脂筏的功能及其与某些疾病的关系研究进展

自从1972年有学者提出流动镶嵌模型以来,人们对生物膜的研究不断深入,在1975年Wallach提出了晶格镶嵌模型,认为蛋白质和界面脂可形成有序的晶格,其中非界面脂呈点状分布在膜上。1977年Jain等在之前研究的基础上提出了板块模型,认为在流动的脂双分子层中,存在着结构大小性质不同、彼此独立运动的有序的"板块"结构,而"板块"间被无序的脂质区所分割。板块模型的思想也为之     

尿酸盐致血管内皮细胞损伤的机制

目的观察不同浓度尿酸盐对人血管内皮细胞损伤相关因子表达的影响,明确高尿酸血症对人血管内皮细胞的损伤的机制。方法体外单独培养人血管内皮细胞或与单核细胞共培养,尿酸盐分别用6．6mg／dl（约为人体男、女高尿酸血症最低值平均值）及该值2、3、4、5倍值刺激血管内皮细胞48小时,用酶联免疫吸附双抗体夹心法（ELISA）测定上清液白细胞介素1（IL-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-d）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）、血浆纤溶酶原激活抑制剂-1（PAI-1）等因子表达水平,用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PcR）测定血管内皮细胞人尿酸盐转运子（hUAT）mRNA的表达。结果①不同浓度尿酸盐与血管内皮细胞单独培养：结果显示高浓度尿酸盐使血管内皮细胞IL-l、TNF-Ⅸ、ICAM-1、PAI-1的表达上调,明显高于对照组（P均〈0．05）;②不同浓度尿酸盐与血管内皮细胞及单核细胞共培养：结果显示高浓度尿酸盐使血管内皮细胞IL-1、TNF-α、ICAM-1、PAI-1的表达进一步增高,明显高于对照组（P均〈0．05）;③hUATmRNA表达：高浓度尿酸盐使血管内皮细胞hUATmRNA表达明显低于对照组（P〈0．05）;与单核细胞共培养高浓度尿酸盐使血管内皮细胞hUATmRNA表达明显进一步下调（P〈0．05）。结论尿酸盐可以作为独立的危险因素引起内皮细胞的直接损伤,单核细胞在内皮细胞损伤过程中亦起到了重要作用,血管内皮细胞和单核细胞共培养使血管内皮细胞损伤进一步加重。     

基因转运载体中甲基化XbaⅠ位点的体外克隆与应用

目的探讨基因转运载体中甲基化XbaⅠ位点在基因克隆中的效用。方法以pIRES2-EGFP为母本,PCR扩增获得携附加XhoⅠ位点和满足甲基化序列组成的XbaⅠ位点、同时缺失IRES和EGFP区段的载体骨架pΔSG,其PCR产物与携带对等酶切位点的EGFP PCR产物经酶切、连接后,构建重组质粒rpΔSG-EGFPV-Xho、rpΔSG-EGFPV-Xba。另将pΔSG和EGFP的PCR产物分别与pMD 18-T Simple T载体连接,构建重组质粒psT-ΔSG和psT-EGFP,并亚克隆获得重组质粒rpΔSG-sT-EGFPV-Xho。以DsRed2基因置换rpΔSG-sT-EGFPV-Xho中的EGFP基因,获得重组质粒rpΔSG-sT-DsRed2V-Xho。各重组质粒经脂质体介导转染CHO细胞。结果各重组质粒转染的细胞中明显可见EGFP或DsRed2的高效表达。结论 PCR产物中满足甲基化序列组成的XbaⅠ位点,在体外酶切与连接的克隆效果良好;该序列经体外重组并导入Dam+和/或Dcm+宿主菌中扩增时被重新甲基化而受保护,且对重组质粒在宿主细胞内的稳定性和生物活性没有明显影响。     

皮肤扩张及自体肋软骨支架法全耳廓成形术矫正先天性小耳畸形

目的探讨耳后乳突区皮肤扩张及自体肋软骨支架法全耳廓成形术矫正先天性小耳畸形的临床效果。方法21例先天性小耳畸形患者,分3期进行手术治疗。Ⅰ期：患侧耳后乳突区皮下埋置50ml肾形扩张器,术后定期注水,扩张皮肤3～4个月,平均注水（80．51±3．87）ml,达预定量后稳定养护1个月。Ⅱ期：取自体肋软骨,雕刻成由4层软骨构成的耳支架,整体为倒立的海螺样外观,将扩张皮瓣覆盖于整个自体肋软骨支架表面,再造耳廓。Ⅲ期：Ⅱ期术后3个月对成形耳进行细节性修整。结果21例患者手术均获成功,成形耳廓大小、外形均与健侧相似,医患双方满意。结论耳后乳突区皮肤扩张法所扩张的皮肤,可覆盖于整个自体肋软骨支架表面,术后耳廓外形逼真,立体感强。     

