生物制品GMP认证检查的几点体会

本文从生物制品的特点、生物制品对厂房设备的特殊要求、GMP验证和人员素质几个方面。阐述了对生物制品实施GMP认证检查的感想和体会。     

Fas、Bcl-2在γ射线体外诱发的白血病小鼠骨髓细胞中的表达

目的 :观察 Fas、Bcl- 2在 γ射线体外诱发的急性淋巴细胞白血病小鼠骨髓细胞中表达情况 ,以探讨辐射致癌的机制。方法 :采用 4次 1.75 Gyγ射线全身照射 BAL B/ c小鼠诱发白血病模型 ,通过流式细胞仪对照射后白血病组、未癌变组及对照组小鼠骨髓细胞中 Fas、Bcl- 2的表达进行检测 ;应用抗 Fas抗体诱导细胞凋亡 ,进一步观察 Fas、Bcl- 2的表达对骨髓细胞凋亡的影响。 结果 :白血病小鼠骨髓细胞 Fas表达较未癌变组及对照组明显下降 (P<0 .0 1) ,而 Bcl- 2的表达明显增强 (P<0 .0 1) ;白血病小鼠骨髓细胞明显耐受抗 Fas抗体诱导的细胞凋亡。 结论 :Fas低表达、Bcl- 2高表达导致了细胞凋亡受到抑制 ,这可能是辐射引起小鼠急性淋巴细胞白血病的机制之一。     

4-1BB(CD137)配体在几种肿瘤细胞株上的表达

目的：研究4—1BBL在几种人肿瘤细胞株上的表达。方法：用RT—PCR及法检测肿瘤细胞内4—lBBL mRNA水平的表达；用流式细胞仪检测肿瘤细胞膜表面4—1BBL的表达。结果：4—1BBL在Jurkat细胞株上高表达(98．97％)，在HL-60和K562上表达较低(分别为24．77％和19．23％)，而在HL-29细胞株上基本不表达(2．13％)。结论：4—1BBL在不同肿瘤细胞株表达水平不同。     

血清铁和铁蛋白与肝病患者肝纤维化指标的关系

OBJECTIVE: To study the relationship of serum iron and ferritin with the indicators for hepatic fibrosis and hepatic iron overload. METHODS: Liver tissue specimens were obtained from 41 patients with benign (16) or malignant (25) liver diseases by 1 second liver biopsy, and routine microscopic examination was performed after haematoxylin-eosin (HE) and Perl's Prussian staining. Atomic absorption spectrum, radioimmunoassay and enzyme-linked immunosorbent assay were respectively employed to examine the serum levels of iron, ferritin, hyaluronic acid, laminin, human procollagen type , and collagen type . RESULTS: Between patients with benign and malignant liver diseases, significant differences were found in the serum ferritin levels (P < 0.05), but not in serum iron levels (P > 0.05). It was also noted that the levels of the indicators for hepatic fibrosis in patients with benign and early-stage malignant diseases varied significantly from the levels in normal subjects, but these differences were not observed between normal subjects and patients with end-stage hepatic malignancies. Serum iron and ferritin were found to be associated with serum laminin levels (serum iron: r=0.439, P=0.031; serum ferritin: r=0.476, P=0.016), and no iron granules detected in the tissue specimens of hepatocellular carcinoma. CONCLUSIONS: Most of the patients with hepatocellular carcinoma have elevated serum ferritin levels. The serum levels of iron and ferritin are statistically correlated with serum laminin level. Obvious reduction of iron content is typical of hepatic malignant tissues in comparison with the benign tissues, and the reduction in the levels of the indicators for hepatic fibrosis might involve the inhibition of collagen synthesis in the tumor tissues from patients with end-stage hepatocellular carcinoma. Most of the cases of alcoholic fatty liver are complicated by liver iron overload, often marked by serum iron and ferritin levels.     

膀胱出口梗阻后逼尿肌收缩蛋白表达和膀胱重量的改变

目的探讨膀胱出口梗阻(BOO)后逼尿肌收缩蛋白表达和膀胱重量的改变及意义。方法BOO组病人16例,筛选条件为入院诊断良性前列腺增生症(BPH)并经尿动力学压力-流率检查证实为高压低流型;对照组5例,为外伤等情况入院并排除有下尿路梗阻病史者。BOO组所有病例均行耻骨上经膀胱前列腺摘除术,术前B超检查测定膀胱重量和前列腺内外径比值,术中切取膀胱上壁组织2cm×1cm×1cm大小,标本行RT-PCR反应,检测膀胱逼尿肌中肌动蛋白和肌球蛋白mRNA的表达,并比较其与膀胱重量间的线性相关性。结果BOO组与对照组膀胱重量分别为(92.15±34.89)g和(56.08±20.35)g,(P<0.05);前列腺内外径比值分别为(0.57±0.16)和(0.18±0.06),(P<0.01);与对照组相比,BOO组肌动蛋白和肌球蛋白mRNA的表达量均有显著增加,分别为(40.32±59.67)×106和(6.59±5.62)×106,(P值均<0.01);且两者表达量与膀胱重量之间均有明显线性正相关性(P<0.05)。结论逼尿肌中肌动蛋白和肌球蛋白的表达与膀胱逼尿肌的功能状态密切相关。     

