结肠癌、溃疡性结肠炎组织过氧化物酶活性测定的意义

测定结肠癌及溃疡性结肠炎组织过氧化物酶(POD)活性,探讨其变化机理及其临床眯义。1 材料与方法(1)标本采集:18例结肠癌组织来源于手术标本,15例溃疡性结肠炎病变明显的结肠组织来源于内镜活检或手术标本,另外11例正常结肠组织来源于内镜活检标本,以上诊断均经病理检查证实。     

幽门螺杆菌阳性的疣状胃炎治疗112例

目的:了解疣状胃炎与H pylori感染的关系方法:胃镜确诊H pylori阳性的疣状胃炎患者112例随机分组,分别以雷贝拉唑钠、阿莫西林、克拉霉素根除H pylori治疗(A组)和雷贝拉唑钠抑酸治疗(B组).治疗后1 mo评价症状、胃镜改善情况和H pylori根除情况.显效者随访至治疗后6 mo再次评价症状和胃镜改善情况、检测H pylori.结果:治疗1 mo后A组症状和胃镜改善情况明显好于B组,两组比较有显著性差异(89.3% vs 75.0%;91.1% vs 76.8%,P<0.05).所有显效者随访至治疗后6 mo,A组复发率11.1%,B组复发率50.0%,A组明显低于B组.两组复发者H pylori均为阳性,未复发者H pylori阳性率为37.7%,二者对比有显著性差异(P<0.05).结论:疣状胃炎与H pylori感染密切相关.     

p57kip2蛋白和增殖细胞核抗原在胰腺癌组织中的表达及其临床意义探讨

目的　探讨细胞周期调控抑制因子 p5 7kip2 蛋白和增殖细胞核抗原 (PCNA)表达在胰腺癌发生发展中的作用及其临床意义。方法　采用免疫组织化学技术SP法 ,检测p5 7kip2 和PC NA在 32例胰腺癌组织和癌旁胰腺组织中的表达情况。结果　p5 7kip2 蛋白阳性表达率在胰腺癌组织中为 46 9% ,显著低于癌旁胰腺组织 (P <0 0 5 ) ,并与胰腺癌组织分化程度有关 (P <0 0 5 )而与淋巴结转移无关 ( χ2 =3 698,P >0 0 5 ) ;PCNA蛋白阳性表达率在胰腺癌组织中为71 9% ,显著高于癌旁胰腺组织 (P <0 0 5 ) ,并与胰腺癌组织分化程度和淋巴结转移均有关 (P<0 0 5 )。结论　p5 7kip2 、PCNA可能与胰腺癌发生、发展密切相关 ;p5 7kip2 蛋白表达降低、PCNA蛋白过度表达有助于胰腺癌的发生及细胞分化程度及预后的判定 ,但 p5 7kip2 蛋白低表达与胰腺癌淋巴结转移无关     

RNA干扰阻断cyclin D1表达抑制结肠癌细胞增殖

目的:使用RNA干扰技术阻断人结肠癌细胞cyclin D1的表达,检测其对细胞生长增殖的影响和机制.方法:将人结肠癌细胞株HT-29分成3组,antisense组(转染反义链组)、sense组(转染正义链组)和对照组.免疫沉淀和蛋白质印迹法观察cyclin D1 siRNA对细胞cyclin D1蛋白质表达的影响,并对蛋白质电泳图像进行分析,MTT比色法绘制细胞生长曲线,~3H-TdR技术和流式细胞技术观测细胞周期变化结果:反义siRNA有效抑制了cyclin D1蛋白质表达,MTT实验显示,转染反义siRNA的细胞,生长代谢减慢,与对照组细胞差异显著(P<0.01).而antisense组细胞24 h的~3H-TdR渗入量,G_0/G_1期和S期细胞较对照组和sense组明显减少(~3H-TdR:1181.8±117.97 vs 1798.4±55.36,1851.4±83.46:P<0.01;G_0/G_1期:79.31% vs 60.87%.59.14%:S期:13.67% vs 26.42%,27.93%:P<0.01).结论:RNA干扰技术能有效减弱cyclin D1蛋白质表达,使细胞周期受阻,并抑制结肠癌细胞的生长增殖.     

