3T3L1脂肪细胞对大鼠胰岛β细胞功能障碍的影响

Objective To investigate the integrated effects of adipocytes on rat beta-cells, differentiated 3T3L1 adipocytes and rat islet cells co-culture system was established. Methods There were two groups; control group ( SD rat islet cells) and co-culture group (islet cells and 3T3L1 adipocytes co-culture system). Islet cells were obtained for determination of (1) insulin secretion and insulin content; (2) mRNA expressions of GLUT2, GCK and Kir6. 2; (3) protein expressions of IR-β, IRS-1 and their tyrosine phosphorylation leveL Results (1) At low glucose, insulin secretion of co-culture group increased compared with that of control group (0.79±0.35) ng·h-1 · ml-1 islet vs (0.38±0.09 ) ng · h-1 · ml-1 · islet, P = 0. 028 . At high glucose, insulin secretion of those two groups was almost at the same level (P =0.760). Compared with control group (2. 84 ±0.92) , stimulation index (SI, insulin release at high glucose/ low glucose) of co-culture system decreased to (1. 57 ±0. 61, P =0.04). And the insulin content of the both groups was almost at the same level (P=0.102). (2) The mRNA of GCK, GLUT2 and Kir6. 2 in co-culture group downregulated to (0. 27 ±0. 11, P = 0. 01) , (0. 34 ±0. 24, P = 0. 009) and (0.41 ± 0. 09, P = 0. 003) compared with control group (mRNA = 1). ( 3) The protein levels of IR-β, IRS-1 and their tyrosine phosphorylation decreased in co-culture system. Conclusions 3T3L1 adipocytes are involved in beta-cell dysfunction, which may facilitate the development of type 2 diabetes. The effects may be mediated by multiple pathways, which include downregulation of GSIS related gene expressions and suppression of islet cell insulin signaling.     

CDCA8和 mRNA在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨CDCA8和INCENP mRNA在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）组织中的表达及其临床意义。方法： 使用Illumina Nextbio芯片数据库分析原发性HCC组织和相应癌旁组织中CDCA8和INCENP mRNA表达情况,在癌症基因组图谱 （The Cancer Genome Atlas, TCGA）肝癌数据库中使用 RNA-Seq mRNA表达数据进行验证,并结合TCGA临床数据分析CDCA8和 INCENP mRNA表达水平与HCC患者临床病理特征及预后的关系,使用基因集富集软件分析目的基因高表达的相关通路。结果：CDCA8和 INCENP mRNA 在HCC组织中表达水平显著上调（P<0.01)。CDCA8 mRNA表达水平与HCC的组织学分级、瘤体大小、肿瘤复发、美国东部肿瘤协作组织（ECOG）评级、血清AFP水平、肿瘤基因拷贝数变异显著相关 (P<0.05) ;INCENP mRNA表达水平与HCC的组织学分级、肿瘤复发、ECOG评级、血清AFP水平、肿瘤基因突变总数和肿瘤基因拷贝数变异显著相关(P<0.05)。CDCA8高表达组患者的 OS 及TFS 显著低于CDCA8低表达组患者 (P<0.01);INCENP高表达组患者的OS显著低于INCENP低表达组患者(P<005),而TFS无显著差异（P>0.05）。多因素分析显示,CDCA8 mRNA 水平是预测HCC患者不良预后的独立因素 (P<001) 。基因集富集分析表明,CDCA8和INCENP可能在细胞周期之外的其他生物学信号通路中发挥一定作用。结论：CDCA8和 INCENP mRNA在HCC组织中呈现显著高表达。CDCA8可能成为HCC预后的独立风险因素和新的治疗靶点。     

大肠癌组织中抑癌基因APC突变的研究

为了解肿瘤抑制基因ＡＰＣ基因在大肠癌中突变的规律。方法应用聚合酶链反应┐单链构象多态性技术（ＰＣＲ┐ＳＳＣＰ）对３０例人大肠癌组织ＡＰＣ基因１５号外显子的三个区１５┐６、１５┐７、１５┐８进行了检测。检测步骤主要包括人基因组ＤＮＡ提取、ＰＣＲ反应扩增及ＰＣＲ产物的ＳＳＣＰ分析。结果检查结果显示在第１５┐６及１５┐７片段上共１０例发生了突变，突变率为３３．３％。突变的１０例中有８例发生于１５┐７外显子片段，占突变总数８０％（８／１０），２例发生于１５┐６片段，占突变总数的２０％（２／１０）。结论证明我国大肠癌患者中存在着ＡＰＣ基因的突变，且１５┐７片段是突变集中区。     

