221例急性早幼粒细胞白血病免疫表型特点与微小残留病检测及基因标志的关系

本研究探讨急性早幼粒细胞白血病（APL）患者的免疫表型特点与微小残留病（MRD）检测及基因标志之间的关系。采用四色流式细胞术（FCM）分析了221例初诊APL患者的免疫表型,其中87例加做CD123抗体,196例同时运用PCR检测特异融合基因pml-rarer。结果发现：初诊APL患者中CD123、CD33和CD9的阳性表达率分别为100％、99．1％和96．0％,阳性患者中平均阳性细胞比例均在90％左右;虽然CD117、CD13、CD38及CD64的阳性表达率均高于96％,但阳性患者中阳性细胞比例分布不一致,平均阳性细胞比例在70％左右;部分患者表达CD15、CD56和CD11b,多数患者不表达CD34和HLA-DR,阳性患者中阳性细胞的平均比例均较低。196例初诊APL患者中,pml—rara基因的不同转录本bcr1、bcr2和bcr3所占比例分别为63．3％、4．6％和32．1％。bcr3型基因与CD34的阳性表达相关,以20％为界时bcr3和bcr1型中CD34^＋患者的比例分别为15．4％（10／65）和3．3％（4／121）（P〈0．05）;以10％为阳性界限,bcr3和bcr1型中CD34^＋患者的比例分别为47．7％（31／65）和5．8％（7／121）（P〈0．001）;其余抗原的表达无明显区别。APL细胞中CD34为阳性且表现为非高侧向角（NL-SSC）时高度提示基因为bcr3型。结论：APL患者的免疫表型具有独特特征,CD123、CD33和CD9更适用于APL的MRD检测,CD34的阳性表达、NL-SSC与bcr3基因亚型相关,CD34的阳性界限设为10％更能提示基因类型与抗原表达的关系。     

不同治疗方案对多发性骨髓瘤患者骨病的影响

Objective To explore the difference of effects of two regimens (bortezomib and dexamethasone, BD; and thalidomide and dexamethasone, TD) on bone disease in multiple myeloma(MM).Methods Forty patients with newly diagnosed and refractory or relapsed MM were treated with BD or TD regimens from Dec 2006 to Sep 2008. Bone pain score and X-ray examination were carried out before and after therapy. Serum levels of DKK-1, sRANKL, OPG and TRACP-5b were measured by ELISA before and 3 months after therapy. Results Serum TRACP-5b concentration was significantly decreased in patients received TD regimen (5.94 U/L before therapy vs 4.84 U/L 3 months after therapy ,P ＜ 0.05), and so did for serum DKK-1 concentration in patients responded to BD regimen (35.11 μg/L before vs 32.03 μg/L 3 months after therapy,P ＜0.05) ;for serum concentration of sRANKL in patients responded to BD regimen (1.05 pmol/L before vs 0.67 pmol/L 3 months after therapy, P ＜ 0. 05); and for serum concentration of TRACP-5b in responders to BD regimen (5.57 U/L before therapy vs 4.90 U/L 3 months after therapy ,P ＜0.05). Conclusion Bortezomib lowers levels of serum DKK-1 and RANKL in responders, thus leads to normalization of abnormal bone remodeling through the increase of bone formation and reduction of bone resorption. Thalidomide decreases bone resorption regardless of treatmant response.     

应用胆道气囊导管术中经胆囊管行胆总管取石35例

我院外科于 196 6～ 1999年对术前影像学及术中探查和胆管造影确诊胆囊结石继发性胆管结石的 35例病人 ,采用气囊导管经胆囊切除术后胆囊管取石成功 ,现报道如下。1　临床资料男 12例 ,女 2 3例。年龄 2 6～ 70岁。病程 1～ 2 5年。除病史外 ,35例术前行Ｂ超检查 ,10例曾作ＣＴ。术前均确诊胆囊结石 ,胆总管直径 0 8～ 1 7ｃｍ ,拟诊继发性胆管结石者 2 0例。胆囊切除术后保留胆囊管 1～ 1 5ｃｍ ,先经胆囊管行术中胆道造影以确诊胆总管结石数目、大小及部位。采用长度2 3ｃｍ 5ＦＢａｘｔｅｒ胆道气囊导管 ,置入内芯 ,经扩张胆囊管缓慢将…     