同型半胱氨酸、超敏C反应蛋白、低密度脂蛋白胆固醇、D-二聚体与脑梗死的关系

目的：探讨血清同型半胱氨酸（Hcy）、血脂、超敏c反应蛋白（hs—CRP）、凝血功能、D-二聚体的变化与脑梗死的关系。方法：收集2012年3月-2013年2月于我院住院治疗的急性脑梗死患者172例为观察组,并根据病灶大小分为大梗死组、小梗死组和腔隙性脑梗死组。分别对3组患者入院后次日晨测定血清Hcy、血脂、hs—CRP、凝血功能、D-二聚体。100例健康体检者作为正常对照。结果：脑梗死患者血清Hcy、血脂、hs—CRP、纤维蛋白原（Fib）、D-二聚体水平均高于正常对照组,APTT和TT均低于正常对照组（P〈0．05）。血清Hcy水平与LDL、hs—CRP和血浆胁二聚体水平有一定相关性（r值分别为0．739,0．681和0．803,P〈0．01）。大梗死组、小梗死组血清Hcy、hs—CRP、LDL和血浆D-二聚体水平明显高于腔隙性脑梗死组（P〈0．05）,大梗死组血浆Fib水平明显高于腔隙性脑梗死组和小梗死组（P〈0．05）。脑梗死面积大小与血清Hcy、hs—CRP、LDL和血浆胁二聚体水平具有良好的相关性（r值分别为0．604、0．587、0．515、0．333,P〈0．05或P-〈0．01）。结论：血清Hcy、hs—CRP、LDL和D-二聚体水平升高可能是脑梗死的危险因素。     

颅内压监测下早期亚低温治疗重度弥漫性轴索损伤的临床研究

目的探讨持续颅内压监测下早期亚低温治疗在重度弥漫性轴索损伤（SDAI）病人救治中的应用价值。方法将43例SDAI病人随机分为2组,常温组（20例）入院后床边行锥颅脑室外置管颅内压监测,予气管切开、脱水、营养支持等常规治疗;早期亚低温组（23例）入院后6h内行亚低温治疗,持续3～7d,其余治疗同常温组。记录两组病人治疗后3个月GOS评分并作比较。结果两组病人均得到较好的颅内压监测,常温组平均颅内压〉20mmHg17例,大多数病人需较长时间使用脱水药物治疗;早期亚低温组平均颅内压〉20mmHg4例,经短时间使用脱水药后即降低。与常温组比较,早期亚低温组的病死率明显降低（x2=4．083,P=0．0433）,恢复良好率明显提高（旷=4．098,P=0．0429）。结论在持续颅内压监测下早期实施亚低温治疗能明显提高SDAI病人的生存率,改善其预后,是一种较理想的SDAI综合治疗方案。     

hAOX 在人肾癌组织中的表达及其与临床生物学行为的关系

 目的 探讨人醛氧化酶(human aldehyde oxidase, hAOX)在肾癌组织中的表达及其与临床生物学行为的相关性。方法 运用免疫组织化学方法检测手术切除的86例肾癌及其癌旁肾组织病理标本中hAOX的表达,其中透明细胞癌64例,乳头状肾细胞癌18例,颗粒细胞癌4例;TNM分期标准界定Ⅰ期26例,Ⅱ期31例,Ⅲ+Ⅳ期29例;伴有淋巴结转移31例,无淋巴结转移55例。采用Prism 6.0统计软件分析hAOX与临床病理因素及5年生存率的关系。结果 86例肾癌标本中,免疫组化hAox的阳性表达率为23.25%,癌旁组织中hAox的阳性表达率达85.0%,明显高于肾癌组织中的表达。hAox的表达与肾癌患者的年龄、性别、组织类型及肿瘤直径均无关,但与淋巴结转移、TNM分期及Ki-67表达有明显相关性;在hAox(+)表达的患者中,其5年生存率明显高于hAox(-)表达的患者组;且hAox(+)表达的病例预后明显优于hAOX(-)表达的病例。结论 hAOX的表达与肾癌的发生、发展和转归有一定关系,对维持细胞正常生长具有重要作用,可为临床诊断、治疗及判断预后提供一定依据和方向。     

PCR-RFLP检测载脂蛋白CⅢ基因T-455C多态性方法的建立及应用

目的：建立聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术（PCR-RFLP）检测栽脂蛋白CⅢ（apoCⅢ）T-455C多态性的方法,探讨南通汉族人群中apoCⅢ多态性与高三酰甘油血症（HTG）的相关性。方法：用PCR扩增apoCⅢ基因启动子区包含T-455C多态性在内的DNA片段,扩增产物用限制性内切酶BseG Ⅰ酶切后电泳,分析apoCⅢ基因型,同时采用生化方法检测研究对象的血脂和载脂蛋白水平。结果：检测到3种基因型,分别为-455TF、-455TC和-455CC。HTG患者组和健康对照组apoCⅢ-455C等位基因频率（50．44％比33．11％）和apoCⅢ-455CC基因型频率（26．55％比12．16％）均有显著差异（P〈0．01）;C等位基因携带者患HTG的风险是非携带者的2．06倍（95％CI：1．31～3．24）;-455C等位基因携带者有较高的三酰甘油（TG）和apoCⅢ蛋白水平（P〈0．05）。结论：PCR-RFLP是一种快速、敏感的分析apoCⅢ基因启动子区T-455C多态性的方法;apoCⅢ-455C等位基因与HTG的发生相关。