采用sPD-1协同4-1BBL进行肿瘤免疫基因治疗的研究

目的探讨采用sPD-1协同4-1BBL进行肿瘤免疫基因治疗的效果及相关的免疫学机制。方法以不同剂量的H22肝癌细胞接种于BALB/c小鼠右后腿肌肉内,建立小鼠肿瘤模型;采用可溶性PD-1 (sPD-1)和4-1BBL真核表达质粒体内转染进行基因治疗;观察接种不同剂量肿瘤细胞、不同治疗时间小鼠的成瘤率及肿瘤治疗效果;RT-PCR检测肿瘤微环境中免疫调控相关基因的表达;组织切片检测肿瘤细胞浸润肌肉组织的组织学变化;流式细胞仪检测脾脏细胞毒性T细胞(CTLs)的杀瘤效率。结果转染4- 1BBL/sPD-1基因治疗后,接种低剂量(1×10~4个/ml)H22肿瘤细胞的小鼠肿瘤生长完全受到抑制;接种高剂量(1×10~5个/ml)H22肿瘤细胞的小鼠肿瘤也受到显著抑制。通过延长基因治疗,荷瘤小鼠的成瘤率随着治疗时间的延长逐渐递减,至8周时成瘤率为0;基因治疗不仅促进IFN-γ和IL-2基因表达上调,而且也使TGF-β、IL-10的表达下调;瘤组织中CD8~ T淋巴细胞数量增多和脾淋巴细胞的杀瘤效率显著增加。结论利用体内存在的少量肿瘤可作为抗原刺激淋巴细胞的激活;基因治疗适用于对手术、化疗、放疗后体内残存的少量肿增细胞的清除;当体内存在大量肿瘤细胞时,适当延长基因治疗时间可获得较好的治疗效果。     

抗原表位定向选择的人源抗TNF-αFab的鉴定

目的对通过抗原表位定向选择技术（ＥＧＳ）所筛选到的２株人源化ＴＮＦ－α抗体Ｆａｂ段进行分析鉴定。方法测定可变区基因的序列,用亲本鼠单抗Ｚ８进行竞争ＥＬＩＳＡ,用Ｌ９２９细胞检测其体外中和ＴＮＦ－α的活性,并用硫氰酸铵洗脱法比较与亲本鼠单抗的亲和力。结果基因测序表明２株抗体ＶＨ相同,属人ＶＨⅠ亚群;Ｖκ分别属人ＶκⅠ、ＶκⅢ亚群;竞争抑制实验表明所获人源抗体片段与亲本鼠源抗体是针对ＴＮＦ－α的同一抗原表位;体外中和实验证明此抗体片段能中和ＴＮＦ－α对Ｌ９２９细胞的毒性;该抗体片段的亲和力略低于原鼠单抗Ｚ８。结论用ＥＧＳ方法获得的人源抗体片段基本保持了原鼠单克隆抗体Ｚ８的特性     

肾上腺支气管源性囊肿3例报道并文献复习

目的 探讨肾上腺支气管源性囊肿的起源、发病特点、影像学和病理特征以及治疗方法。方法 结合文献复习,回顾性分析2008年1月—2015年3月南京医科大学附属南京医院(南京市第一医院)泌尿外科收治的3例肾上腺支气管源性囊肿患者的临床资料,其中男1例、女2例,囊肿均为偶然发现,无明显临床表现。CT检查囊肿位于左侧后腹腔肾上腺部位;尿醛固酮稍高。3例患者均在全身麻醉下行腹腔镜肾上腺肿瘤切除术。结果 3例患者术后均恢复良好,无相关并发症发生,切口愈合佳,痊愈出院。术后病理诊断:肾上腺支气管源性囊肿,其中1例合并囊肿周围炎症。3例患者分别随访6、12、24个月,腹部CT平扫提示囊肿均未复发。结论 肾上腺支气管源性囊肿较为罕见,误诊率高。CT检查可见肾上腺部位的囊性占位,表现为等密度或高密度,缺乏特异性。肾上腺支气管源性囊肿术前确诊困难,病理学检查为确诊的主要方法;腹腔镜下囊肿切除为现阶段治疗肾上腺支气管源性囊肿的首选方法。     

46,XX,t(10;13)(p10;p10)伴死胎、畸形儿一例

患者　女,26岁,表型正常,身体健康。婚后孕2胎,第1胎于停经60天,B超提示胎停育,行清宫术。第2胎足月,胎死宫内,娩出后发现胎儿为多发畸形:唇腭裂、手脚畸形、生殖器发育不良等。夫妇非近亲结婚,孕期无有害物质接触史及疾病史。家系调查:其母孕4产4,有2个姐姐,1个弟弟,表型及生育史均正常。细胞遗传学检查:取夫妇外周血常规培养制备染色体,G显带分析,患者核型为46,XX,t(10;13)(10pter→10p10∷作者单位:030001太原,山西医科大学第一医院妇产科医学遗传研究室13p10→13pter;10qter→10q10∷13q10→13qter)。丈夫核型正常。讨论　经家系调查,…     

从半合成噬菌体抗体库中筛选抗角蛋白人抗体

目的：从半合成噬菌体抗体库中筛选人源性抗角蛋白抗体并进行鉴定。方法：以表皮角蛋白为抗原,通过吸附－洗脱－扩增过程从半合成噬菌体抗体库中筛选特异性抗角蛋白抗体,对其抗原结合活性的序列进行分析鉴定。结果;经过４轮筛选,获得２０个能与角蛋白结合的阳性克隆,其中可产生特异性抗角蛋白抗体的克隆１８个。经ＤＮＡ指纹分析,判断所获克隆分别包含４个不同的Ｆａｂ段基因。     

