围手术期肺癌患者血浆特异蛋白质的筛选

肺癌作为威胁全世界人类健康的重大疾病,其死亡率高达13%,且呈逐渐上升趋势[1]。虽然在常见肿瘤标志物中肺癌标志物最多,其中包括蛋白质、内分泌物质、酶、肽类和各种抗原物质,但总的来说均缺乏特异性,只能作为观察病情变化的参考指标[2]。我们应用表面加强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测肺癌及对照组血浆标本,以期寻找高表达的差异蛋白质。1资料与方法1.1资料肺癌患者32例,男28例,女4例;年龄31~75岁,均经手术证实为非小细胞肺癌。临床分期:Ⅰ期14例,Ⅱ期8例,Ⅲ期9例,Ⅳ期1例。病理类型:腺癌14例,鳞癌11例,腺鳞癌7例。…     

组织芯片技术检测蛋白激酶C-α蛋白在肺癌组织中的表达

背景与目的:蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)在癌变过程中的作用使其成为肿瘤治疗的潜在重要靶点,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中存在PKC-α的异常表达和活性增高。本研究探讨组织芯片技术检测PKC-α蛋白在肺癌中的表达及其意义。方法:应用免疫组织化学SP方法检测肺癌组织芯片中PKC-α蛋白的表达,其中肿瘤组织182例,癌旁组织18例。182例肿瘤组织中,NSCLC为160例,SCLC为22例;Ⅰ期102例,Ⅱ～Ⅲ期80例。结果:PKC-α蛋白在182例肺癌组织中的表达率为48.3%(88/182),而18例癌旁组织的表达率为16.7%(3/18)(P<0.01);PKC-α蛋白在NSCLC组织中的表达率(53.1%)明显高于在SCLC中的表达率(13.6%),差异有显著性(P<0.01);而PKC-α的表达在腺癌及鳞癌之间无明显差异(P>0.05);PKC-α的表达与患者的性别、年龄等因素无明显相关;PKC-α的表达与NSCLC特别是腺癌的临床分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05),而与SCLC的临床分期、淋巴结转移无明显相关;PKC-α的表达与腺癌的分化程度密切相关(P<0.01),而与鳞癌的分化程度无明显相关。结论:在NSCLC组织中存在PKC-α的高表达,PKC-α的表达在NSCLC特别是腺癌的浸润、转移和发展中具有重要作用。     

复方丹参滴丸对自发性高血压大鼠血管壁重建的干预及可能机制

目的 研究早期、长期辅助运用复方丹参滴丸对自发性高血压大鼠血管壁重建的干预及可能机制.方法 10周龄自发性高血压大鼠48只随机分成6组:治疗前对照组、阴性对照组、络活喜治疗组、复方丹参滴丸后期治疗组、复方丹参滴丸早期治疗组和复方丹参滴丸长期治疗组,检测胸主动脉壁厚度和血管壁平滑肌细胞增长率,以及基质金属蛋白酶2、内皮素1和层粘连蛋白相对表达水平.结果 与复方丹参滴丸早期治疗组比,复方丹参滴丸长期治疗组血管平滑肌细胞增长率明显减少,而复方丹参滴丸后期治疗组则明显增加.在降压治疗(络活喜)基础上加用复方丹参组其内皮素1、基质金属蛋白酶2表达均有不同程度减少,而层粘连蛋白增加,且出现时间在血管平滑肌细胞增长率变化之前.结论 在有效降压治疗基础上早期、长期联合运用复方丹参滴丸可能通过产生生物学效应(基质金属蛋白酶2和内皮素1表达减少,层粘连蛋白表达增加)来遏制因此而产生的力学效应(血管平滑肌细胞增长率),从而改善血管壁的重建和增厚.     

原位PCR技术在检测非小细胞肺癌p16基因中的应用

原位ＰＣＲ是近年来建立的新技术，我们应用该技术在非小细胞肺癌中检测抑癌基因ｐ１６的表达，取得较满意的结果。１　材料和方法１１　组织标本　收集本院胸外科手术切除标本８３５例，均经病理证实，其中腺癌２１例，鳞癌１４例。男２３例，女１２例，年龄为４３～７５岁，平均６０７岁。手术标本在恒冷切片机上制备５μｍ厚冷冻切片，贴于多聚赖氨酸处理的载玻片上，然后以４％多聚甲醛固定１０ｍｉｎ，空气干燥后保存在－２０℃。１２　试剂和仪器　ｐ１６基因ｅｘｏｎ２引物由美国ＣｙｂｅｒｓｙｎＢＪ合成，引物序列为〔１〕…     

端粒酶与p53、p16基因在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的研究端粒酶与p53、p16基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其意义.方法应用SP法免疫组化技术和TRAP法分别检测40例肺癌组织中端粒酶和p53、p16基因的表达.结果端粒酶及p53、p16基因在NSCLC中的阳性率分别为92.5%、37.5%和66.7%;p53基因阳性表达率与NSCLC及病理分期显著相关(P＜0.05).p16基因阳性表达率与性别、年龄、病理分期、吸烟史、组织学类型和分化程度无显著相关(P＞0.05).端粒酶活性与年龄呈负相关,并与p53基因表达情况和病理分期有关(P＜0.05).结论端粒酶和p53基因的表达与NSCLC的病期进展有关.     