手部关节损伤的治疗

目的 通过对手部关节损伤治疗方法的对比和随访观察，总结出各种方法的优缺点，并指出相对较好的治疗方法。方法 1980～2002年对手部关节损伤进行各种手术治疗，通过观察病人术后关节的活动度、肿胀、疼痛、畸形及捏力的改善等项目，评价哪种方法相对更好。结果 通过对各种数据的测量比较，特别是关节活动度的改善情况，认为人工关节置换是所有治疗方法中相对最好的。结论 尽管人工关节置换也有不少缺点，但随着新材料的不断应用和设计的不断改进，其治疗效果将越来越好。     

结核分枝杆菌Rv1009基因蛋白的克隆和表达

目的 克隆表达结核分枝杆菌促Rv1009基因,序列测定正确后进行融合、表达.方法 采用热启动聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction,PCR）从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Rv1009编码基因,用限制性内切酶消化后插入pGEX 4T-2载体中,将重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）,目的基因经IPTG诱导,表达Rv1009基因蛋白.结果 经PCR扩增在1300bp处发现一条目的片段,获得了结核分枝杆菌H37Rv株Rv1009基因蛋白,经诱导后高效表达分子量为64KD的外源蛋白,与预期分子量大小一致,凝胶自动扫描分析,在A600值为0.6,IPTG终浓度为0.3 mmol/L,诱导表达3 h时融合蛋白表达量即达峰值,占菌体总蛋白的22.8%.结论 构建了结核分枝杆菌Rv1009基因重组表达载体,获得了RPF样融合蛋白的高效表达,为今后深入研究奠定了基础.     

外引流术后的白内障超声乳化手术

目的：探讨抗青光眼餐引流术后的白内障患眼进行超声乳化吸除术的手术入路，操作方式及临床效果。方法：避开功能性滤过泡，选择角巩膜隧道切口或透明角膜切口，瞳孔麻痹性散大时，做一个完美的直径约5mm的连续环形撕囊以补偿之；恰当处理虹膜后粘连后，在病理性小瞳孔下完成超声乳化手术；眼压失控者行青光眼白内障人工晶体植入三联术。结果：无后囊破裂，人工晶体全部囊袋内植入，术后1周视力≥0．5者20只眼（64．5％），0．1－0．4者8只眼（25．8％），＜0．1者3只眼（9．7％）。随访1－16个月，眼压均在20.55mmHg以下。结论：体外流术后的白内障患眼，超声乳化手术因其切口小，并发症少，不破坏功能性滤过泡，不损伤瞳孔，是目前各种手术方法中的最佳选择。     

对侧网状巨细胞核对大鼠脊髓背表面电位的影响

以浅麻醉和麻痹大鼠为对象,利用计算机平均技术记录强电流刺激腓肠神经诱发的脊髓背表面电位(CDP),观察对侧网状三细胞核(NGC)微量注射L一谷氨酸钠,使神经细胞兴奋后对CDP的影响.实验发现,对侧NGC神经细胞兴奋后,Aβ和Aσ纤维引起的P_1波及Aσ和C类纤维引起的N_3波减小,C类纤维引起的P_2波明显减小,N_4 波消失.以上结果提示:对侧NGC对细纤维诱发的CDP成分有抑制作用.     

高血压病患者B型超声主动脉壁厚度与血清载脂蛋白的相关性

采用 Mark-600型超声诊断仪测量了128例高血压病患者主动脉壁厚度(AWT),并同时检测了血脂指标,结果显示,高脂血症组血清 apoB 及 AWT 均显著高或厚于血脂正常组(P<0.01),其 apoAI/apoB 比值显著低于血脂正常组(P<0.01),临床合并冠心病的患病率亦显著高于血脂正常组(P<0.05)。相关性分析显示,AWT 与 apoB(r=0.338)呈直线正相关,与 apoAl(r=-0.385)及apoAl/apoB(r=-0.540),呈直线负相关,(P 均<0.01)。经逐步回归分析,筛选对 AWT 有显著作用的血脂指标,结果依次为 apoAl/apoB、apoB。