小儿肾母细胞瘤转化生长因子β1的表达及临床意义

目的　探讨转化生长因子 β1与小儿肾母细胞瘤的临床分期、病理类型及转移和预后之间的内在联系。方法　采用免疫组织化学过氧化物酶法 (SABC法 ) ,对 31例肾母细胞瘤组织标本进行转化生长因子 β1表达的检测 ,并对 2 1例患儿进行了 2年以上的随访。结果　肾母细胞瘤组织中 ,转化生长因子 β1的总阳性表达率为 38.7% ( 12 /31)。其中 ,肿瘤的临床分期之间和病理类型之间转化生长因子 β1的阳性表达均有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ,而且与肿瘤是否发生肺部转移密切相关 (P <0 .0 5 )。转化生长因子 β1表达阳性者 2年生存率为 2 5 .0 % ( 2 /8) ,而表达阴性者生存率则为 92 .3%( 12 /13) ,二者比较存在显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　小儿肾母细胞瘤组织中存在转化生长因子 β1的高表达 ,与肿瘤的临床分期、病理类型相关 ,而且与肿瘤细胞的侵袭能力及病程密切相关。转化生长因子 β1有可能成为肾母细胞瘤预后的重要指标之一。     

疫苗时代麻疹流行病学研究进展

麻疹是一种急性呼吸道传染性疾病,严重危害儿童健康.进行麻疹疫苗计划免疫之后该病的发病率明显下降,但是近年来发病率和病死率义呈现上升趋势.该文对近年麻疹的流行病学趋势及病毒分子特征进行分析,并以此为切入点,阐述麻疹病毒基因型的变化及大体分布,提出目前正在我国流行的优势毒株主要是H1基因型,为阻断麻疹传播,降低发病率和病死率,最终达到消除麻疹的全球性目的提供参考.     

应用高效液相色谱法检测男性不育患者精浆丙二醛水平

目的:探讨高效液相色谱法(HPLC)检测精浆中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平的意义。方法:93例不育男性分为:阻塞性无精子症组(12例);非阻塞性无精子症组(15例);少精子症组(21例);弱精子症组(19例);少弱精子症组(16例);少弱畸精子症组(10例)。18例生育男性作为对照组。采用HPLC检测生育与不育男性精浆MDA含量。结果:生育组精浆MDA值除与阻塞性无精子症组差异无显著性(P>0.05)外,与其他各组相比均有极显著性差异(P均<0.01)。各不育男性组间精浆MDA值也有统计学差异。结论:应用HPLC检测精浆MDA水平是诊断活性氧产生过高所致男性不育的一个重要指标。     

hCGβ-C3d3融合蛋白免疫BALB/c小鼠及其抗血清对hCG诱导鼠子宫增重的抑制效应

目的:通过分子佐剂C3d3增强hCGb避孕疫苗的免疫原性。方法:采用分子生物学技术以phCMV1为载体分别构建分泌型、带有6个组氨酸纯化标签的真核表达质粒phCMV1-6His-hCGb-C3d3和phCMV1-6His-hCGb,在CHO细胞中获得稳定、高效表达的重组蛋白,并用镍柱和凝胶过滤层析对其进行分离、纯化。分别用hCGb-C3d3融合蛋白和单用hCGb间隔4周两次免疫生育期雌性BALB/c小鼠,ELISA测定血清中抗hCGb抗体滴度,并对各组小鼠产生的抗血清拮抗hCG诱导的小鼠子宫增重效应进行比较。结果:C3d3使hCGb蛋白疫苗的免疫原性增强1 995倍,hCGb-C3d3融合蛋白免疫小鼠产生的抗血清具有很强的抑制小鼠子宫增重作用。结论:通过分子佐剂C3d3可以大幅提高机体对hCGb的体液免疫应答能力,hCGb-C3d3融合蛋白免疫小鼠产生的抗血清对hCG的生物学作用具有更强的抑制效应。     

新生儿窒息肺动脉压力变化的无创性动态监测

目的　研究新生儿窒息后肺动脉压力的变化特点及临床意义 ,提供简便无创的检测方法。方法　应用彩色脉冲多谱勒超声于生后 2 4h内、3、7及 12～ 14d分别检测了 30例窒息新生儿及 2 5例正常新生儿左 /右心室射血前期、左 /右心室射血时间及其比值的变化 ,并依此推算肺动脉压力。结果　窒息与正常新生儿肺动脉压力在 2 4h内分别为肺动脉舒张压 (5 5 1± 17 3)mmHg对 (15 0± 3 0 )mmHg ,肺动脉阻力 (14 2± 3 9)mmHg/(L·min·m2 )对 (5 3± 1 3)mmHg/(L·min·m2 ) ,肺循环阻力 /体循环阻力比值 (0 84± 0 4 7)对 (0 2 7± 0 2 0 ) ,差异极显著 ,P <0 0 1。至生后 1周末 ,两组婴儿上述各指标间均无明显差异。结论　肺动脉高压是新生儿窒息的重要病理生理变化 ,在生后 1周内应重视对窒息新生儿肺动脉压力的检测。多谱勒超声心动图简便、无创 ,适于观察新生儿肺动脉压力的变化     

