改良三维试验与PCR法检测川东北地区产“超-超广谱”β-内酰胺酶革兰阴性杆菌

目的:调查川东北地区临床分离革兰阴性杆菌的耐药情况,建立筛选产超-超广谱β-内酰胺酶(SSBLs)细菌的实验室方法。方法:收集自2008年1月-2009年6月从川北医学院附属医院临床分离的革兰阴性杆菌237株,采用琼脂二倍稀释法测定14种抗生素的最低抑菌浓度(MIC)值,筛选出对头孢西丁和头孢他啶耐药的革兰阴性杆菌,采用改良三维试验与质粒结合实验筛选产SSBLs菌株,运用聚合酶链式反应(PCR)扩增技术检测SSBLs中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型与AmpC基因型。结果:237株革兰阴性菌对多种抗生素存在较高的耐药率。对头孢西丁与头孢他啶同时耐药的革兰阴性杆菌共105株,对这105株革兰阴性杆菌进行改良三维试验与质粒结合实验,筛选出产SSBLs菌株共2株,包括1株阴沟肠杆菌和1株大肠埃希菌,其质粒编码的ESBLs基因型为SHV、TEM、CTX-M,AmpC基因型为ACT。结论:川东北地区首次发现产SSBLs革兰阴性杆菌;改良三维试验与PCR法可以用于确证耐药菌是否产SSBLs。     

尼莫地平对神经元退行性变模型小鼠脑组织中铁离子的影响研究

目的:探讨尼莫地平对神经元退行性变模型小鼠脑组织中铁离子的影响。方法:取小鼠随机分为假手术组(生理盐水)、模型组(生理盐水)和尼莫地平高、中、低(80、40、20mg.kg-1)剂量组,每组35只,后4组脑室内注射0.25氯化铝2μL,每天1次,连续5d,建立神经元退行性变小鼠模型,假手术组注射等体积人工脑脊液;5d后各组灌胃给予相应药物,每天2次,连续30d,末次灌胃24h后观察其脑组织的病理学变化,考察海马组织中丙二醛(MDA)、血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白、铝离子和铁离子水平变化。结果:与模型组比较,尼莫地平高剂量组神经元损伤明显减轻,其中MDA、HO-1蛋白和铁离子水平明显降低(P<0.05);其余指标及尼莫地平中、低剂量组各项指标均无明显变化。结论:尼莫地平可能通过抑制HO-1蛋白表达维持铁离子代谢平衡,发挥缓解神经元退行性变的作用。     

一测多评法测定不同丹参制剂中4个酚酸成分

目的 建立同时适用于5种丹参制剂（丹参片、复方丹参片、冠心丹参胶囊、心可舒片、双丹胶囊）中4个酚酸类成分一测多评的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法,以丹参素为内参物,建立原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B与丹参素的相对校正因子,比较相对保留值法和保留时间差法对成分定位的影响,并采用外标法验证结果的可靠性。结果 采用相对保留值法可对待测成分进行准确定位,所建立的相对校正因子耐用性良好,原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B相对于丹参素的相对保留值分别为1.894、5.379、6.599,相对校正因子分别为6.611、3.845、2.059,采用外标法验证结果无显著性差异。结论 该方法稳定、可靠,可为上述丹参制剂质量控制提供参考。     

五味子中α-葡萄糖苷酶抑制剂对小鼠的降血糖作用

目的探讨五味子所含α 葡萄糖苷酶抑制剂的体内活性。方法以 1 0 0mg/(kg·d)剂量灌胃 ,观察其对小鼠血糖含量以及糖耐量的影响。结果该抑制剂能明显降低正常及四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖 ,降低肾上腺素引起的高血糖 ,提高正常小鼠的糖耐量。结论从中药五味子中分离得到的α 葡萄糖苷酶抑制剂可能具有良好的降糖作用。     

TY602-1的抗凝血作用研究

目的:探讨TY602-1的抗凝血作用及其作用机制。方法:采用离体FⅩa酶活性测定法、小鼠体内凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)和凝血酶时间(TT)的测定实验、大鼠动静脉旁路丝线上血栓形成实验、大鼠下腔静脉血栓模型实验,观察TY602-1的抗凝血药效。结果:TY602-1能抑制FⅩa活性;口服1.25,2.5,5和10 mg·kg-1剂量时明显延长小鼠PT和APTT,但对TT无明显影响;口服10 mg·kg-1剂量能明显抑制大鼠动静脉旁路血栓和下腔静脉血栓形成。结论:TY602-1是一种具有较强抗凝血作用的FⅩa抑制剂,可作为预防和治疗深度静脉血栓和肺动脉栓塞的药物使用。     

布地奈德联合孟鲁司特钠治疗儿童哮喘的临床研究

目的：布地奈德气雾剂联合孟鲁司特钠咀嚼片在支气管哮喘患儿中的应用效果评价。方法将2013年5月~2014年5月深圳市龙岗区第三人民医院儿科门诊接治的70例轻-中度慢性持续期支气管哮喘患儿按照随机数字表法均分2组,在相同常规治疗及护理基础上：研究组35例患儿给予布地奈德气雾剂及口服孟鲁司特钠咀嚼片联合治疗,对照组35例患儿给予布地奈德气雾剂治疗,对两组患儿治疗1个疗程后的哮喘症状评分及随访期间哮喘控制情况进行综合比较。结果治疗1个疗程后,两组患儿日、夜间哮喘症状评分均有明显下降(P<0.05);研究组较对照组下降幅度更为显著(P<0.05);随访期间,研究组哮喘急性发作次数明显少于对照组(P<0.05);研究组无症状天数比例(87.50%)明显高于对照组(71.43%)(P<0.05);两组患儿均无严重药物不良反应情况发生。结论在常规治疗基础上给予慢性持续期支气管哮喘患儿布地奈德气雾剂联合孟鲁司特钠咀嚼片治疗可明显减轻患儿哮喘症状,有利于哮喘症状的长期控制,值得临床推广应用。     

