大鼠脂肪干细胞复合胶原-壳聚糖-硫酸软骨素三维支架构建组织工程软骨

Objective To evaluate the character of the collagen-chitosan-chondroitin sulfate scaffold seeded with rat adipose tissue-derived stromal cells. Methods A dipose tissue were harvested from 6 weeks old Wistar rats and the stromal cells were harvested by type Ⅰ collagenase and then cultured in vitro. Type Ⅰ collagen was fully mixed with chitosan, freeze-dried and cross-linked with chondroitin sulfate, then freeze-dried again and sterilized by ethylene oxide. The pore diameter, water content, porosity of the scaffold were tested. The adipose tissue-derived stromal cells were digested, seeded into the plates, scaffold, and cen-trifuged into pellet, and then induced into cartilage. MTT detection for cell proliferation was done. After 3 weeks, the cell morphology, and cell proliferation and adhesion were observed, and chondrngenic differenti-ation was also analyzed. Results The pore diameter, water content, porosity tested for the scaffold showed an appropriate form. Cell proliferation showed faster in the scaffold and pellet culture system after 5 day, there was still cell proliferation in the scaffold system after 14 days but no obvious changes in the pellet cul-ture system; ceils on the scaffold proliferated densely showed by histological staining, but there was a scaf-fold structure residues in the inner layer. The finding of type Ⅱ immunohistochemistry stain showed that cells express strong positive for type Ⅱ collagen in the scaffold and pellet culture system whereas it was weakly positive in the plate culture system; the specific mRNA for cartilage, type Ⅱ collagen, aggrecan and SOX-9 were expressed in all three systems showed by RT-PCR, but type X collagen was expressed continu-ously in the plate culture system and expressed after 21 days in the pellet culture system, whereas it was not detected in the collagen-chitosan-chondroitin sulfate scaffold system. Conclusion The parameters of the collagen-chitosan-chondroitin sulfate scaffold were suitable in our study. The results suggested that it can promote the adipose tissue-derived stromal cells proliferation and chondrogenic differentiation better than the plate and pellet culture systems and maintain the phenotype of chondrocytes well; it is the optimal choice for cartilage tissue engineering in the future.     

标准化流程在小儿心内直视术后非计划性床边开胸中的应用

目的探讨标准化流程在小儿心内直视手术后床边紧急开胸中的应用,观察、总结床边紧急开胸标准化流程的临床效果。方法选择2010年5月～2017年9月本科共行床边紧急开胸27例为研究对象,将2010年5月～2015年4月的15例设为对照组做回顾性分析,采用常规流程;2015年5月～2017年9月后的12例设为实验组,采用标准化流程管理,比较2组患儿抢救成功率、床边开胸准备时间、与床边开胸相关的住院费用方面的差异。结果实验组抢救成功率、床边开胸准备时间、与床边开胸相关的住院费用均优于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论标准化流程应用于患儿心内直视术后非计划性紧急床边开胸抢救中获得满意疗效,值得推广。     

3-异丙基、3-正戊基环戊二酮-1,2 Mannich碱衍生物的合成及抗癌活性

以３异丙基、３正戊基环戊二酮１，２为母体化合物，设计合成了９个未见文献报道的Ｍａｎｎｉｃｈ碱衍生物，并在体外进行了抗癌活性评价。初步药理活性筛选结果表明，３正戊基环戊二酮１，２Ｍａｎｎｉｃｈ碱衍生物的抗癌活性较强，３异丙基环戊二酮１，２Ｍａｎｎｉｃｈ碱衍生物的活性相对较弱，多数化合物的抗癌活性优于阳性对照药５Ｆｕ．     

自体髂骨块或钛网松质骨植骨与钛钢板组合式一体化植入内固定治疗颈椎疾患

回顾性分析采用钛钢板内固定治疗颈椎疾患132例,其中自体髂骨块或钛网与钛钢板用螺钉连接后一体化植入内固定53例,先植入自体髂骨块或容纳松质骨的钛网再行钛钢板内固定79例,观察手术时间,术后X线片评估内固定并发症的发生情况.结果一体化植入内固定组手术时间缩短,内固定并发症发生率下降.     