ｓｉＲＮＡ沉默ＳＴＡＴ５对ＨｅＬａ细胞增殖和凋亡的影响及分子机制

目的：研究ＳＴＡＴ５对宫颈癌ＨｅＬａ细胞生物学特性的影响及其分子机制。方法：用ＭＴＴ法测定ＳＴＡＴ５ｓｉＲＮＡ对ＨｅＬａ细胞增殖的影响,流式细胞仪检测ＳＴＡＴ５ｓｉＲＮＡ对ＨｅＬａ细胞周期和细胞凋亡的影响,用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和ＲＴ- ＰＣＲ分析ＳＴＡＴ５、Ｂｃｌ-２和ｐ５３的变化。结果：ＳＴＡＴ５ｓｉＲＮＡ能够抑制ＨｅＬａ细胞的增殖,Ｓ和Ｇ２／Ｍ期肿瘤细胞比例减少,Ｇ０／Ｇ１期肿瘤细胞比例显著增加（Ｐ＜０.０１）,并诱导肿瘤细胞凋亡（Ｐ＜０.０１）。ＳＴＡＴ５ｓｉＲＮＡ下调ＳＴＡＴ５、Ｂｃｌ-２表达且上调ｐ５３表达。结论：ＳＴＡＴ５ｓｉＲＮＡ可以有效地诱导肿瘤细胞的凋亡,并抑制肿瘤细胞的增殖。     

尿KIM-1、NAG及MAU水平对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者急性肾损伤的预测价值

目的 探讨尿肾损伤分子1(KIM-1)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)及尿微量白蛋白(MAU)水平对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者急性肾损伤的预测价值.方法 选择OSAHS患者137例,其中合并急性肾损伤59例(合并肾损伤组)、未合并急性肾损伤78例(单纯OSAHS组),同期选择体检健康的...     

慢性粒细胞性白血病抗原负载树突状细胞激发抗白血病作用

目的研究慢性粒细胞性白血病(CML)细胞冻融抗原(CLA)负载的树突状细胞(DC)对特异性抗白血病T细胞的作用.方法将CML患者外周血单个核细胞(PBMNC)来源的DC在体外用CLA负载,再与CML患者的经细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共同培养,应用乳酸脱氢酶(LDH)释放法观察其对自身CML细胞杀伤活性(A组),与未负载的DC+CIK(B组)、CIK(C组)及CIK+CLA(D组)进行比较.结果效靶比为10∶1条件下,A、B、C、D4组的杀伤活性分别为(63.69±8.35)%、(45.02±5.49)%、(27.28±4.64)%、(29.63±5.71)%.A组比B组杀伤活性强(P＜0.01);C组与D组比无显著性差异.结论CLA负载的DC可进一步提高DC介导的特异性抗白血病T细胞对CML细胞的杀伤活性.     

PY20抗体检测bcr-abl阳性细胞内磷酸化酪氨酸的临床应用

目的探讨酪氨酸磷酸化抗体 PY20检测 bcr-abl 阳件细胞的特异性及其可能的临床应用。方法采用多色直接免疫荧光标记方法,同时标记膜 CD45和胞质 PY20抗体,应用流式细胞术检测 bcr-abl 阳性细胞系(K562、MEG-01)和阴月性细胞系(Jurkat、MCF-7)的酪氨酸磷酸化水平。并利用bcr-abl 蛋白酪氨酸磷酸化特异性阻断剂伊马替尼作用 K562细胞和 MEG4-01细胞,观察 PY20抗体的特异性。检测了49例白血病患者和3名正常人的骨髓细胞,包括慢性粒细胞白血病(CML)、Ph~+急性淋巴细胞白血病(Ph~+ ALL)、Ph~- ALL、急性髓系白血病、慢性淋巴细胞白血病。PY20~+细胞占白血病细胞群的10%以上定义为阳忡。以阳性细胞的平均荧光强度(MFI)表示其酪氨酸磷酸化水平。结果bcr-abl 阳性细胞系、10例初诊 CML 和8例 Ph~+ALL 患者 PY20抗体均为阳性,而 bcr-abl 阴性细胞系、20例 bcr-abl 阴性白血病患者和3名正常人 PY20抗体均为阴性。伊马替尼作用后 K562细胞和MEG-01细胞的酪氨酸磷酸化水平随作用时间的延长逐渐下降。10例初诊和9例伊马替尼治疗有效的 CML 患者 PY20~+细胞占有核细胞的比例分别为(54.20±19.82)%和(14.84±6.17)%(P<0.05),而2例伊马替尼耐药者 PY20~+细胞比例分别为64.3%和57.2%。2例伊马替尼耐药患者和9例伊马替尼治疗有效患者的 CML 细胞的 MFI 分别为99.42±4.87和46.41±4.67(P<0.01)。结论酪氨酸磷酸化抗体 PY20对 bcr-abl 阳性细胞具有相对特异性,有可能应用于 bcr-abl 阳性疾病如 CML 和Ph~+ALL 的早期快速辅助诊断,同时有可能作为判断该类疾病对伊马替尼敏感性的一个辅助指标。     

