一种肠肌间神经丛胶质细胞无血清原代培养法的建立

目的 肠胶质细胞（enteric glial cell,EGC）在肠道多种生理及病理过程的调节中发挥重要作用,为了深入研究EGC的功能,排除在体及组织水平中神经体液因素的影响,获得一种简便高效的原代EGC分离培养方法非常必要。方法 取小鼠结肠纵行肌-肌间神经丛组织,经消化分离肠胶质细胞,采用含血清和无血清培养基交替培养法去除成纤维细胞后常规传代;运用细胞免疫荧光染色法检测原代EGC纯度;运用胞内钙成像技术实时观察EGC内Ca²⁺浓度（[Ca²⁺]i）变化以检测细胞活性。结果 每次实验获得的EGC至传代前细胞量可达约6.8×10⁵;无血清培养后成纤维细胞污染显著降低;胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）阳性的EGC占细胞总数的98.44%±1.07%,钙结合蛋白S100β阳性EGC占93.61%±3.16%,GFAP与S100β双阳性EGC占93.09%±2.99%;96.00%±4.00%的细胞在ATP诱导下发生胞内钙瞬变。结论 结合无血清培养可有效去除成纤维细胞污染,得到纯度较高、活性较好的肌间神经丛EGC。     

髂耻足三联试验与传统方法诊断骶髂关节功能障碍的效果对比分析

目的 通过与传统诊断方法的对比分析,探讨髂耻足三联试验在骶髂关节功能障碍诊断中的效果及临床意义。方法 选择2018年6月至2019年3月门诊骶髂关节功能障碍患者（病例组）30例和正常对照组30例,分别采用髂耻足三联试验和传统诊断方法进行骶髂关节功能障碍相关检查,最后以骶髂关节注射术来确定诊断。对比两种诊断方法对骶髂关节功能障碍诊断的敏感度、特异度、受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic,ROC）曲线下面积以及敏感度差异。结果 病例组患者和对照组受试者比较,性别（χ²=0.287,P=0.592）、年龄（t=0.400,P=0.691）差异无统计学意义。传统方法诊断骶髂关节功能障碍的敏感度为33.3%,特异度96.7%,ROC曲线下面积为0.650（P=0.046）;髂耻足三联试验诊断骶髂关节功能障碍的敏感性为76.7%,特异性为96.7%,ROC曲线下面积为0.867（P<0.001）。两种诊断方法的诊断敏感度差异有统计学意义（χ²=11.38,P=0.001）。结论 骶髂关节功能障碍的髂耻足三联试验,具有更高的诊断敏感性,对于怀疑骶髂关节功能障碍的腰腿痛患者应进行全面的专科体格检查,早期诊断,避免漏诊,降低腰椎术后失败综合征的发生风险。     

异基因造血干细胞移植治疗儿童急性髓系白血病的临床观察

目的 总结分析异基因造血干细胞移植（allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT）治疗儿童急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）的临床疗效,发现可能影响预后的相关因素。方法 收集2006年1月至2016年1月首都医科大学附属北京儿童医院血液肿瘤中心确诊为AML并进行allo-HSCT治疗的病例,采用Kaplan-Meier生存曲线评估患者的总生存率（overall survival,OS）,采用Log-rank检验进行不同组别比较。多因素分析采用Cox回归法分析影响预后的相关因素。结果 共收集46例病例,中位随访时间27个月。存活31例,15例死亡,8例复发。5年OS为（61.1±8.7）%,中位生存时间为77.3个月,5年累积复发率为（16.0±6.0）%。Log-rank检验结果显示前期后期不同移植方案、移植前缓解状态、缓解次数、不同供者来源、是否合并移植物抗宿主病在对OS影响上差异无统计学意义（P>0.05）。多因素分析显示,合并髓系肉瘤和复发是影响患者预后的危险因素（P<0.05）。结论 异基因造血干细胞移植是治疗AML尤其是难治/复发AML的有效治疗手段,随着移植方案的改良及支持治疗的发展,生存率逐年提高。合并髓系肉瘤及复发是影响AML移植治疗预后的重要不良因素。     