3种海藻多糖抗氧化及其抗衰老活性的初步研究

为探讨海藻多糖抗氧化活性及抗衰老作用,体外测定昆布多糖,羊栖菜多糖,海蒿子多糖对羟基自由基,超氧自由基及其DPPH自由基的清除作用;采用秀丽隐杆线虫为研究模型,在培养基中添加不同浓度的海藻多糖,每日定时观察并记录线虫存活数,计算平均存活率。结果表明海藻多糖具有抗氧化能力,其中1.2mg/mL的昆布多糖羟基自由基清除能力最强,达到92.10%;海蒿子多糖DPPH自由基的清除能力最强,当浓度达到1.2mg/mL时,清除率为59.55%;1mg/mL海蒿子多糖超氧自由基的清除率达15.66%。秀丽隐杆线虫寿命实验表明,不同的海藻多糖均能延长线虫的寿命,且在实验浓度下,多糖浓度越高寿命延长越明显。研究结果表明所选海藻多糖具有显著的体外抗氧化活性,动物实验表明海藻多糖具有抗衰老作用,能显著延长线虫寿命。该结果为海藻多糖应用于医药、保健品领域的开发提供了一定的实验基础。     

食管鳞状细胞癌组织中EphA2和EphrinA1的表达

目的:观察食管鳞状细胞癌(食管鳞癌)组织中EphA2和EphrinA1蛋白及mRNA的表达水平,分析它们与食管癌患者预后的关系.方法:应用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测173例食管鳞癌组织和19例正常食管黏膜组织中EphA2和EphrinA1蛋白表达水平;用激光捕获显微切割(LCM)技术和RT-PCR检测食管鳞癌组织中EphA2和EphrinA1 mRNA的水平.结果:食管鳞癌组织中EphA2阳性表达率80.9%、EphrinA1阳性表达率为84.4%,均明显高于正常食管黏膜(P＜0.05);EphA2和EphrinA1蛋白表达同食管鳞癌患者的年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、组织学分级无关;EphA2蛋白的表达水平与食管鳞癌患者的性别、淋巴结转移有关(P＜0.05),EphrinA1蛋白的表达与食管鳞癌患者的临床分期有关(P＜0.05).生存分析显示:EphA2和EphrinA1蛋白的高表达与食管鳞癌患者的生存期有关.结论:EphA2和EphrinA1蛋白的高表达提示食管鳞癌患者预后不佳.     

用HPLC法测定复方元胡片中延胡索乙素的含量

复方元胡片是由海鳔蛸、地榆、元胡、香附和曼陀罗叶5种中药材组成的复方制剂，将以上5味药材碎成细粉，过筛、混匀，加入10％淀粉糊精，制成颗粒过20目筛，制粒、干燥，制成片剂，片重为0．5g。方中元胡、香附理气疏郁；海鳔蛸、地榆制酸收敛；曼陀罗叶缓急止痛。它们的综合作用可以制酸收敛、缓急止痛，故可以治疗慢性胃炎，胃及十二指肠溃疡。为控制产品质量，本研究在文献的基础上进行改进，对片剂中延胡索乙素的含量进行测定。     

下调 HOX转录反义 RNA对三阴性乳腺癌细胞 MDA-MB-231增殖、周期及侵袭能力的影响

目的 研究下调HOX转录反义RNA(HOTAIR)水平对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞MDA-MB-231增殖、周期及侵袭能力的影响.方法 si-HOTAIR对MDA-MB-231细胞转染,实验分为对照组、si-阴性对照组、si-HOTAIR组,实时荧光定量法测定转染后MDA-MB-231细胞中HOTAIR表达水平;分别用MTT法、流式细胞仪、Transwell小室实验测定转染后MDA-MB-231细胞活性、周期、侵袭能力;蛋白印迹法(WB)测定转染后MDA-MB-231细胞中c-myc、Ki-67、PCNA、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达水平.结果 与MCF-10A细胞组相比,对照组MDA-MB-231细胞中HOTAIR表达水平升高[(1.85±0.21)比(1.06±0.13),P<0.05].与对照组、si-阴性对照组相比,si-HOTAIR组MDA-MB-231细胞中HOTAIR表达水平(1.34±0.15)、细胞活性(98.04±6.28)％、侵袭能力(35.66±8.04)降低(P<0.05),细胞G0/G1期下调,阻滞在G2/M期;与对照组、si-阴性对照组相比,si-HOTAIR组MDA-MB-231细胞中c-myc、Ki-67、PCNA、MMP-9、MMP-2表达水平降低(P<0.05).结论 HOTAIR在MDA-MB-231细胞中高表达,下调HOTAIR表达水平可抑制MDA-MB-231细胞增殖、阻滞细胞周期、降低肿瘤细胞侵袭能力.