超声处理对羊瘙痒病脑组织中PrPSc聚集状态的影响

目的 研究超声处理对感染羊瘙痒症仓鼠脑组织中PrP^Sc聚集状态的影响，寻找产生PrP^Sc低聚体的条件。方法 裂解液制备脑组织提取物，用各种超声条件处理不同阶段的脑组织提取物；以蛋白酶消化后的Western blot方法和图象分析系统观测PrP^Sc蛋白的分布和聚集状态。结果 适当的超声处理(15s共30次)可增加脑组织匀浆上清中PrP^Sc含量1．29～1．58倍；同样条件下超声处理可明显增加羊瘙痒因子263K感染仓鼠脑组织匀浆上清中PrP蛋白总量，而对正常对照仓鼠脑组织匀浆上清中PrP蛋白总量影响不大；对经常规高速离心获得的PrP^Sc的超声处理显示约90％的PrP^Sc存在于离心上清液中。结论 对感染动物脑组织进行超声处理可增加PrP^Sc的提取量，利于实验室检测。适当的超声处理可破碎大的相对分子质量的PrP^Sc聚集物，产生小的相对分子质量的PrP^Sc产物。     

SARS冠状病毒棘突蛋白的S1蛋白诱导小鼠产生中和抗体的研究

目的 研究SARS冠状病毒棘突蛋白受体结合部位S1的免疫原性，为SARS的实验诊断和新型疫苗的研究提供依据。方法 用克隆有哺乳动物细胞密码子优化的SARS-CoV S1基因的质粒pcDNA3．1／S1或P-S1Ig转染293T细胞，用细胞的上清液纯化S1蛋白。以pcDNA3．1／S1质粒对BALB／c小鼠进行2次基因免疫，以纯化的S1蛋白进行加强免疫。用ELISA法检测小鼠抗SARS-CoV的特异性IgG抗体，并在Vero E6细胞上做体外中和实验，检测中和抗体。结果 S1蛋白诱导小鼠产生抗SARS-CoV的特异性抗体；1：1499．68稀释的S1蛋白免疫的小鼠血清可保护50％的细胞对1000TCID50的病毒攻击，而阴性对照血清不能保护细胞对病毒的感染。结论 SAPS冠状病毒棘突蛋白受体结合部位S1能有效诱导机体产生具有高效保护作用的中和抗体免疫反应，可望发展成为理想的SARS棘突蛋白亚单位疫苗。     

数据挖掘法探讨周珉教授治疗原发性肝癌用药规律及经验总结

[目的]数据挖掘法分析周珉教授治疗原发性肝癌的中医用药规律,探讨相关病机并进行经验总结。[方法]收集2016年2月—2018年5月周珉教授门诊期间治疗原发性肝癌的方剂,运用"中医传承辅助系统(V2.50)"进行数据挖掘,并结合周珉教授临床经验,进行原发性肝癌病机探讨及用药规律分析。[结果]共收集治疗原发性肝癌方剂176首,涉及中药235种,列出方剂中的高频药物及组合规律。[结论]总结原发性肝癌以"湿热痰毒、气阴两伤"为基础病机,"清热化湿、健脾养阴"治则贯穿原发性肝癌治疗始末,同时,根据疾病不同发展阶段及治疗措施,权衡"扶正"与"祛邪"的主次分配,斟酌应用"攻毒散结""行气化瘀"等治法,以达到改善患者生活质量、延缓疾病进展的目的。     

平衡火罐技术操作规范探析

平衡火罐是以阴阳学说、经络腧穴理论及背部经络循行和常用穴位功效为基本理论的一种中医疗法,本研究通过检索公开发表的有关平衡火罐疗法的相关中英文文献并对其进行梳理,从理论依据、操作流程及要点、选穴留罐及配穴留罐、疗效评价依据等方面对平衡火罐技术进行归纳总结。制定了操作流程;以腰背部腧穴三焦分布作为辨证选穴和施术依据,制定了配穴原则;观察走罐后痧斑出现的部位、形状、颜色以判断病位、病程、病性和疗效,分析罐斑颜色协助诊断及疗效评价,确立了以中医证候积分量表作为疗效评定的标准;规范了平衡火罐技术的操作,为扩展其临床应用提供了理论依据。     

紫菀的研究进展及质量标志物预测分析

紫菀是临床常用的化痰止咳要药,始载于《神农本草经》。紫菀化学成分丰富,主要包括萜类及其苷、肽类、黄酮、蒽醌、香豆素、有机酸、酚类、甾醇、挥发油及苯丙素类等。现代药理学研究表明,紫菀在抗肿瘤、抗病毒、抗氧化等方面也具有显著的药理活性。对紫菀的资源分布、化学成分、药理活性研究进展进行综述,并依据质量标志物的概念及确定原则对紫菀的质量标志物进行预测分析,以期为紫菀质量标准的深入研究提供参考。     

