流式免疫微球芯片技术分析特异性血小板自身抗体

目的建立流式免疫微球芯片技术（FCIBA）分析特异性血小板自身抗体的新方法。方法使用不同红色荧光强度的微球，包被不同血小板膜蛋白单克隆抗体（抗GPⅡb／Ⅲa、抗GPⅠa／Ⅱa、抗GPⅣ、抗GPⅠb／Ⅸ和抗HLA-ABC单克隆抗体），制备特异性血小板自身抗体检测微球，用流式细胞仪检测微球捕获的血小板抗原-自身抗体复合物，检测结果与微孔板改进抗原捕获ELISA（MACE）进行比较，并检测了部分免疫性以及非免疫性血小板减少性紫癜患者血清中的5种特异性血小板自身抗体。结果FCIBA分析抗GPⅡb／Ⅲa、抗GPⅠa／Ⅱa、抗GPⅣ、抗GPⅠb／Ⅸ和抗HLA-ABC5种特异性血小板自身抗体，批内重复性变异系数（CV）分别为4．82％、6．09％、5．04％、5．73％、5．30％；稀释试验呈对数线性相关，相关系数（r）分别为0．9972．0．9966．0．9988．0．9965、0．9982；新方法对5种特异性血小板自身抗体的分析结果均与MACE试验结果高度相关，r值分别为0．9289、0．9224、0．8894、0．9100、0．9134（P均〈0．01）。新方法分析98例免疫性血小板减少性紫癜患者的血清样本，血小板特异性自身抗体检出的阳性率为51．69％；其中，抗GPⅡb／Ⅲa为40．82％，抗GPⅠa／，Ⅱa为24．45％，抗GPⅣ为19．39％，抗GPⅠb／Ⅸ为32．65％，抗HLA-ABC为17．35％。新方法分析40例非免疫性血小板减少性紫癜患者的血清样本，阳性率为0。结论本研究建立了FCIBA分析特异性血小板自身抗体的新方法，可同时分析抗血小板GPⅡb／Ⅲa、GPⅠa／，Ⅱa、GPⅣ、GPⅠb／Ⅸ和HLA-ABC5种特异性血小板自身抗体。     

Real Time-PCR法检测BAFF分子在肾移植受者外周血单个核细胞中的表达

目的探讨BAFF分子在肾移植受者外周血单个核细胞的表达情况，并初步探讨该分子与肾移植免疫的关系。方法采用适时定量聚合酶链反应（Real Time-PCR）分别检测肾移植术后1年以内、术后1～3年、术后3年以上患者外周血淋巴细胞B淋巴细胞活化因子（BAFF）分子的表达水平，同时取健康志愿者作对照。结果术后1～3年、术后3年组的BAFF分子的表达均高于健康对照组（P〈0．01），术后1年以内组和健康对照组无明显差异（·P〉0．05）。结论BAFF分子的表达水平有随着移植时间增加而增加的趋势，并有可能参与了肾移植术后的免疫反应。     

蚕丝蛋白膜法在粪便隐血试验中的应用评价

目的 通过几种隐血试验方法的比较，了解蚕丝蛋白膜法检测大便隐血试验方法的可靠性。方法 以世界卫生组织和世界胃肠镜检查协会推荐作为粪便隐血试验较为确认的胶体金免疫法为标准，同时用蚕丝蛋白膜法（自制）、免疫法（便隐血胶体金）、化学法（纸片法和联苯胺法）进行灵敏度、特异性、抗干扰和盲测试验。结果 蚕丝蛋白膜法和便隐血胶体金法的灵敏度为0．1μgHb／ml。特异性：只与人血红蛋白反应，与其它动物血不反应；与胶体金法盲测结果无明显差异（P〉0.05），与化学法（纸片法和联苯胺法）相比有非常显著性差异（P〈0．01）。90例经便隐血胶体金法确证为阳性的标本，蚕丝蛋白膜法90例结果全部呈阳性，符合率100％。结论 经临床应用结果证明，此法简便快速，灵敏度高，特异性强，适合临床应用。     