沈阳地区不同年龄组、体质量指数女性人群髋关节骨密度的流行病学分析

目的探讨沈阳地区人群骨质疏松症流行病学情况。方法整群抽样2013-2016年在中国医科大学附属盛京医院进行骨密度检查的4057例女性人群为研究对象,年龄16~90岁,采用Norland公司生产的XR-600型骨密度仪,检测受试者左侧髋关节股骨颈、大粗隆及Ward’s三角区的骨密度(bone mineral density,BMD)T值、BMD值及一般资料的调查。将检测结果以髋关节各部位T值分组,按年龄和体质量指数(body mass index,BMI)进行分层,对不同分组情况的骨质疏松程度进行统计分析和对比。结果 1)本次检测的4057例调查女性人群在左侧髋关节3个部位(股骨颈、大粗隆、Ward’s三角区)中,不同年龄和BMI的T值和BMD值差异都有统计学意义(P0.001)。在≤39岁和40~49岁的年龄段,在3个部位BMD和T值的差异无统计学意义(P0.05),49岁的人群中,以每10岁为一个年龄段,BMD和T值下降的速度比较显著。(2)不同年龄组Ward’s三角区、大粗隆股骨颈BMD值和T值差异有统计学意义(P0.001)。(3)骨质疏松的人群中,大粗隆的部位出现骨质疏松情况的平均年龄为(65.85±10.65)岁,股骨颈部位为(72.08±9.36)岁,Ward’s三角区部位为(63.56±10.23)岁。(4)应用卡方检验,高BMI人群股骨颈骨质疏松率为0.6%,正常BMI人群为3.4%,低BMI人群为13.1%,差异有统计学意义(P0.001);高BMI、正常BMI和低BMI大粗隆部位骨质疏松率分别为8.6%、18.8%和53.6%(P0.001)。结论 1)在49岁的人群中,髋关节3个部位骨矿物含量下降速度均较快。(2)随着年龄的增加,Ward’s三角区的BMD值和T值下降的速度最早最快,大粗隆部位和股骨颈部位的BMD和T值相对较高,降低的速度也较慢。(3)骨质疏松的人群中,大粗隆的部位出现骨质疏松情况的平均年龄最高,其次为股骨颈部位,平均年龄最低的为Ward’s三角部位。(4)低BMI的人群3个部位的骨质疏松率显著较高。在股骨颈部位和大粗隆部位,高BMI的人群中出现骨质疏松的人数远低于低BMI的人群。     

颈椎前路减压融合术中钛网植骨与取自体髂骨块植骨的临床评价

目的从临床疗效、植骨融合率、椎间高度、融合节段曲度及并发症等方面分析评价钛网植骨与取自体髂骨块植骨在颈椎前路减压融合术中的差异。方法回顾性分析2008年8月至2009年12月在我院行颈椎前路减压融合术的脊髓型颈椎病患者共83例,其中应用钛网植骨(A组)40例,取自体髂骨块植骨(B组)43例。所有病例在术后第1天、4周、12周、6个月和12个月时摄X线片,测量椎间高度及融合节段曲度(Cobb角),了解植骨融合情况及内固定物状态。使用JOA评分法进行神经功能评定。结果平均随访13.5个月(12¹8个月)。所有病例术后末次随访JOA评分较术前明显改善,有统计学意义(P<0.05),但两组间临床疗效(改善率)相比无显著性差异(P>0.05)。两组病例在术后6个月、12个月时植骨融合率相比无显著性差异(P>0.05)。A、B两组椎间高度丢失、融合节段曲度(Cobb角)变化比较有显著性差异(P<0.05)。A组2例患者发生钛网下陷。B组2例患者发生髂骨取骨区血肿;1例患者发生取骨区疼痛。结论在临床疗效、植骨融合率方面采用钛网植骨与取自体髂骨块植骨相比无明显差异,而在维持椎间高度及融合节段曲度方面钛网植骨优于取自体髂骨块植骨。     

