南蛇藤提取物对人胃癌SGC-7901细胞蛋白组学的影响

目的:探讨南蛇藤提取物(Celastrus orbiculatus extract,COE)在人胃癌细胞中的可能作用靶点。方法:采用细胞活力实验检测COE对细胞生长增殖的抑制作用,计算COE的半数抑制浓度(50%concentration of inhibition,IC50)。蛋白质组学技术寻找COE作用前后的差异表达蛋白;并通过蛋白免疫印迹法(Western blot)对部分蛋白进行验证。结果:COE能够抑制SGC-7901细胞的增殖,呈一定的浓度及时间依赖性;其24 h的IC50为70.14 mg·L~(-1)。COE(70 mg·L~(-1))作用SGC-7901细胞24 h后,与空白组比较有9个蛋白质点发生下调,4个蛋白质点发生上调;这些蛋白可能是COE在胃癌细胞中的作用靶点。Western blot验证了COE对热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27),抗增殖蛋白(prohibitin),丝切蛋白(cofilin-1),膜联蛋白A5(annexin A5)表达的影响,与蛋白质组学结果相一致。结论:COE对胃癌细胞具有显著的抑制作用,筛选出的差异表达蛋白为COE的抗肿瘤机制研究提供新的依据。     

止痛胶囊对大鼠镇痛作用的实验研究

目的：探讨止痛胶囊对于大鼠的镇痛作用及其机理。方法：采用光热刺激鼠尾－逃避法（Ｔａｉｌ ｆｌｉｃｋ ｔｅｓｔ）测定大鼠痛阈。结果：止痛胶整能剂理依赖性地提高大鼠光热刺激鼠尾－逃避法的痛阈;纳洛酮能部分翻转止痛胶囊的镇痛作用。结论：止痛胶囊具有镇痛作用,其镇痛作用可能涉及阿片受体。     

南蛇藤提取物通过破坏线粒体结构促进胃癌AGS细胞凋亡的机制

目的 观察南蛇藤提取物（COE）对胃癌细胞的抑制作用，探讨COE通过影响线粒体结构和功能促进胃癌凋亡的一种全新的作用机制，为南蛇藤的进一步开发和临床应用提供实验依据。方法 5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）染色联合流式细胞实验用来检测不同质量浓度COE （20、40、80 mg·L^-1）对胃癌细胞增殖的影响。通过膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（AnnexinV-FITC）染色实验联合流式细胞术检测COE对胃癌细胞凋亡的影响，用JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测线粒体膜电位的变化，通过蛋白免疫印迹法（Western blot）检测COE对胃癌细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、B细胞淋巴瘤-xL（Bcl-xL）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和胱天蛋白酶-3（Caspase-3）表达的影响，用透射电镜检测COE处理后的胃癌细胞线粒体微观结构的变化，包括线粒体膜完整性和内部嵴的变化。COE处理后，Western blot检测胃癌细胞线粒体标志蛋白超氧化物歧化酶1（SOD1）、电压依赖性阴离子通道蛋白（VDAC）、抗增殖蛋白1（PHB1）和热休克蛋白60（HSP60）水平的变化。结果 Brdu染色显示，与空白组比较，COE组（40、80 mg·L^-1）胃癌细胞的增殖比例明显下降（P<0.05）。AnnexinV-FITC染色显示，与空白组比较，COE组（40、80 mg·L^-1）胃癌细胞的凋亡数量明显增加（P<0.05）。JC-1线粒体膜电位检测显示，COE处理后组胃癌细胞的线粒体膜电位水平明显降低。Western blot结果显示，与空白组比较，COE组（20、40、80 mg·L^-1）促进胃癌凋亡的相关蛋白Bax和Caspase-3表达明显增加（P<0.05，P<0.01），COE组（40、80 mg·L^-1）胃癌细胞凋亡抵抗相关蛋白Bcl-2和Bcl-xL表达显著降低（P<0.01）。透射电镜结果显示，与空白组比较，COE组胃癌细胞的微观结构发生了明显变化，细胞膜内出现了很多空泡，线粒体结构出现破坏，线粒体内出现空泡。Western blot结果显示，与空白组比较，COE组（20、40、80 mg·L^-1）胃癌细胞中与应激反应有关的蛋白SOD1表达增高（P<0.05，P<0.01），COE组（80 mg·L^-1）与线粒体稳定和通透性相关的蛋白VDAC、PHB1和HSP60表达均显著下降（P<0.01）。结论 COE能够显著抑制胃癌细胞的增殖，促进胃癌细胞的凋亡，其机制可能与COE破坏胃癌细胞线粒体结构和功能从而激活细胞线粒体凋亡途径有关。     