慢性乙型肝炎患者肝组织及血清TGF-β1表达及意义

目的探讨TGF—β1与肝纤维化的关系。方法留取32例慢性乙型肝炎患者血清及肝组织。肝组织行HE、网织纤维和胶原纤维染色,免疫组化法检测肝组织中TGF-β1表达;ELISA法检测血清中TGF-β1水平;结果TGF-β1在纤维化肝组织高度表达,主要分布于肝血窦壁及窦周细胞、炎症坏死灶、汇管区及肝细胞内;随肝纤维化程度的增加,肝组织及血清中TGF—β1水平明显升高,二者呈正相关,二者与肝脏胶原纤维、网织纤维含量同步陛升高,并明显相关;结论慢性乙型肝炎肝组织及血清高度表达TGF—β1,并与肝纤维化程度平行;TGF-β1对肝纤维化的形成与发展具有促进作用;其水平变化有助于判断肝纤维化程度。     

围产期低剂量氯化三丁基锡暴露对子代青春期小鼠精子质量的影响

目的探讨围产期低剂量氯化三丁基锡(TBTCl)暴露对子代雄性小鼠青春期精子质量的影响。方法将20只妊娠6 d的SPF级昆明小鼠随机分为4组,分别为100、10、1μg/kg TBTCl染毒组和对照(玉米油)组,每组5只。从妊娠第6天开始,于每天同一时间经口灌胃染毒,染毒容量为1 ml/kg,至哺乳期结束(出生后21 d)。于出生后28 d开始观察包皮分离的日龄。出生后第49天,取附睾做精子计数,并统计精子畸形情况。结果与对照组比较,100μg/kgTBTCl染毒组小鼠的精子计数显著下降(P<0.01),各剂量TBTCl染毒组小鼠精子畸形率显著升高(P<0.05,P<0.01);且随着TBTCl染毒剂量的升高,小鼠精子计数呈下降趋势,精子畸形率呈升高趋势。而各剂量TBTCl染毒组小鼠包皮分离时间仅略有延迟。结论围产期低剂量TBTCl暴露可导致青春期雄性小鼠精子质量下降。     

葡聚糖-表柔比星偶合物的制备和性质研究

目的　研究两种方法制备的葡聚糖 表柔比星偶合物的稳定性及体外细胞毒活性。方法　采用高碘酸钠氧化法制备聚醛基葡聚糖 表柔比星偶合物 (PAD EPR) ,将葡聚糖羧甲基化后制备腙健连接的羧甲基葡聚糖 表柔比星偶合物 (CMD EPR)。结果　PAD EPR的载药量为 1∶4,CMD EPR的载药量为 1∶10 ;二者在中性条件下均比较稳定 ,4℃贮存 70d ,药物偶合率都在90 %以上。偶合物的体外细胞毒性比游离药物有所下降 ,游离药物对正常细胞的毒性高于对肿瘤细胞的毒性 ,CMD EPR对肿瘤细胞的毒性高于对正常细胞的毒性 ,PAD EPR对两种细胞的毒性没有差异。结论　CMD EPR优于PAD EPR