18S rRNA基因序列分析在临床常见酵母样真菌鉴定中的应用

目的 应用18S rRNA基因序列分析技术对临床分离的常见酵母样真菌进行种的分类鉴定,且与传统方法比较,分析基因序列分析法鉴定临床常见酵母样真菌的可行性.方法 收集北京同仁医院微生物室菌库酵母样真菌115株,提取的DNA用18S rRNA通用引物进行PCR扩增,扩增产物直接测序,测序结果提交GenBank通过核酸序列比对对微生物种属进行鉴定,同时进行真菌显色培养基鉴定、Vitek 32 YBC鉴定,比较3种不同方法鉴定酵母样真菌的种鉴定准确率,阐明应用基因序列分析法鉴定临床酵母样真菌的可行性.结果 18S rRNA基因序列分析法与表型鉴定法相比较,有13株酵母样真菌鉴定结果存在差异:显色培养基仅鉴定出102株,与基因序列分析鉴定的符合率为89.2%(91/102),Vitek 32 YBC鉴定结果与基因序列分析鉴定的符合率为91.3%(105/115);显色培养基、Vitek 32 YBC和18S rRNA基因序列分析鉴定到种的比例分别为88.7%(102/115)、100%(115/115)、100%(115/115).结论 18S rRNA基因序列分析法呵对常见酵母样真菌进行准确分类.     

输卵管支原体感染不孕妇女输卵管液中TNF-α、IFN-γ和IL-6的水平

【目的】研究支原体感染导致的输卵管不孕患者输卵管液中TNF-α、IFN-γ和IL-6水平。【方法】对179例不孕妇女,应用微量肉汤稀释法检测输卵管液支原体感染情况,双抗体夹心酶联免疫吸附法检测TNF-α、IFN-γ和IL-6含量。【结果】179例不孕妇女中显示支原体阳性者97例,其中Uu阳性者91例,Mh阳性者23例,两种支原体均阳性者17例,未检测出支原体者82例。支原体阳性患者血清TNF-α含量为(171.1±21.4)ng/ml,阴性者血清TNF-α含量为(113.7±35.5)ng/ml;阳性患者血清IFN-γ含量为(70.4±11.2)pg/ml,阴性者血清IFN-γ含量为(38.9±12.9)pg/ml;阳性患者血清IL-6含量为(48.9±5.2)pg/ml,阴性者血清IL-6含量为(26.4±4.7)pg/ml;阳性者血清TNF-α、IFN-γ、IL-6均高于阴性者,差异有显著性(P<0.05)。且阳性组TNF-α和IL-6含量成正相关(r=0.893,P<0.05)。【结论】认为支原体感染引起的输卵管炎症导致不孕可能与TNF-α、IFN-γ和IL-6升高有关。     

HBV-HCV-HIV三联荧光PCR检测的内标浓度选择研究

目的选择一个在乙型肝炎病毒-丙型肝炎病毒-人类免疫缺陷病毒(HBV-HCV-HIV)三联荧光PCR检测试验中既可有效监控假阴性结果出现,又对阳性结果影响最小的内标浓度。方法应用不同浓度的内标参入酶链聚合反应(PCR)反应,确定最佳内标参入量;并在适量内标浓度下,检测低浓度标本的阳性检出率。结果由内标浓度5拷贝/PCR、10拷贝/PCR、20拷贝/PCR、50拷贝/PCR、100拷贝/PCR 5个浓度中,优选出最适的内标浓度为20拷贝/PCR,此条件下,阴性标本的内标检出率为100%,检测灵敏度标本的阳性检出率与无内标样本差异无统计学意义。结论合适浓度的内标参与荧光PCR检测能有效地解决了每个标本的质控问题,指示反应体系(试剂耗材)与检测体系(仪器)的有效性。     