南蛇藤总萜抑制荷肝癌HepA1-6小鼠移植瘤的生长

目的:探讨南蛇藤总萜对荷肝癌HepA1-6小鼠移植瘤生长的影响及其可能机制。方法:建立肝癌HepA1-6小鼠移植瘤模型,分为空白对照组、溶媒对照组(1%DMSO)、阴性对照组(0.9%氯化钠溶液)、阳性对照组(顺铂)及南蛇藤总萜低(10 mg/kg)、中(20 mg/kg)和高(40 mg/kg)剂量组。观察南蛇藤总萜对小鼠体质量、抑瘤率、肝脏指数、脾脏指数及胸腺指数的影响;应用免疫组织化学法检测移植瘤组织中血管内皮生长因子(vascular end othelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的表达以及微血管密度(microvessel density,MVD)计数;TUNEL法检测移植瘤组织中的细胞凋亡。结果:南蛇藤总萜可明显抑制荷肝癌HepA1-6小鼠移植瘤的生长,促进肿瘤细胞凋亡,下调移植瘤组织中VEGF和bFGF的表达以及MVD计数,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);南蛇藤总萜组小鼠肝、脾和胸腺指数及体质量与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:南蛇藤总萜可明显抑制荷肝癌HepA1-6小鼠移植瘤的生长,可能与其促进肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤血管生成有关。     

中医药治疗化疗致骨髓抑制的研究评述

目的：分析中医药治疗化疗致骨髓抑制的临床疗效和相关实验研究。方法：回顾性分析中医药治疗化疗致骨髓抑制的相关文献资料,进行适当的归纳总结。结果：中医药治疗化疗致骨髓抑制在临床治疗、实验研究等方面都取得了令人满意的疗效和科研成果。结论：中医药在遵循辨证论治的基础上,结合化疗致骨髓抑制的临床特点,从多环节、多靶点发挥疗效,具有良好的临床应用前景。     

中药抑制肿瘤上皮间质转化的研究

从中药单体和复方制剂两方面对中药抑制肿瘤上皮一间质转化（EMT）的研究进展作一整理,并总结了传统中医药与现代药理机制之间的关联,上皮-间质转化是上皮细胞通过特定的程序转化为间质细胞的生物学过程,在肿瘤的侵袭转移过程中起重要作用,但至今尚缺乏有效的治疗药物。中药单体成分及复合方剂抑制肿瘤EMT的基础和临床研究进行了很多,有些药物已经在临床中应用并经证实疗效确切,亦有些药物目前尚处于基础实验阶段,中药单体的作用机制较复方合剂进展迅速。但EMT的调控是个复杂的过程,需要寻找更加特异的靶点,特异性地抑制调控EMT的过程;同时需要积累更多的临床经验,兼顾临床疗效、不良反应及耐药现象。相信随着对EMT研究方法的不断改进和理论的完善,中药抑制EMT的研究必将受到越来越多的关注,对于实现中药现代化起到重要意义。     

南蛇藤及其有效成分抗胃癌作用机制的研究进展

随着中医药抗肿瘤研究的深入,越来越多的中药被发现并证实具有很好的抗肿瘤效果。其中南蛇藤及其有效成分抗肿瘤的研究已近20年,许多研究已经证实南蛇藤及其有效成分具有很好的抗胃癌活性。已经被分离和证实具有抗肿瘤活性的成分包括萜类化合物、脂肪类化合物和苷类化合物等,其中萜类化合物的抗肿瘤活性最强。南蛇藤及其有效成分抗胃癌的主要作用为抑制胃癌细胞的增殖、诱导胃癌细胞凋亡、抑制胃癌细胞侵袭转移和上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transformation,EMT）、抑制胃癌血管生成和逆转胃癌多药耐药等。这些研究结果对深入挖掘南蛇藤抗胃癌活性成分和分子机制具有非常重要意义。从南蛇藤抗胃癌的有效成分及其南蛇藤抗胃癌的作用机制研究2个方面对南蛇藤抗胃癌的相关研究进行综述,为今后南蛇藤的进一步开发和利用提供参考。     