蛋白酶体抑制剂MG132对结肠癌细胞lovo侵袭力的影响

目的探讨小剂量蛋白酶体抑制剂MG132对结肠癌细胞(lovo)侵袭能力的影响。方法采用不同浓度MG132不同时间点分别作用于lovo细胞,用四甲基偶氮盐比色法(MTT法)检测lovo细胞抑制率;设定MG132浓度为0.5μmol/L、1μmol/L,分别作用lovo细胞24 h,倒置显微镜观察细胞形态学变化,Transwell小室检测MG132对lovo细胞的穿透基底膜能力的影响。结果低剂量MG132对lovo细胞生长无明显抑制,而细胞侵袭力较未处理组明显减弱(P<0.05)。结论低剂量MG132可使结肠癌lovo细胞侵袭能力减弱。     

口服杀虫脒急性中毒的死因与对策(附40例死亡病例的探讨)

杀虫脒(chlordimeform)是新的有机氮农药,用于防治水稻螟虫、棉花红铃虫等。近几年应用广泛,中毒病例时有发生。作者收集湖北省22间医院因口服中毒的住院病例317例,其中死亡40例,占12.62%,现就死亡原因及其对策予以讨论。     

抑瘤细胞运动和侵袭的鼠FRNK重组腺病毒的构建

目的应用AdEasy复制缺陷型腺病毒载体系统构建小鼠FRNK基因重组腺病毒，并在293HEK细胞中扩增制备重组病毒。方法把小鼠FRNK基因克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack—CMV中，构建腺病毒穿梭质粒pAdTrack—CMV-FRNK，经PmeⅠ内切酶酶切成线性化后，采用电穿孔转化将其转化到含有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的感受态大肠杆菌BJ5183中，通过卡那霉素筛选获得阳性腺病毒重组质粒。再将获得的腺病毒重组质粒转染到293HEK细胞进行包装，获得FRNK重组腺病毒pAdFRNK。荧光显微镜下观察绿荧光的表达。结果经酶切和绿荧光表达证明了小鼠FRNK基因的重组腺病毒载体pAdFRNK构建成功，并制备出高滴度的重组病毒。结论成功构建携带小鼠FRNK基因的重组腺病毒pAdFRNK，为研究FRNK的基因治疗奠定了基础。     

人FRNK重组腺病毒的构建

目的:应用AdEasy复制缺陷型腺病毒载体系统构建人FRNK基因重组腺病毒,并在HEK293细胞中扩增制备重组病毒。方法:把人FRNK基因克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建腺病毒质粒pAdTrack-CMV-hFRNK,经PmeⅠ内切酶酶切成线性化后,采用电穿孔转化将其转化到含有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的感受态大肠杆菌BJ5183中,通过卡那霉素筛选获得阳性腺病毒重组质粒。再将获得的腺病毒重组质粒转染到HEK293细胞进行包装,获得人FRNK重组腺病毒pAdhFRNK。荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达。结果:经酶切和绿色荧光蛋白表达证明了hFRNK基因的重组腺病毒载体pAdhFRNK构建成功,并制备出高滴度的重组病毒。结论:成功构建携带人FRNK基因的重组腺病毒pAdhFRNK,为研究FRNK的基因治疗奠定了基础。     

胃泌素干预影响人结肠癌细胞P190RhoGAP磷酸化的机制

目的:研究胃泌素对人结肠癌细胞P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平的影响。方法:使用胆囊收缩素2受体(CCK2R)的真核表达载体pCR3.1/CCK2R转染人结肠癌细胞株Colo320,上调胃泌素表达;使用胃泌素拮抗剂下调胃泌素表达。使用相同浓度的胃泌素(1×10-7mol/L)按时间梯度刺激细胞;采用蛋白质印迹法检测总FAK、酪氨酸磷酸化的FAK的表达情况,并确定FAK最大磷酸化时间点;以免疫沉淀和蛋白质印迹法检测FAK最大磷酸化时间点的P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平。结果:胃泌素引起FAK最大酪氨酸磷酸化作用时间点为12 h,胃泌素刺激12 h较0 h、胃泌素拮抗剂+胃泌素刺激12 h后P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平明显增加。结论:P190RhoGAP为FAK的下游信号分子,酪氨酸磷酸化的P190RhoGAP在胃泌素-CCK2R-FAK信号通路引起肿瘤细胞的侵袭、浸润、转移过程中发挥重要作用。