鼻内镜手术结合鼻后下神经和筛前神经丛集区及下鼻甲低温等离子射频消融治疗常年性变应性鼻炎

目的:探讨鼻内镜手术结合低温等离子射频消融技术治疗常年性变应性鼻炎疗效。方法:对69例药物治疗不能控制症状的常年性变应性鼻炎,采用鼻内镜行鼻中隔粘膜下矫正术,低温等离子射频消融射频鼻后下神经和筛前神经丛集区及下鼻甲。结果:术后3个月:显效91.3%(63/69),有效8.7%(5/69),总有效率100%;术后1年:显效87%(60/69),有效7.2%(5/69),无效5.8%(4/69),总有效率94.2%(65/69);术后2年:显效82.6%(57/69),有效8.7%(6/69),无效8.7%(6/69),总有效率91.3%(63/69)。与单纯行鼻中隔粘膜下矫正术对照组比较,术后1年、2年总有效率(P<0.01)显著提高,均有统计学意义。结论:鼻内镜手术结合加低温等离子射频消融技术治疗常年性变应性鼻炎,具有术区定位准确,疗效好,副作用少等优点。     

人工流产手术200例患者的心理干预

目的探讨心理干预在人工流产手术过程中的效果。方法把200例人工流产手术患者分为手术前及手术后实验组和对照组给予心理干预措施,比较两组护理效果。结果在人工流产手术过程中实验者心理指标变化焦虑比均低于对照组,差异有统计学意义。结论对人工流产手术过程中积极给予心理干预措施,有利于促进患者身心健康,促进整体护理水平的提高,值得推广应用。     

HTLV-1 Tax 蛋白对T细胞中HMGB1调控的影响

目的探讨人T淋巴细胞白血病1型病毒（human T-cell leukemia virus 1,HTLV-1）Tax蛋白对人高迁移率族蛋白1（ high mobility group box 1,HMGB1）基因转录调控的影响。方法提取TaxN和TaxP细胞总RNA和蛋白质,通过real-time PCR和Western blot分析HMGB1 mRNA和蛋白质的表达情况;利用脂质体介导方法,将6个含有不同长度HMGB1调控序列的pGL3-HMGB1-luc瞬时转染至TaxN 和 TaxP 细胞,观察 HMGB1基因在不同 T 细胞中的转录活性;pCMV-Tax 与 pGL3-HMGB1-luc瞬时共转染至Jurkat细胞,观察Tax蛋白对HMGB1基因的转录调控影响;染色体免疫共沉淀（ ChIP）找寻Tax蛋白影响HMGB1基因转录调控的区段。结果 TaxP细胞中HMGB1 mRNA和蛋白质表达水平高于TaxN细胞。 TaxN和TaxP细胞中HMGB1调控趋势基本相似,均表现出3号质粒（pHLuc3,含有-504～＋83 HMGB1区段）的相对荧光素酶活性（HMGB1/neo）最高,但是6号质粒（含有-1163～＋83 HMGB1区段）却表现出 TaxP 细胞 HMGB1的转录活性明显高于 TaxN 细胞。pCMV-Tax与pGL3-HMGB1-Luc报告基因共转染到Jurkat细胞也显示,6号质粒（pHLuc6）中Tax促进HMGB1基因的转录。 ChIP分析证实了Tax蛋白可能富集在HMGB1的-1163～-1043区段。结论-504～-383可能是HMGB1基因转录激活的关键启动子区,Tax蛋白可能富集在HMGB1的-1163～-1043区段促进HMGB1基因转录。     

综合医院门诊患者神经症研究进展

神经症,旧称神经官能症,是一组神经机能性疾病的概括,通过现有的各种理化检查和实验设备,已除外器质性病变之后的功能性疾病[1].自1980年以来,神经症流行病学大规模调查陆续展开,世界卫生组织根据各国的调查资料推算,人口中罹患神经症者约为重性精神病的5倍.当前世界精神卫生工作面临着很大的挑战,神经症各亚型占所有精神疾病花费的1/3,所占费用负担较大,其中有将近2/3的花费用在劳动力丧失所导致的间接花费.近年来,随着社会、经济的快速发展,日益激烈的竞争给患者带来很大的痛苦,神经症已成为门诊患者中常见的疾病之一.     

自闭症谱系障碍的遗传因素解析及干细胞模型研究进展

自闭症谱系障碍(ASD)是一种具有明显遗传倾向的神经发育障碍疾病,其主要症状是社会交往障碍,语言交流障碍和重复刻板行为。近些年来,ASD的患病率表现为逐年上升,以儿童和青少年居多,给家庭和社会带来了沉重的教育与经济负担,全社会对于ASD的发病机制以及临床遗传检测日益关注。近些年来由于高通量测序技术的大规模应用及诱导多能干细胞技术的发展,在分子水平发现了许多新的ASD易感基因以及非编码突变,基于这些突变建立了新的ASD遗传检测手段;同时也借助ASD病人来源的诱导多能干细胞进行了发病机制的深入研究。本文将从ASD相关的基因组变异、遗传检测及ASD干细胞模型研究三方面的进展进行综述,希望进一步提高全社会对ASD的发病机制及遗传特征的认识,从而更有效地预防和治疗ASD。