南蛇藤提取物对人肝癌细胞HepG2上皮间质转化的影响

目的：结合体内外实验研究南蛇藤提取物对人肝癌细胞HepG2上皮间质转化的作用及分子机制。方法：取对数生长期HepG2细胞,除对照组外,分别给予南蛇藤提取物10、20、40、80、160 μg?mL^-1培养,采用Western Blotting法检测上皮间质转化（EMT）相关蛋白的表达水平;斑马鱼胚胎,于受精后48 h开始给药,正常组给予E3缓冲液,DMSO组为含1%DMSO的E3缓冲液,南蛇藤组各药物浓度分别为10、20、40、80、160 μg?mL^-1;给药24 h后,以Western Blotting法检测mTOR信号通路相关蛋白的表达水平。结果：与对照组相比,南蛇藤提取物各浓度组明显增加E-cadherin的表达量,降低vimentin和mTOR信号通路相关蛋白的表达水平。结论：南蛇藤提取物能在一定程度上逆转人肝癌细胞EMT,其分子机制可能与mTOR 信号通路相关,mTOR可作为临床治疗肝癌的新靶点。     

茯苓酸通过Smads调控MMP/TIMP平衡抑制肾癌细胞侵袭转移的机制

目的：探讨茯苓中的三萜类化合物茯苓酸(PA),对肾癌侵袭转移的作用及机制。方法：采用细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)试剂盒检测PA(0、20、40、80、160μmol·L^-1)对细胞存活率的影响,并筛选PA浓度用于后续实验。采用克隆形成实验评估PA(0、20、40、80μmol·L^-1)对细胞增殖的作用。细胞黏附实验用来观察PA(0、20、40、80μmol·L^-1)对细胞黏附能力的效果。划痕实验和Transwell侵袭实验用来检测PA(0、20、40、80μmol·L^-1)对细胞侵袭转移的影响。高内涵成像技术进一步动态观察和验证PA(0、20、40、80μmol·L^-1)对细胞运动的抑制作用。PA(0、20、40、80μmol·L^-1)对细胞中侵袭转移相关蛋白基质金属蛋白酶/基质金属蛋白酶组织抑制因子(MMP/TIMP)和相关通路关键蛋白Smads表达的影响通过蛋白免疫印迹法(Western blot)来检测。结果：CCK-8结果显示,与空白组比较...     

STAg不同途径免疫对小鼠弓形虫感染保护作用

目的 观察弓形虫可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)滴鼻、灌胃和皮下注射免疫小鼠诱导的抗弓形虫感染作用。方法 40只6~7周龄BALB/c小鼠随机分为4组,前3组分别以20μg STAg滴鼻、灌胃或皮下注射免疫小鼠2次,间隔2周,对照组不做处理。末次免疫后14 d,用速殖子2×10⁴个/只灌胃攻击所有小鼠,观察小鼠健康状况,记录体重,计算存活率。攻虫后30 d颈椎脱位处死小鼠,计数脾和脑组织速殖子。结果 滴鼻免疫小鼠的健康状况好于其他组,存活率(70%)高于皮下(60%)、灌胃(60%)和对照组(40%)。滴鼻组脾虫荷为369.48,皮下注射组脾虫荷为386.94,显著低于灌胃组(630.40)和对照组(664.93)(F=3.611,P<0.05)。滴鼻组(36.45)、灌胃组(34.85)和皮下注射组(40.22)脑虫荷差异无统计学意义(F=1.999,P>0.05),但均显著低于对照组(57.32)(F=1.999,P<0.05)。结论 20μg STAg滴鼻免疫小鼠诱导了较强的抗弓形虫感染作用,优于皮下和灌胃免疫。