小鼠肠干细胞群的构建

目的 探索利用干细胞体外培养技术构建小鼠肠干细胞群.方法 取孕17 d昆明系小白鼠的胚胎鼠肠组织,剪碎后采用酶消化法分离肠干细胞群;将通过离心获得的细胞溶于选择性培养液并种于一次性培养瓶中;利用角蛋白18亚型抗体行免疫组织化学染色鉴定细胞.结果 细胞培养48 h后,开始贴壁生长.镜下可见,上皮样细胞呈集落状生长,其中,由典型上皮构成的克隆约占30%,由扁平上皮细胞构成的克隆约占20%,混合生长的克隆约占50%.培养出的肠干细胞群在第3、4代达到生长分化的顶峰;而后干细胞逐渐减少,成熟的肠上皮细胞逐渐增多,直至最终凋亡.培养出的肠干细胞群角蛋白18亚型抗体染色阳性.结论 在现有技术条件下,体外构建肠干细胞群是完全可以实现的.     

肠上皮干细胞研究进展

肠黏膜上皮是哺乳动物机体代谢最为活跃的场所，肠上皮细胞终生进行着不问断的自我更新，这是因为位于肠道隐窝内的干细胞保持着旺盛的增殖分化能力。成体细胞的凋亡脱落及受损坏死与干细胞增殖、分化之间保持着动态平衡，由此可见肠上皮干细胞在维持肠道屏障结构和功能的完整以及损伤后的修复中扮演着重要角色。因此了解肠上皮干细胞的相关生物学特性，对临床工作将有重要的意义。     

中国人肠道产甲酸草酸杆菌oxc基因的克隆及其在真核细胞中的表达

目的 观察中国人肠道产甲酸草酸杆菌(Ox.F)草酰辅酶A脱羧酶基因(oxc)的分离、克隆及其在293细胞中的表达.方法 提取中国人肠道Ox.F的基因组DNA,PCR扩增oxc基因片段并克隆入真核表达载体pEGFP-C1,通过限制性内切酶酶切电泳和测序鉴定基因片段.将重组质粒脂质体转染至293细胞,利用RT-PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测oxc基因在真核细胞中的表达.结果 中国人肠道产甲酸草酸杆菌oxc基因全长1707 bp,与Gene Bank中的序列比较,碱基序列的同源性为93.61%,氨基酸残基序列的同源性为97.18%.重组质粒转染293细胞后24～48 h,可观察到明亮的绿色荧光,从mRNA和蛋白水平上可以检测到oxc基因在真核细胞中的表达.结论 中国人肠道产甲酸草酸杆菌中可以分离出oxc基因;中国人肠道产甲酸草酸杆菌oxc基因存在一定的变异;oxc基因可在真核细胞293细胞中表达.     

环T切口3点固定法隐匿性阴茎成形术

目的:尝试环T切口3点固定法隐匿性阴茎成形术,并与改良Devine术式作对比研究。方法:回顾性分析2014年6月至2016年6月169例隐匿性阴茎手术患者的临床资料,其中采用改良Devine术式59例,环T切口3点固定法110例,对比两组的手术时间、术后并发症及复发率。结果:所有患者均顺利一期完成手术,术后留置导尿3 d,弹力绷带包扎2~4周,术后分别获4~12个月随访,阴茎显露总体满意。手术时间:环T切口组(52.8±6.9)min,改良Devine组(61.5±10.6)min(P0.001);术后并发症:环T切口组与改良Devine组的比例分别是:包皮水肿17.3%(19/110)vs 33.8%(20/59),皮肤坏死0.9%(1/110)vs 5.1%(3/59),皮肤感染0.9%(1/110)vs 5.1%(3/59),术后出血0.9%(1/110)vs 3.4%(2/59)。环T切口组术后并发症明显少于改良Devine组。术后复发率:环T切口组1/110,改良Devine组4/59(P=0.032)。结论:环T切口3点固定法隐匿性阴茎成形术具有手术创伤小、术中显露良好、阴茎固定可靠、术后并发症少、复发率低、疗效满意等优点,有临床推广价值。     

新入职护士职场适应的研究进展

对新入职护士职场适应的概念、评估工具、现状、影响因素及应对策略进行综述,新入职护士职场适应度的相关影响因素涉及到个人、组织和工作、心理三方面,提出护理管理者应该优化护理工作环境,为新入职护士提供人文关怀,积极提供引导与帮助,探索出提高新护士职场适应度的方法,以提升新入职护士职场适应度,促进护理队伍的稳定性。     

济南市某高校护理本科生跨专业合作学习准备度与坚韧人格的相关性研究

目的 探讨护理本科生跨专业合作学习准备程度与坚韧人格水平,分析二者关系,为护理院校加强护生跨专业合作学习教育提供借鉴。方法 采用便利抽样法,于2021年11月选取济南市某高校739名护理本科生,使用一般资料调查表、跨专业合作学习准备度量表、大学生坚韧人格量表开展问卷调查。结果 护理本科生跨专业合作学习准备度得分为（74.55±8.45）分,坚韧人格得分为（72.21±12.49）分;坚韧人格及韧性、控制、投入维度与跨专业合作学习准备度中的角色和职责维度均呈负相关（r=-0.150～-0.075,均P<0.05）,坚韧人格及各维度与跨专业合作学习准备度得分及团队合作、消极的职业认同及积极的职业认同维度均呈正相关（r=0.181～0.531,均P<0.01）,坚韧人格与角色和职责维度呈负相关（r=-0.114,P<0.01）。不同性别、年级、对护理专业态度、韧性和挑战是护理本科生跨专业合作学习准备度的影响因素（均P<0.01）。结论 护理本科生跨专业合作学习准备程度与坚韧人格水平较高,且坚韧人格对跨专业合作学习准备具有积极影响。护理教育工作者可以通过开展特色训练课程...     