EB病毒BHRF1基因表达对鼻咽癌细胞增殖能力的影响

为了解ＥＢ病毒编码基因ＢＨＲＦ１的表达对鼻咽癌细胞增殖能力的影响，通过构建携有ＢＨＲＦ１的高表达载体，并转染低分化鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２细胞，观察转染后的癌细胞在缺乏营养条件下增殖能力的改变。结果发现：ＢＨＲＦ１的表达能抑制增殖核抗原的表达，并促进其在缺乏营养条件下生存能力。提示ＥＢ病毒编码的ＢＨＲＦ１基因可能与鼻咽癌的发生和发展过程有关。     

用PCR—SSCP银染方法检测人原发性胃癌APC基因点突变

在PCR基础上建立了APC基因10个片段的SSCP检测体系,对影响SSCP的各种条件进行了探讨,发现主要的影响因素是电泳温度和凝胶浓度。用SSCP银染法检测人胃癌组织中APC基因的点突变,在20例中,5例有异常电泳条带(25%),表明在相应的DNA片段中发生了突变。5例突变均位于第15号外显子,其中2例位于第4号片段(密码子998-1141);3例位于第6号片段(密码子1260-1410)。研究结果表明,APC基因突变和胃癌的发生有关。PCR-SSCP银染法快速、简便,特别适用于对大样本基因点突变的检测。     

胆管癌p53基因突变和蛋白表达的研究

目的了解胆管癌ｐ５３基因突变和蛋白表达的变化。方法应用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染技术检测胆管癌中ｐ５３基因突变，并用亲和素－生物素－过氧化物酶复合物（ＡＢＣ）免疫组织化学染色方法检测胆管癌ｐ５３蛋白的表达。结果１１例胆管癌中，３例胆管癌样品ＰＣＲ－ＳＳＣＰ单链电泳带迁移异常，依据ＤＮＡ单链构象与分子电泳迁移的关系，胆管癌ｐ５３基因５～８外显子的突变率为２７％；６例有ｐ５３蛋白异常表达，阳性率为５５％。结论导致ｐ５３蛋白异常表达的ｐ５３基因突变是胆管癌的一种分子结构改变，可能在胆管癌的发生和发展中起着一定的作用。     

Duchenne型肌营养不良病高危胎儿的产前基因诊断

应用ＤＮＡ分子杂交和１８对引物的多重聚合酶链反应（ｍＰＣＲ）技术，对１０例Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型肌营养不良病（ＤＭＤ）的高危胎儿进行产前基因诊断。结果：７例男性胎儿中有３例存在与先证者相同的基因缺失，诊断为ＤＭＤ患儿，均行人工流产术。另４例为正常男性胎儿。３例女性胎儿，１例为突变基因携带者，２例为正常胎儿。以上１０例均经出生后复检证实。提示：ｍＰＣＲ技术简单、快速、特异性高，是一种很好的基因缺失筛查方法。本研究还对ＤＭＤ高危胎儿产前诊断的步骤进行了探讨。     

Duchenne型肌营养不良儿童心电图改变及其临床意义的探讨

研究41例Duchenne型肌营养不良(DMD)儿童和101名正常同龄儿童的心电图,经比较分析,DMD组心电图指标异常24项,分别涉及40例患儿,其中主要改变是V_1导联高R波,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、aVL、aVF、V_(5-3)导联深窄Q波及ST-T改变、Q-T间期延长和窦性心动过速等。结合患儿的心缩间期测量结果发现,心电图异常越显著,改变项目越多,其心功能下降越明显,提示利用心电图指标可综合估价DMD患儿的心功能状况。     

血液透析治疗流行性出血热急性肾衰18例

流行性出血热临床表现复杂 ,病情变化快 ,并发症多 ,特别是少尿型急性肾功能衰竭是导致本病死亡的主要原因。现将笔者用血液透析治疗流行性出血热合并急性肾衰的 18例报道如下。1　临床资料1.1　一般资料 :18例中男 15例 ,女 3例 ,年龄 18～ 56岁 ,血透前平均血 BUN4 6 mmol/ L,Cr96 0 μmol/ L,血钾均高于 6 .0 mmol/ L,血小板 (2 4～ 6 0 )× 10 9/ L,少尿 3天内透析者 11例 ,4～ 7天者 6例 ,7天以上者 1例。1.2　方法 :凡符合以下条件之一者即开始血透治疗 ,1少尿或无尿≥ 2天 ;2 BUN≥ 35.7mmol/ L,SCr≥530 .4 μmol/ L;3血钾≥ …