顽固性心力衰竭37例护理体会

2002年1月-2004年12月，我院收治顽固性心力衰竭患37例，给予精心治疗和护理，效果满意。现将护理体会报告如下。     

房间隔缺损行封堵术的护理

房间隔缺损(ASD)是常见的先天性心脏病，以往主要采取外科手术治疗，创伤大，恢复慢。目前房间隔缺损可以采用介入治疗技术将缺损闭合，该方法具有手术时间短(1h左右)、不开胸、创伤小、不留任何瘢痕、恢复快等优点，得到广泛应用。我院自2002年4月开展该项技术以来，为4例房间隔缺损患者行封堵术，取得满意效果，现将护理体会总结如下。     

Snail及N-cadherin蛋白在骨肉瘤中的表达及其与预后的关系

目的观察Snail及N-cadherin蛋白在骨肉瘤中的表达,探讨其在骨肉瘤发生发展、浸润转移的作用及其与预后的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测38例骨肉瘤组织、20例骨软骨瘤组织中Snail及N-cadherin蛋白的表达。结果(1)Snail、N-cadherin蛋白在骨肉瘤中表达均高于它们在骨软骨瘤组织中的表达,其差异有统计学意义(χ²=27.375,P<0.01;χ²=21.849,P<0.01);(2)Snail和N-cadherin蛋白与骨肉瘤的软组织浸润、Ennecking分期、肺转移有关(P<0.05), 而与性别、年龄、部位、Dahlin类型无关(P>0.05);Snail、N-cadherin蛋白在骨肉瘤中的表达呈正相关(r=0.421,P<0.05);(3)骨肉瘤中Snail、N-cadherin蛋白阳性患者生存率均明显低于阴性患者,其差异均有统计学意义(P<0.05)。结论骨肉瘤组织中Snail蛋白及N-cadherin蛋白的高表达,提示它对骨肉瘤的发生发展和浸润转移起重要作用并预示患者预后不良。     

丹参山楂有效组分配伍抗动脉粥样硬化的实验研究

目的: 探讨丹参山楂有效组分不同配伍抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的作用,以期获得较优组合. 方法: 采用高脂饲料喂养,腹腔注射维生素D₃及炎症诱导的方法建立AS大鼠模型.对丹参水溶性组分(DSA)、山楂水溶性组分(SZA)及丹参脂溶性组分(DSL),以3个剂量水平(大-中-小,1-2-3)进行正交实验,观察不同配伍对AS大鼠血脂水平、氧化应激、内皮功能及炎症反应的影响.采用主成分分析、聚类分析对试验结果进行多目标优化. 结果: 与模型组相比,各配伍样品均显示了降脂、抗氧化、改善内皮功能及抗炎等作用,方差分析表明DSA₂-SZA₂-DSL₁,DSA₃-SZA₂-DSL₁,DSA₃-SZA₃-DSL₃, DSA₃-SZA₁-DSL₁分别为降脂、抗氧化、内皮保护、抗炎作用的较优组合;多目标优化结果显示DSA₂-SZA₁-DSL₂是抗AS的较优组合. 结论: 丹参山楂有效组分不同配伍均可在一定程度上干预大鼠AS的进程,不同配伍作用方式的侧重不同.     

软硬食性对生长早期小鼠颞下颌关节髁突软骨中Aggrecan与ADAMTS-5表达的影响

目的 探讨软硬食刺激对聚集蛋白聚糖Aggrecan和ADAMTS-5在生长发育期小鼠颞下颌关节髁突软骨中表达的影响。方法 20只3周龄小鼠随机分成硬食组和软食组,分别给予软食和硬食4周,通过HE染色,实时PCR 检测Aggrecan与ADAMTS-5 mRNA变化以及ADAMTS-5免疫组化检测ADAMTS-5阳性软骨细胞变化。结果 软食组髁突软骨厚度要比硬食组薄;软食组Aggrecan mRNA水平比硬食组降低;ADAMTS-5 mRNA水平及ADAMTS-5阳性软骨细胞软食组要高于硬食组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 软食刺激可能促进髁突软骨ADAMTS-5的基质降解功能,而硬食刺激可能增强髁突软骨基质Aggrecan的合成作用。     

细胞培养与PCR法检测生殖器疱疹病毒的对比研究

目的:比较不同方法检测生殖器疱疹病毒感染的效率。方法:采用病毒培养和PCR法检测疑为生殖器疱疹病毒感染者标本60例,并用PCR作病毒分型。结果:根据病史及临床表现确诊的生殖器疱疹患者标本60例中,病毒培养法阳性36例,阳性率60%(36/60);PCR检测单纯疱疹病毒(HSV)阳性45例,阳性率75%(45/60),和病毒培养相比,差异非常显著(χ2=26.76,P<0.01);PCR分型结果显示阳性标本均为单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)。水疱和脓疱标本的病毒培养和PCR检测阳性率均较高(80.0%~93.3%),糜烂、结痂、斑丘疹标本检测中PCR阳性率(20.0%~66.7%)高于病毒培养(0~33.3%)。结论:对疑为生殖器疱疹患者作病原学诊断,采集水疱、脓疱标本进行病毒分离或PCR检测较佳。     