医院感染脑膜炎败血性金黄杆菌的分布及耐药性分析

目的了解我院脑膜炎败血性金黄杆菌的分布和耐药性。方法统计分析我院近5年来分离的73株脑膜炎败血性金黄杆菌的耐药情况；用双纸片协同试验筛选金属β-内酰胺酶。结果脑膜炎败血性金黄杆菌产金属β-内酰胺酶为37．0％，主要分布在重症监护（ICU）病房，哌拉西林／他唑巴坦、万古霉素和利福平耐药率较低，分别为45．2％、40．6％和28．5％。结论脑膜炎败血性金黄杆菌表现为多重耐药，临床医师应根据药敏试验合理选择抗菌药物。     

听障者就医沟通需求初探

目的 了解听障者在门诊或病房就医时对医护-患沟通内容的需求,为编制临床沟通手语教材提供依据.方法 采用立意取样法和半结构式访谈法.共访谈了6名符合要求的昕障者,每位访谈持续20～40 min,访谈全程录像录音,由专人进行转录,对转录文本进行内容分析.结果 听障者的就医沟通需求可归结为3个主题:需要手语翻译、需要信息和知识及需要社会心理及情感支持.需要手语翻译是指需要懂手语的人协助就医和需要医护人员能用浅显易懂的日常用语代替专业术语,而所需要的知识和信息包括病情、药物治疗和自护活动3方面. 结论 听障者就医时存在明显的医护-患沟通障碍,临床急需懂得基本手语的医护人员,促进无障碍就医环境的建设.     

实时三平面与单平面心肌超声造影评价正常犬心肌血流灌注的定性及定量研究

目的 探讨实时三平面和单平面心肌超声造影技术评价正常犬心肌血流灌注的价值.方法 15只健康杂种犬开胸后经股静脉持续匀速推注造影剂(C3F8),在三平面心腔造影条件下,实时观察所有心肌内微气泡"从无到有再到稳定状态"的充填全过程;达稳定状态后,再行实时单平面心肌超声造影技术观察微气泡被Flash破坏后心肌内微气泡再充填到稳定状态的过程.两种观察方法均用单指数函数Y=A×(1-e-βt)+B来拟合时间一强度曲线,测量A值(平台期峰值强度)和β值(曲线斜率)来定量分析心肌血流灌注状态.结果 心肌内做气泡"从无到有再到稳定状态"的充填过程与Flash后心肌内微气泡再充填达稳定状态的时间一强度曲线相似,曲线均为先上升,后达到平台期.实时三平面心肌超声造影技术能同步评价所有各心肌节段的血流灌注,心肌血流量(At×βt)心尖段(0.40±0.12)＜中间段(0.78±0.30)＜心底段(1.04±0.34),各组问差异均有统计学意义(P＜0.01).实时单平面心肌超声造影则只能通过分次观察心尖四腔、两腔和左室长轴观来评价各心肌节段的血流灌注.心肌血流量(As×βs)心尖段(11.2±4.1)＜中间段(12.4±5.8)＜心底段(12.8±5.8),各组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 实时三平面和单平面心肌超声造影技术获取的微泡灌注的时间-强度曲线相似,两种方法均可用于评价心肌血流灌注.     

肢带型肌营养不良家系的临床及电生理分析

目的分析肢带型肌营养不良（LGMD）家系的临床与电生理特点。 方法调查LGMD家系（35人）中的27人，14人接受神经电生理检查（10例无临床表现，4例有临床表现），包括肌电图（EMG）、运动神经传导速度（MCV）和感觉神经传导速度（SCV）。 结果有临床表现的4例患者中，3例于青少年时期发病，临床症状典型，表现为四肢进行性无力，Gower征阳性，出现鸭步，肌萎缩主要分布于近端肌，无腓肠肌肥大等；1例患者临床症状不典型。4例患者神经电生理检查结果显示，MCV和SCV均正常，3例EMG呈神经源性损害，1例EMG呈混合性损害。 结论同一家系中的LGMD患者，病程越长，临床表现越典型；神经电生理检查中，EMG以神经源性损害为主，而MCV和SCV正常。