杏贝止咳颗粒对豚鼠感染后咳嗽的治疗作用

目的 探讨杏贝止咳颗粒对豚鼠感染后咳嗽（post-infectious cough,PIC）的治疗作用。方法 除对照组外,将3～4周龄SPF级雄性Hartley豚鼠采用鼻滴脂多糖、烟熏、辣椒素雾化激发来构建PIC豚鼠模型。造模成功后分为模型组及杏贝止咳颗粒低、中、高剂量（0.93、1.86、3.72 g/kg）组、阿斯美（21.62 mg/kg）组和苏黄止咳胶囊（313.88 mg/kg）组,末次给药后24 h,通过辣椒素雾化诱咳测定咳嗽次数及潜伏期,采用ELISA法检测血清、肺泡灌洗液和肺组织中P物质（substance P,SP）、降钙素相关基因肽（calcitonin gene related peptide,CGRP）、神经肽A(neurokinin A,NKA)、神经肽B(neurokinin B,NKB)、神经生长因子（nerve growth factor,NGF）、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)和缓激肽（bradykinin,BK）含量,血液分析仪测定肺泡灌洗液中白细胞分类,并用苏木素-伊红（HE）染色法观察肺组织病理变化。结果 与对照组比较...     

黄连素调节树突状细胞的表型和吞噬功能研究

目的:探讨黄连素(Ber)对树突状细胞(DC)成熟表型和吞噬功能的影响。方法:用Ber低、中、高浓度处理DC后,用荧光素标记单抗CD11c和异硫氰酸荧光素(FITC)标记单抗主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ)、主要组织相容性复合体II类(MHCⅡ)、CD40、CD54、CD80、CD86、白细胞介素-12 (IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及右旋糖酐(dextran)双标DC,用流式细胞仪检测其表型、细胞因子的表达及吞噬能力的变化。结果:与对照组比较,Ber各浓度组MHCⅠ、MHCⅡ、CD54、CD80、CD86的表达均升高(P<0.05),CD40表达降低(P<0.05);与低浓度组比较,中、高浓度组MHCⅠ、MHCⅡ、CD54、CD86的表达均增加(P<0.05),CD40表达下降(P<0.05);与中浓度组比较,高浓度组MHCⅠ、MHCⅡ、CD54、CD80、CD86的表达均显著增加(P<0.05),而CD40表达下降(P<0.05)。与对照组比较,Ber各浓度组胞内细胞因子IL-12、TNF-α的表达水平均升高(P<0....     

胡蜂毒提取物对胶原诱导性类风湿性关节炎大鼠的作用研究

目的建立胶原诱导性类风湿关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠模型来探讨胡蜂毒提取物对大鼠类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的治疗作用。方法将SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(注射用蜂毒冻干粉,1.25 mg·kg^-1)和胡蜂毒提取物低、中、高剂量(0.125、0.25、0.5 mg·kg^-1)组,除正常组外,其余各组采用多点注射鸡Ⅱ型胶原加完全弗氏佐剂的方法来诱导大鼠RA模型,每7 d一次,共14 d。造模结束后,各给药组于足趾皮下注射对应剂量的药物,连续给药14 d。分别于造模前、造模第14天和给药第14天测量大鼠踝关节直径和周长,并进行AI评分;观察大鼠脏器指数和踝关节组织HE染色的变化;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清中相关炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-8、前列腺素(PG)E-2、环氧化酶(COX)-2和类风湿因子免疫球蛋白(Ig)G、Ig A、Ig M的含量变化;利用流式细胞术检测大鼠脾脏T细胞亚群的变化。结果与模型组比较,胡蜂毒提取物对CIΑ大鼠的关节肿胀(直径及周长)抑制效果显著(P<0.01),能明显降低其AI评分(P<0.01或P<0.05),能不同程度恢复大鼠的脏器指数(P<0.01或P<0.05),改善踝关节组织病理学结构病变,降低大鼠血清中各炎症因子和类风湿因子的表达(P<0.01或P<0.05),调节和改善T细胞亚群比例的紊乱(P<0.01或P<0.05)。结论胡蜂毒提取物对CIA大鼠具有较好的治疗作用,这与其对炎症细胞因子网络的调控和对免疫的调节有关系。     