一个视网膜色素变性家系的突变鉴定及产前诊断

先证者(图1,Ⅲ1)女,34岁,3年前出现夜盲症状,近1年加重,眼底检查可见较多色素沉着。先证者的母亲及姨妈均存在夜盲伴视力下降10余年,但未行眼部检查,家系其他成员无类似症状。先证者2年前曾因上述家族遗传病史放弃妊娠1次。本次妊娠后为求生育健康后代,要求进行产前诊断。     

MRSA耐药相关TG-TPase嵌合基因的原核表达与纯化

目的 设计、构建耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)耐药相关TGTPase嵌合基因,进行原核表达、纯化探索,为进一步利用其酶学活性建立抑制剂筛选系统奠定基础.方法 通过引物设计,从盐平板法筛选的MRSA菌株中分别克隆PBP2的TG基因片段和PBP2a的TP片段,分别克隆入T载体,对阳性重组子进行酶切/再连接,构建TG-TPase嵌合基因,经核苷酸测序鉴定正确的嵌合基因再亚克隆到pET22b,构建表达载体,转化Rosetta(DE3)plysS,用LPTG进行诱导表达,并对表达的蛋白进行SDS-PAGE、质谱和Westem blotting鉴定.小量发酵重组菌,对嵌合基因表达产物进行初步纯化.结果 从13株临床分离的金葡菌中筛选出2株高耐药性MRSA菌株,用PCR法从中成功地克隆到青霉素结合蛋白PBP2的TG片段和PBP2a的TP片段,构建了TG-TPase嵌合基因及其原核表达载体,并在大肠埃希菌中表达,产量达菌体总蛋白的43%.融合蛋白纯化分析表明,嵌合蛋白以包涵体形式存在,在变性条件下经Ni-NTA亲和柱纯化,纯度达90%以上.结论 成功设计并构建了耐药性金葡菌TG-TPase嵌合基因及其重组表达工程菌,为进一步利用其酶学活性进行抗耐药性金葡菌抑制剂的筛选奠定基础.     

抗耐药性金黄色葡萄球菌嵌合药靶的设计与构建

目的设计耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药相关TG-TPase嵌合基因,进行分子建模及三维结构观察,并构建了原核表达质粒,进行嵌合基因的表达、纯化,为进一步利用其酶学活性建立抑制分子筛选系统奠定基础。方法运用Bioedit和DNAStar软件对MRSA耐药性相关转糖基酶(TGase)和转肽酶(TPase)活性片段序列和活性区结构特点及其活性发挥进行分析,设计TG-TPase嵌合药靶,并通过引物设计从MRSA菌株中克隆PBP2的TG基因片段和PBP2a的TP基因片段,进一步用引物延伸法、酶切连接等分子生物学操作构建TG-TPase嵌合基因并亚克隆至原核表达质粒pET30b中,转化Rosetta(DE3)plysS大肠埃希菌,用IPTG进行诱导表达,并小量发酵重组菌,对嵌合基因表达产物进行初步纯化和Western blotting鉴定。结果设计的TG-TPase嵌合药靶包括PBP2分子的TGase活性区、绞链区的N-端,PBP2a分子绞链区C-端及完整的TPase结构域,融合基因为1 935 bp,编码645个氨基酸,等电点为7.10,相对分子质量72 000。用PCR法从MRSA菌株中成功克隆了青霉素结合蛋白PBP2的TG片段和PBP2a的TP片段,构建了TG-TPase嵌合基因及其原核表达质粒,并在大肠埃希菌中表达出药靶蛋白,表达结果与预期设计相符合。融合蛋白纯化分析表明,融合蛋白以包涵体形式存在,在变性条件下经Ni-NTA亲和柱纯化,纯度达90%以上。结论成功设计、构建了耐药性金葡菌TG-TPase嵌合基因及其重组表达工程菌,并对融合蛋白进行了初步纯化,为进一步利用其酶学活性进行抗耐药性金葡菌抑制剂的筛选奠定基础。     

下颈椎椎弓根螺钉技术研究进展

近年来,随着人们对下颈椎疾病认识的深入和内固定器材的发展,特别是后路椎弓根螺钉内固定系统,具有显著的二维立体内固定作用,较单纯前路和其他后路内固定的方式更为坚强,既稳定又有利于颈椎术后的骨性融合和疾病康复,减少了颈椎不稳所致的各种并发症.该内固定系统的关键技术是螺钉置入,但由于颈椎解剖关系复杂,个体间椎弓根变异性大,且与脊髓、椎动脉及神经根等重要结构毗邻,常导致螺钉置入困难,甚至引起血管、神经或脊髓等损伤,手术风险高,限制了其临床应用.