耐长春新碱视网膜母细胞瘤细胞株的建立

目的：研究视网膜母细胞瘤获得性多药耐药现象，探讨其产生机制。方法：利用长春新碱(vincristree，VCR)对人视网膜母细胞瘤细胞系HXO-RB₄₄细胞在体外进行浓度递增法逐步诱导实验，建立一株耐长春新碱视网膜母细胞瘤细胞亚株HXO—RB/VCR。并对其细胞生长，药物含量，药物敏感性与放射性敏感性进行检测。 结果：该耐药细胞株HXO—RB/VCR细胞对长春酰胺、丝裂霉素C、阿霉素、足叶乙甙、顺铂、卡铂等有交叉耐受，对卡氮芥、氟尿嘧啶无明显抗药性，而对氨甲喋呤的敏感性反而增加。对⁶⁰ Coγ射线有轻度耐受性。细胞内药物含量测定显示：耐药细胞内长春新碱浓度明显低于敏感细胞，钙通道阻断剂异博定可使细胞内VCR浓度增加，部分逆转其耐药性。 结论：VCR可诱导视网膜母细胞瘤产生多药耐药和轻度放射耐受，获得性多药耐药作用可被异博定逆转。 （中华眼底病杂志，1997，13：6-9）     

高度近视患者多焦视网膜电流图的评估

目的:探讨高度近视眼患者多焦视网膜电流图在视网膜的分布特征,以了解高度近视眼患者视网膜功能的早期改变。方法:应用法国Metrovision公司生产的VisionMonitor视觉诱发系统检测66例高度近视眼患者,将高度近视分3组:高度近视组:-6.00D～-10.00D,超高度近视组:-10.00～-15.00D,极高度近视组:>-15.00D。结果:N1波振幅密度下降1环在3组间差异有显著性。2至5环P1波和N2波振幅密度下降在3组间差异均有显著性;1环仅在高度近视组与超高度近视组、极高度近视组间振幅密度下降差异有显著性,而在超高度近视组与极高度近视组间差异无显著性。mERG的N1、P1和N2波潜伏期延长在高度近视组与超高度近视组、极高度近视组间比较差异有显著性(P<0.05)。结论:高度近视眼的视网膜功能变化表现为视锥细胞和/或双极细胞功能下降。     

小鸡FDM后极部巩膜MMP-2活性表达的动态变化

目的：研究形觉剥夺对小鸡后极部巩膜基质金属蛋白酶2（MMP-2）活性的影响以阐明小鸡形觉剥夺性近视眼（FDM）巩膜重塑的可能机制。方法：50只1d龄来亨雏鸡采用半透明塑料眼罩单眼遮盖制备FDM动物模型,按实验时间随机分为FDM 4,7,14,21,30d 5组,每组10只。对侧非遮盖眼作为自身对照。另外,每组随机选取10只同龄、非遮盖小鸡作为正常对照。于预定实验时间分别采用视网膜镜与A超检测实验眼屈光度与眼轴长度,采用明胶酶谱法检测各组小鸡后极部巩膜明胶酶活性变化。结果：各FDM组后极部巩膜MMP-2活性增高,与自身对照、正常对照组比较差异有统计学意义（P<0.01）;随着剥夺时间延长,其后极部巩膜MMP-2活性水平逐渐升高,至21d达高峰,其后稍下降,但仍维持于较高水平,不同FDM组组间差异有统计学意义（P<0.01）;小鸡FDM后极部巩膜MMP-2活性动态变化与眼轴长度、屈光度变化呈高度一致;后极部巩膜MMP-2活性与眼轴长度呈正相关（r＝0.989,P<0.01）,与屈光度呈负相关（r＝-0.989,P<0.01）。结论：后极部巩膜MMP-2活性特异性增高极可能为启动小鸡FDM巩膜细胞外基质（ECM）主动重塑的原因之一。     

弱视患者视网膜厚度的差异观察

目的:探讨不同程度远视而引起的弱视患者的视网膜神经纤维层厚度的差异。方法:采用视网膜厚度分析仪(Retinal thickness analyzer RTA)测量弱视患者22例(31眼)的视网膜神经纤维层厚度,所得图象经计算机处理后得出相应的视网膜厚度值与厚度地形图,数据经SPSS统计软件包进行分析。结果:弱视患者视网膜平均厚度为176.45±27.36μm。不同程度的弱视患者各点间视网膜厚度无明显差异性。弱视患者的不同远视程度与视网膜厚度相关系数r=0.056。结论:不同程度的弱视患者各点间视网膜厚度无明显差异性。弱视患者的不同远视程度与视网膜厚度无明显相关性。     

超常量外直肌徒后矫正儿童间歇性外斜视疗效探讨

间歇性外斜视是介于外隐斜和恒定性外斜视之间的一种斜视。其特点：幼年发病,外隐斜和显斜交替出现,精神不集中或遮盖后可诱发明显外斜。外斜不仅影响患者美容,而且对患者双眼单视有不同程度的影响。外直肌徒后是矫正外斜视常用的手术方式,传统认为外直肌后徒量不应超...     