基于赋能理论的康复护理教育在创伤性脑损伤患儿照顾者中的应用效果研究

摘要 目的：探讨赋能康复护理教育在创伤性脑损伤患儿照顾者中的应用效果。 方法：采用便利抽样法选取深圳市某儿童医院神经外科就诊的77例创伤性脑损伤患儿照顾者为研究对象,按照入院先后顺序分为对照组（38例）与观察组（39例）。对照组接受常规康复护理教育,观察组接受赋能康复护理教育。比较两组照顾者出院准备度、自我效能和照顾积极感受的情况。 结果：出院当天观察组照顾者出院准备度、自我效能和照顾积极感受得分分别为（22.15±3.92）分、（31.25±3.85）分和（31.92±4.32）分,均高于对照组（20.36±3.16）分、（28.92±3.38）分和（28.94±2.66）分,P＜0.05。出院后1个月,观察组自我效能和照顾积极感受得分分别为（28.72±3.06）分和（28.35±4.09）分,均高于对照组（27.13±2.80）分和（26.21±3.02）分,P＜0.05。重复方差分析结果显示,存在交互作用,随着时间的延长,两组差异仍具有显著性意义（P＜0.05）, 结论：基于赋能理论的康复护理教育,有助于提高照顾者出院准备度、自我效能和照顾积极感受,值得临床借鉴。     

外源性TGF-β1及IGF-1诱导大鼠脂肪干细胞向软骨细胞分化的实验研究

目的探讨大鼠脂肪干细胞(ADSCs)的分离、培养、扩增方法及单层培养条件下外源性转化生长因子TGFβ-1和胰岛素样生长因子IGF-1诱导ADSCs向软骨细胞定向分化的可能性及两者的协同作用分析。方法取大鼠大网膜及肾周脂肪囊等处脂肪组织,酶消化法分离培养脂肪干细胞;免疫荧光测定CD29和CD44抗原的表达;分别用4组诱导培养基定向软骨方向诱导;诱导2周后细胞爬片行免疫荧光鉴定Collagen II表达;RT-PCR、Western blot对定向诱导后的细胞的表达进行检测。结果自大鼠脂肪组织中可分离出脂肪干细胞,体外生长形态类似成纤维细胞,可长期增殖,CD29和CD44抗原表达阳性,定向诱导后IGF-1组、TGFβ-1组及TGFβ-1 IGF-1组细胞可表现出软骨细胞的特性,TGFβ-1和IGF-1共同作用组软骨特异性基质的分泌明显高于单独诱导组。结论从大鼠脂肪组织中可分离出脂肪干细胞,生物学特性稳定,TGFβ-1和IGF-1均能定向诱导ADSCs向软骨方向分化,两者共同诱导时具有协同作用。     

GST-hVinexin融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达

目的构建GST-hVinexin融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达。方法从COS-7细胞中提取mRNA,反转录为cDNA。用PCR方法扩增出hVinexin基因全长,通过BamHI和SalI酶切位点将其定向插入pGEX-4T-2载体中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-hVinexin,并转化E.coli DH5α,通过限制性内切酶酶切电泳和DNA测序鉴定正确后,转入E.coli BL21中,经异丙基硫代β-D半乳糖苷大量诱导表达,SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定。结果电泳后酶切结果证实hVinexin大小为990bp,测序证明成功构建了原核表达质粒GST-hVinexin,并诱导表达GST-hVinexin融合蛋白,进一步用Western blot方法验证了其融合蛋白的表达。结论成功构建了GST-hVinexin原核表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌表达,为进一步纯化Vinexin及研究其结构与功能提供了前提基础。