果：治疗组的有效率（88.5%）显著高于对照组（63.6%）,差异有显著性（P〈0.05）。治疗组左室射血分数、心排血量、左室短轴缩短率、左室舒张末期内径较治疗前明显改善,与对照组比较,差异有显著性（P〈0.05）。结论：卡维地洛治疗慢性充血性心力衰竭是安全有效的。     

彩超探查下肢血管引导带蒂皮瓣移位术的临床应用

目的探讨彩超检查对下肢血管引导带蒂皮辨移位术的临床价值。方法对32例小腿、踝部、后跟部、足部皮肤缺损患者的局部皮辨修复行术前彩超检查定位,并与手术结果进行对比分析。结果30例定位准确（占93．75％）,其中28例术后伤口愈合良好,2例伤口延迟愈合;2例因小腿肿胀探查血管失败。结论彩超探查腓动脉穿支及小隐静脉引导腓肠神经营养皮辨与局部旋转皮辩治疗下肢皮肤缺损,方法简便、准确,能明显提高手术成功率。