基于CTA/CTP评价协定方通脑饮改善急性脑梗死痰瘀阻络证患者脑血流动力学疗效

目的 基于头颈部计算机断层扫描（CT）血管成像（CTA）联合颅脑CT灌注成像（CTP）技术,探讨急性脑梗死患者服用中药通脑饮后脑血流灌注的变化。方法 选取江苏省中医院自2018年3月至2023年9月治疗的240例脑梗死痰瘀阻络证患者,随机分为对照组（99例）,通脑饮组（141例）。基于指南对照组采用抗聚、抗凝、降脂稳斑、脑保护及支持治疗等常规治疗方案;通脑饮组在对照组治疗基础上加用中药通脑饮200 mL,早晚温服。两组患者均于入院24 h内行CTA联合CTP检查,并于6个月时复查CTA和CTP。根据北美症状性颈动脉内膜切除试验（NASCET）法判断颅内动脉血管的狭窄程度,并对治疗前后病变区的相对脑血容量（rCBV）、相对脑血流量（rCBF）、平均通过时间（MTT）和达峰时间（TTP）进行比较,并比较两组患者出院6个月不良结局。结果 与本组治疗前比较,通脑饮组患者血管狭窄不同程度明显减轻,差异具有统计学意义（Z=105.369,P<0.01）;对照组患者血管狭窄减轻不明显,差异无统计学意义。与对照组治疗后比较,通脑饮组患者血管狭窄好转率更高（χ²=84.179,P<0.01）,疗效更好（好转率86.5%）。与本组治疗前比较,通脑饮组患者rCBV与rCBF均显著升高（P<0.01）,MTT、TTP有缩短趋势,但差异无统计学意义;对照组rCBV、rCBF、MTT、TTP差异无统计学意义。与对照组治疗后比较,通脑饮组患者rCBV、rCBF均显著升高,MTT、TTP均显著降低（P<0.01）。与本组治疗前比较,通脑饮组患者出院6个月后NIHSS评分显著降低（Z=15.097,P<0.01）;对照组患者出院后6个月NIHSS评分变化较小,差异无统计学意义。与对照组治疗后比较,通脑饮组患者NIHSS评分降低更明显,患者预后更好,差异具有统计学意义（Z=5.96,P<0.05）。出院6个月后通脑饮组患者预后不良风险较对照组明显降低（P<0.05）。结论 协定方通脑饮有较好的改善急性脑梗死患者脑血流灌注的作用,可以作为缺血性脑卒中常规治疗的有效补充以提高临床疗效。     

基于传统品质评价的野生与栽培潞党参比较

目的 从性状、显微、初生与次生代谢产物含量3个方面对野生和栽培潞党参进行系统的比较研究。方法 收集野生及栽培潞党参样品,使用游标卡尺、卷尺及天平测量其性状数据,番红固绿染色法制作石蜡切片并利用光学显微镜观察其显微结构;按照2020年版《中华人民共和国药典》（一部）党参项下浸出物测定方法检测醇溶性浸出物的含量,蒽酮比色法测定淀粉含量,多糖试剂盒测定总多糖含量,纤维分析仪测定纤维类成分含量,超高效液相色谱法（UPLC）测定单糖、二糖及部分次生代谢产物的含量。结合主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）,以变量重要性投影（VIP）值>1、P<0.05为依据,筛选野生和栽培潞党参的关键差异性成分。结果 性状方面,野生潞党参的“狮子盘头”、纵皱纹、根头下环状横纹均比栽培潞党参明显,对比断面特征,野生潞党参的皮部外侧裂隙明显较多,木心较大;显微特征方面,野生潞党参的石细胞较多,木质部占比较大,且木质部存在成环的木栓细胞,栽培潞党参的韧皮部占比较大,导管直径较小且排列疏松。初生代谢产物方面,栽培潞党参的45%乙醇浸出物和总多糖含量均明显高于野生潞党参（P<0.05）;野生潞党参中的木质素、半纤维素、纤维素含量均明显高于栽培潞党参（P<0.05）,野生潞党参中的果糖和葡萄糖含量明显高于栽培潞党参（P<0.05）,蔗糖含量栽培潞党参明显高于野生潞党参（P<0.05）。次生代谢产物方面,栽培潞党参中的色氨酸、党参苷Ⅰ含量均明显高于野生潞党参（P<0.05）,野生潞党参中的党参炔苷宁、党参炔醇、苍术内酯Ⅲ含量则明显高于栽培潞党参（P<0.05）。结论 野生和栽培潞党参在性状、显微及化学成分等方面均存在明显差异。葡萄糖、果糖、蔗糖、党参苷Ⅰ、色氨酸及纤维素类成分为野生与栽培潞党参的关键差异性成分。野生党参中炔类化合物含量和果糖积累较多,栽培党参中党参苷Ⅰ和蔗糖含量较高,但纤维素含量明显较低,这可能与其生长环境、生长年限及栽培方式等相关。基于本研究结果,建议增加炔类化合物、果糖与蔗糖的含量比为指标来表征不同生产方式的党参,以引导党参高品质生产。