经腹三维超声产前诊断胎盘植入的临床应用价值

目的 探讨经腹三维超声在胎盘植入产前诊断中的应用价值。方法 选择在首都医科大学宣武医院就诊具有胎盘植入的高危因素的病例34例,其中31例于产前进行三维超声及磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）检查,分析其影像学表现及诊断价值。结果 三维超声的敏感度为77.8%、特异度为68.8%及准确性74.2%均略优于MRI的敏感度50.0%、特异度60.0%及准确性54.8%,三维超声与临床诊断的标准具有较好的一致性（Kappa值=0.617）,胎盘后方低回声带消失（77.8%）、胎盘基底部血流增多（66.7%）在胎盘植入病例声像图中较为多见。三维超声和MRI联合诊断胎盘植入的准确性为87.1%,明显高于三维超声（74.2%）及MRI （54.8%）单独诊断的准确性。结论 三维超声对胎盘植入诊断具有优势,联合MRI检查,可明显提高对胎盘植入的诊断准确性。     

颈动脉蹼的超声表现多样性与病理对照研究

目的 与病理进行对照,观察并总结颈动脉蹼的长度、厚度、回声,凸向管腔内的走行方向及颈动脉蹼伴斑块或血栓形成的声像图特征等,减少漏诊及误诊。方法 2018年6月至2019年5月,首都医科大学附属北京天坛医院拟行颈动脉内膜剥脱术的患者,术前行超声检查。常规超声观察并记录颈动脉狭窄处声像图表现,明确是否存在颈动脉蹼,如存在颈动脉蹼样结构,观察其周围是否合并斑块及血栓形成,测量并记录颈动脉蹼回声、长度、厚度及走行方向,有无飘动,术后进行病理对照。结果 146例颈动脉内膜剥脱术患者,术后病理证实颈动脉蹼19例,其中17例颈动脉蹼底部伴斑块形成,2例颈动脉蹼伴血栓形成,其中1例血栓完全阻塞管腔,1例致管腔狭窄。与病理进行对照,术前超声正确诊断颈动脉蹼伴斑块形成16例,颈动脉蹼伴血栓形成1例,术前1例误诊为斑块表面溃疡形成,1例颈动脉蹼伴血栓形成并完全阻塞管腔漏诊,超声诊断为颈内动脉闭塞,未发现颈动脉蹼结构。结论 超声检查颈动脉蹼合并斑块或血栓形成准确率高,但需要高度认识本病及充分了解本病的大体标本及组织病理情况方能做出正确诊断。     

不同营养素对活动期溃疡性结肠炎患者肠道生物屏障的影响

目的 研究不同营养素配方对溃疡性结肠炎活动期肠道生物屏障的干预作用,探讨不同配方用于溃疡性结肠炎活动期治疗的可行性。方法 将79例活动期溃疡性结肠炎患者采用数字表法随机分为5组,常规组、肠内营养组、微生态制剂组、免疫增强剂组和微生态免疫增强肠内营养组。应用细菌培养法于治疗前后分别测定各组调查对象的大便,计数治疗前后乳酸杆菌、双歧杆菌、肠球菌、肠杆菌及酵母菌,比较各组的肠道菌群构成的差异,并观察患者病情缓解情况。结果 常规组可改善肠道菌群失调,微生态制剂组和免疫增强剂组的作用优于常规组但差异无统计学意义,肠内营养组及微生态免疫增强肠内营养组疗效均优于常规组,且差异有统计学意义,微生态免疫增强肠内营养组作用最优。结论 在活动期溃疡性结肠炎患者中应用不同营养素配方能够增强对肠道菌群失调的改善作用,进而保护活动期溃疡性结肠炎患者肠道生物屏障。     

雌激素通过介导HOTAIR表达对子宫内膜癌细胞增生及裸鼠致瘤能力的影响

目的 探讨雌激素是否通过介导HOTAIR表达对子宫内膜癌细胞增生及裸鼠致瘤能力产生影响。方法 构建慢病毒介导干扰HOTAIR表达的shHOTAIR及阴性对照shNC稳定转染的子宫内膜癌Ishikawa细胞株,qRT-PCR检测HOTAIR的敲减水平。实验细胞分为4组：对照组（Ishikawa细胞）、雌二醇（17β-estradiol,E2）组（E2+Ishikawa细胞）、E2+shNC组（E2+shNC细胞）、E2+shHOTAIR组（E2+shHOTAIR细胞）,qRT-PCR检测E2对4组细胞中HOTAIR表达的影响。构建E2作用于HOTAIR表达不同的4组Ishikawa细胞的裸鼠移植瘤模型,记录成瘤时间、成瘤率及移植瘤生长曲线,剥离移植瘤,测量体积及质量,组织切片病理学检测。结果 成功构建慢病毒介导干扰HOTAIR表达的shHOTAIR及阴性对照shNC稳定转染的Ishikawa细胞株,HOTAIR表达被有效敲减（P<0.001）;E2组细胞中HOTAIR的相对表达量明显高于对照组（P<0.001）,E2+shHOTAIR组明显低于E2+shNC组（P<0.001）;成功构建E2作用于HOTAIR表达不同的4组Ishikawa细胞的裸鼠移植瘤模型;裸鼠致瘤能力对比：E2组>对照组,E2+shNC组>E2+shHOTAIR组;E2组移植瘤的终体积（P<0.001）及终质量（P<0.001）明显高于对照组,E2+shHOTAIR组移植瘤的终体积（P<0.01）及终质量（P<0.001）明显低于E2+shNC组;移植瘤HE染色符合子宫内膜癌细胞病理学特征。结论 雌激素通过上调HOTAIR表达促进子宫内膜癌细胞的增生及裸鼠致瘤能力,有望为子宫内膜癌的治疗提供新靶点。     