肺癌患者血中循环癌细胞端粒酶活性的表达及意义

目的：检测肺癌患者外周血循环癌细胞端粒酶活性变化与临床资料的关系。方法：外周血经Ficoll梯度离心分离单个核细胞组份，再应用PCR－TRAP法检测49例肺癌化疗前患者外周血中端粒酶活性。结果：49例肺癌患者中32例端粒酶活性明显升高。阳性率达65.3%，其中小细胞肺癌端粒酶活性表达阳性率最高而腺癌、鳞腺癌较低，同时晚期初治患者端粒酶活性明显高于复治患者。结论：端粒酶活性变化与病理类型，晚期复治病人有关，值得进一步探索。     

胃粘膜活检印片细胞DNA含量显微分光光度计检测

本文报道30例胃粘膜活检印片细胞经Feulgen染色后,采用Opton-UMSP-30型显微分光光度计检测的结果。按DNA指数及含量分布直方图分析,28例胃癌中呈非整倍体型直方图者20例(71%),且在高或中分化腺癌中占多数(13/14、92.8%);而4例粘液细胞癌均属二倍体型。胃良性病变2例也为二倍体型。胃粘膜活检印片的制备较简便。用MSP测定其细胞DNA含量可作为诊断胃癌和癌前病变的一项有用的辅助指标,有利于胃癌的早期诊断及癌前病变倾向的预测。     

手术对肺癌患者外周血中癌细胞端粒酶活性的影响

目的:检测肺癌患者手术前后外周血中癌细胞端粒酶活性,了解手术对其影响及意义。方法:应用端粒酶重复序列扩增法(PCR-TRAP)检测30例肺癌患者手术前及术后第5天外周血中癌细胞端粒酶活性,随访其预后。本院同期30例非肿瘤患者为对照组。结果:非肿瘤患者外周血端粒酶活性均为阴性,肺癌患者手术前后阳性率分别为60%(18/30)及50%(15/30),手术前后阳性率无显著差异(P>0.05),手术后有6例端粒酶活性上升,其中4例存活不足1年;15例端粒酶活性明显下降(P<0.01),其中6例转阴性,15例存活均超过1年。结论:肺癌患者外周血端粒酶活性可能对诊断、指导治疗、判断预后有参考价值,手术治疗能减少外周血中癌细胞。     

ERCCl表达与Ⅰ～Ⅲ A NSCLC患者术后生存及顺铂耐药的相关性

目的 分析Ⅰ～ⅢA期非小细胞肺癌(NSCLC)的切除修复交叉互补组1(ERCC1)表达水平与患者术后生存期的关系,探讨ERCC1表达与患者预后及顺铂耐药的相关性.方法 收集1992年2月～1994年1月及2002～2005年经根治性手术并获长期随访的152例Ⅰ-ⅢA期NSCLC患者的临床资料.Ⅰ期NSCLC患者术后随机分成不化疗组和化疗组;Ⅱ、ⅢA期术后均采用以顺铂为主的联合化疗方案.免疫组化法检测所有肿瘤组织标本的ERCC1表达.Kaplan-Meier法计算生存率,Log-rank检验比较差异性,并行Cox模型多囚素分析.结果 Ⅰ期NSCLC患者ERCC1高表达者,不论化疗与否其预后都明显好于ERCC1低表达者.其中ERCC1高表达组1、3、5年生存率分别为100.00%、91.30%、86.74%,低表达组则为96.43%、60.71%、57.14%(P=0.0058).不同于Ⅰ期NSCLC,Ⅱ～ⅢA期NSCLC术后化疗患者ERCC1低表达则有较好预后.其中Ⅱ期ERCCI低表达者中位生存期(MST)为60.0 月,而高表达者仅为25.5月(P=0.0442);ⅢA期ERCC1低表达组MST为41个月,高表达组仅为24个月(P=0.0203).结论 ERCC1表达对Ⅰ～ⅢA NSCLC术后患者生存的影响存在双相效应.在Ⅰ期NSCLC中,ERCC1高表达是预后良好的独立指标;而对Ⅱ～ⅢA期NSCLC术后化疗患者,ERCC1高表达更多体现的是对铂类耐药;故采用铂类为基础的辅助化疗可能将无助提高术后长期生存.