可分解草酸小鼠肠干细胞群的构建

目的 通过提取草酸分解菌的分解草酸功能基因frc和oxc,转染小鼠肠干细胞群使之获得草酸分解功能.方法 (1)构建能同时表达oxc和frc基因的双表达载体质粒pIRES-oxc-frc.(2)分离培养小鼠肠干细胞群,并了解其生长分化功能.(3)将pIRES-oxc-frc通过脂质体转染至小鼠肠干细胞群中,经过G418筛选后,了解验证转基因肠干细胞群生长、分化及基因表达状况.(4)用离子色谱法测定转基因后细胞培养液中草酸浓度,鉴定其草酸分解功能.结果 oxc和frc基因片段与GenBank提供的序列比较有极高的同源性.带有oxc和fre基因片段的重组质粒能顺利转染小鼠肠干细胞群,并能在后者中表达.转基因小鼠肠十细胞群培养液中草酸浓度[(2.48±0.03)g/L]低于普通小鼠肠干细胞群和空白对照组[(2.69±0.01)、(2.69±0.01)g/L,P<0.01].结论 产甲酸草酸杆菌分解草酸的重要功能基因oxc和frc基因能在体外转入小鼠肠十细胞群,并使后者具有草酸分解功能;原核细胞的多个基因能在一定条件下通过基因工程技术转入真核细胞.     

Cloning and Identification of frc Gene from Oxalobacter Frmigenes

The cloning and identification of frc gene from Oxalobacter formigenes in the intestines of Chinese people were conducted. The genomic DNA of Oxalobacter formigenes was extracted. frc gene fragment was amplified by polymerase chain reaction (PCR) and linked with pEGFP-C1. The recombinant plasmid was designated pEGFP-frc and was identified by restriction-enzyme digestion and sequencing. Human embryo kidney 293 cells were transfected with pEGFP-frc, then RT-PCR and Western blotting were performed to detect the expression of frc gene. The length of frc gene was found to be 1287 bp, and the homology of nucleotides and amino-acid residue with the sequence in GenBank was 95.88% and 99.07%. Bright green fluorescent light could be observed in 293 cells transfected with the pEGFP-frc. frc mRNA and fusion protein FCoAT-EGFP were detected in the cells. It is concluded that frc gene cloned from the Oxalobacter formigenes in the intestines of Chi- nese people can be expressed in eucaryotic 293 cells and keep its enzyme activity.     

硬、软性输尿管镜结合治疗内支架管管周继发多发结石9例临床分析

目的探讨硬、软性输尿管镜结合在输尿管内支架管管周继发多发结石中的疗效及手术技巧。方法回顾性分析本院2011年01月至2014年10月9例利用硬、软性输尿管镜治疗内支架管管周继发多发结石患者的临床资料,总结手术相关技巧。结果本组9例,所有滞留的输尿管内支架管均被成功取出,继发结石均被成功碎石,其中1例支架管被分5段取出,术后第1天复查KUB或泌尿系CT,所有患者肾盂内残留结石均2mm,1月后再复查残留结石全部排出,拔管成功率及结石清除率为100%,手术时间65~115(81.0±4.8)min;术后发热3例,无其他手术相关并发症发生。结论硬、软性输尿管镜结合治疗输尿管内支架管周继发多发结石具有手术时间短、患者损伤小,并发症少、拔管成功率及结石清除率高等优点,可以作为手术治疗输尿管内支架管管周继发多发结石的首选。     

精囊炎伴精囊结石患者病因初步分析

目的:通过对精囊结石标本进行成分分析,初步探讨精囊结石患者的致病因素。方法:回顾性分析6例反复血精且盆腔CT平扫提示精囊结石患者的临床资料。患者年龄28~69岁,持续或反复血精3个月至6年。6例中5例有急性尿道炎史。所有患者均接受精囊镜检查治疗术,术中证实精囊炎合并精囊结石,并以套石篮套取结石标本。利用第二代红外光谱结石成分分析仪分析6例精囊结石成分。随访患者2周至3个月,复查盆腔CT平扫观察有无生殖道结石复发。结果:CT平扫结果提示术后3个月有3例患者精囊结石复发,其中2例血精复发,其复发时间均在手术后1个月。6例精囊结石中有5例含有感染性结石成分——六水磷酸镁铵,仅有1例结石成分为二水草酸钙、一水草酸钙以及碳酸磷灰石的混合性结石。结论:6例精囊结石以六水磷酸镁铵结石最常见,推测精囊结石合并精囊炎可能的致病因素主要为感染。