C3椎板切除并重建C4-7棘突的改良单开门椎板成形术

目的 观察颈2棘突半棘肌止点保留基础上进一步改良单开门椎板成形术,观察手术疗效,探讨能否降低合并症。方法 重建改良组椎板成形术治疗脊髓型颈椎病45例,普通改良组39例,术后随诊18~24个月,对两组患者术前术后的颈椎活动度、日本骨科学会（Japanese Orthopedic Association Scoring System,JOA）评分及轴性症状严重程度进行比较评估。结果 两组颈椎活动度丢失（9.4°±4.1° vs 11.6°±7.8°）及JOA评分恢复率（57.7%vs 54.4%）比较,差异无统计学意义（P>0.05）。但比较两组术后轴性症状,其差异有统计学意义（P<0.05）。重建改良组发生率更低。结论 保留颈2棘突半棘肌止点的同时,重建颈4-7棘突能够进一步减小轴性症状的发生率。     

低氧预处理人脐带间充质干细胞治疗早发性卵巢功能不全小鼠的效果研究

目的 探索人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs）及其经低氧预处理后对早发性卵巢功能不全（premature ovarian insufficiency,POI）小鼠的治疗作用。方法 从脐带中分离、培养出hUCMSCs,利用白消安和环磷酰胺诱导形成小鼠POI模型,分别使用正常hUCMSCs和经低氧预处理的hUCMSCs对POI小鼠进行治疗。实验结束时,测量各组（n=15）小鼠血浆中雌二醇（estradiol,E2）、卵泡刺激素（follicle stimulating hormone,FSH）及抗苗勒管激素（anti Mullerian hormone,AMH）浓度,对卵巢进行组织病理学检查,计数卵泡数量。结果 经过hUCMSCs和低氧预处理hUCMSCs治疗的小鼠血浆E2及AMH浓度,与模型对照组比较,呈升高趋势;且AMH浓度差异有统计学意义（P<0.05）;与模型对照组比较,hUCMSCs和低氧预处理hUCMSCs治疗组小鼠卵巢组织中生长卵泡明显增多、闭锁卵泡明显减少（P<0.05）;卵巢颜色红润,尺寸增大,几乎没有坏死点,卵泡大、透明度好,整体来看与正常对照组卵巢状态相似;且经低氧预处理hUCMSCs治疗的小鼠,其生长卵泡和闭锁卵泡数量更趋于正常。结论 hUCMSCs移植及hUCMSCs低氧预处理后移植治疗均能够有效恢复POI小鼠的激素浓度,促进卵巢功能的恢复。     

初发轻度高血压患者内皮功能与左心室肥厚的相关性研究

目的 比较初发轻度高血压合并左心室肥厚（left ventricular hypertrophy,LVH）患者的内皮功能变化,探讨内皮功能和左心室肥厚的相关性。方法 回顾性分析2016年4月至2016年10月就诊于首都医科大学宣武医院心脏内科的初发轻度原发性高血压患者174例,根据超声心动图结果分为高血压合并左心室肥厚组和高血压不合并左心室肥厚组,比较2组患者的临床特征、内皮功能及超声心动图参数。应用Logistic回归分析左心室肥厚与内皮功能的相关性。结果 与高血压不合并LVH组比较,高血压合并左心室肥厚组的反应性充血指数更低,内皮功能障碍（反应性充血指数<1.67）的比例更高（P<0.05）。多因素Logistic回归分析显示：反应性充血指数与左心室肥厚具有相关性（OR=0.230,P=0.001）。结论 初发轻度高血压患者的内皮功能与左心室肥厚关系密切,反应性充血指数降低是初发轻度高血压患者合并左心室肥厚的重要危险因素。