大鼠视网膜神经元的原代培养方法

目的:探求视网膜神经元的最佳分离和培养方法,提高原代培养神经元的纯度及活性。方法:采用新生大鼠视网膜神经元,应用含100mL/L新生牛血清、100g/LF-12 Nutrient Mixtures的DMEM培养基进行接种培养,含20g/LB-27 Serum-Free Supplements的Neurobasal Medium进行维持培养,利用尼氏染色进行神经元鉴定。结果:培养的神经元生长良好,胞体饱满,突起长。尼氏染色示神经元比例大于90%。结论:采用机械分离法和Neurobasal Medium培养基可以使新生大鼠视网膜神经元得到良好的生长和较高的纯度。     

豚鼠近视眼视网膜M&#252;ller细胞的原代培养

目的研究豚鼠近视眼视网膜M&#252;ller细胞原代培养的方法。方法用半透明眼罩遮盖法建立豚鼠的近视眼模型。采用酶消化法培养豚鼠近视眼视网膜M&#252;ller细胞,用倒置相差显微镜观察M&#252;ller细胞的生长状况,以GFAP、Vimentin免疫组化染色进行细胞鉴定。结果半透明眼罩遮盖豚鼠右眼2周后,遮盖眼眼轴延长,近视形成。原代培养的视网膜M&#252;ller细胞贴壁生长,胞体较大、扁平,GFAP、Vimentin免疫组化染色呈阳性。结论酶消化法是培养豚鼠近视眼视网膜M&#252;ller细胞的一种有效方法。     

重组腺相关病毒介导的HSV-tk/GCV体系对兔晶状体上皮细胞的抑制作用

目的 探讨2型重组腺相关病毒(rAAV2)载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/丙氧鸟苷体系(HSV-tk/GCV)对体外培养兔晶状体上皮细胞(N/N1003A)的抑制作用,以及晶状体上皮细胞死亡的机制.方法 实验研究.rAAV2载体介导增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)转染体外培养N/N1003A细胞,倒置荧光显微镜观察细胞中EGFP的表达,流式细胞仪检测病毒的转染效率.重组病毒rAAV2/HSV-tk转染体外培养的N/N1003A细胞为实验组,以没有转染重组病毒的细胞作为对照组,MTT法检测HSV-tk/GCV体系对细胞作用的浓度依赖性、时间依赖性和旁观者效应;相差显微镜、透射电镜、Hoechst33258染色观察细胞凋亡、坏死改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期的变化.不同浓度GCV对两组细胞的作用结果采用两因素析因设计的方差分析;两组细胞周期和凋亡的比较采用两样本t检验.结果 rAAV2载体能介导EGFP基因稳定高效转染N/N1003A细胞.GCV对两组细胞的杀伤作用有剂量-效应依赖关系(F=13 076.239,P<0.001);实验组N/N1003A-tk细胞的存活率低于对照组,差异有统计学意义(F=53 947.119,P<0.001).实验组GCV的IC50为2 mg/L,而对照组IC50为524 mg/L.GCV的杀伤效应随时间延长而增强,且存在明显的旁观者效应.N/N1003A-tk细胞在GCV作用下出现明显的细胞凋亡和坏死,细胞的凋亡率7.18%±2.04%,与对照组(3.50%±0.56%)比较差异有统计学意义(t=3.83,P<0.01);S期细胞比例明显增加,G0/G1期细胞比例明显减少,与对照组比较差异有统计学意义(S期细胞比例:t=3.55,P<0.01;G0/G1期细胞比例:t=4.29,P<0.01).结论 GCV可有效杀伤重组腺相关病毒rAAV2/HSV-tk转染的兔晶状体上皮细胞,并具有较强的旁观者效应.     

白化豚鼠高度近视眼的发生与视网膜超微结构的关系

目的:观察白化豚鼠与有色豚鼠眼球屈光状态及视网膜形态结构,探讨白化豚鼠高度近视眼的发生与黑色素合成的联系.方法:随机选取220～250g(5～6周龄)的白化豚鼠与有色豚鼠各12只,行视网膜镜检影验光以检测屈光度,A超和游标卡尺测眼轴长度,光镜和电镜观察视网膜结构.结果:白化豚鼠的平均屈光度为-19.17D,有色豚鼠的屈光度为 0.63D,白化豚鼠较有色豚鼠眼轴延长,差异有统计学意义(P＜0.05).形态学观察发现,白化豚鼠视网膜变薄,视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)层细胞色素颗粒稀少,所含膜盘吞噬体减少,膜盘间隙变窄.有色豚鼠视网膜较厚,RPE细胞含大量色素颗粒、内含较多膜盘吞噬体,膜盘间隙较宽.结论:白化豚鼠为高度近视眼,有色豚鼠为低度的远视眼或正视眼.白化豚鼠与有色豚鼠的视网膜存在着结构差异.白化豚鼠RPE的结构异常,为其高度近视眼提供了光学基础和结构基础.     

在眼科临床实习带教中实践循证医学

循证医学强调最佳临床研究证据、医生的专业技能和病人的价值、愿望的完美结合。在眼科实习带教中引入循证医学，为眼科实践教学的改革提供了一种新的模式，适应现代医学教育的需要，有利于培养医学生的临床思维能力、创新能力及终身自我教育能力，提高医学生的综合素质。