胆酸钠对人卵巢癌细胞系作用的研究

目的 探讨胆酸钠单独应用及联合全反式维甲酸对2株卵巢癌细胞系(COC2、CAOV3)的体外抑制作用。方法 2003年5～8月对经不同浓度的胆酸钠及胆酸钠联合全反式维甲酸作用后的两株细胞采用MTT比色法测定细胞生长抑制率，流式细胞仪测定细胞周期变化，并行培养细胞的光镜、电镜观察。结果胆酸钠对两株细胞的抗增殖活性在50～150mg／L范围内呈现剂量依赖效应，并且在两药合用时此作用更明显；单用胆酸钠及两药联合应用均能随用药浓度而明显增加G0／G1期细胞比例，降低S、G2／M期比例，并以两药合用更为明显；光镜、电镜结果显示：胆酸钠100mg／L组与全反式维甲酸10μmol／L组细胞形态变化相似，但两者合用时细胞凋亡明显。结论 在两株卵巢癌细胞中胆酸钠不但具有单独而且有协同全反式维甲酸抑制肿瘤的作用，胆酸钠能明显降低全反式维甲酸的用量从而减少其副反应，并且不降低其抗肿瘤作用。     

药物代谢酶维生素E琥珀酸酯抑制苯并(a)芘

目的　探讨药物代谢酶在维生素E琥珀酸酯 (VES)抑制苯并 (a)芘毒性中的作用。方法　建立B(a)P诱导的小鼠前胃癌模型 ,观察不同途径投予VES对前胃癌的抑制作用。再选择最佳途径观察两相药物代谢酶在此过程中的变化。采用免疫荧光光度法检测小鼠肝脏微粒体 (S - 9组分 )中Ⅰ相药物代谢酶乙氧基异吩恶唑 0 -脱乙基酶(Ethoxyresorufin 0 -deethylase,EROD)活性 ;应用试剂盒测定S - 9组分中Ⅱ相药物代谢酶谷胱甘肽 -S -转移酶(GST)活性。结果　经口投予和腹腔注射VES均可明显降低B(a)P诱导的小鼠前胃癌的发生。VES可显著降低肝脏Ⅰ相药物代谢酶乙氧基异吩恶唑 0 -脱乙基酶 (EROD)的活性 (39 1± 3 0 5 ) ,与阳性对照组 (5 7 9± 3 16 )比较 ,有显著性差异。结论　VES可降低B(a)P诱导的小鼠前胃癌 ,作用机制可能是通过影响肝脏药物代谢酶的活性来实现。     

甲硫腺苷磷酸化酶在非小细胞肺癌中转录表达

目的 探讨甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)及其连锁基因p14，p15和p16在非小细胞肺癌中的转录表达变化情况。方法 采用RT-PCR方法检测15例新鲜肺癌标本及相应癌旁组织中MTAP及其边锁基因p14、p15和p16mRNA的表达情况。结果 MTAP在73．3％的肿瘤标本中不表达或转录水平降低5倍以上，而MTAP在癌旁对照组织中的表达率却高达93．3％；此外，MTAP在肺腺癌和鳞癌中的低表达现象无显著性差异，但在中／低分化肺癌中低表在显著高于高于分化癌。对7例标本分析表明，1例P15基因在正常组织及癌瘤中都高水平表达，1例均不表达。5例在癌标本中基本不表达．而在正常组织中表达；而p14和p16正常组织中转录表达水平很低，而在配对的7例肺癌组织中却分别有3项高表达。结论 MTPA基因低表达或丢失可能与肺癌的恶性程度密切相关，MTAP的缺失可能独立于p16之外，提示MTAP的低表达或缺失在肿瘤生物学中有其功基础的基础。     

华支睾吸虫表膜相关抗原重组表达载体的构建

目的通过筛选cDNA文库识别华支睾吸虫新基因,并构建20.8?kDa华支睾吸虫表膜相关抗原(CSTA20.8)重组表达载体,为进一步研究其功能及其应用奠定基础.方法对华支睾吸虫cDNA文库进行筛选,通过NCBI和ExPasy网站的Blast程序进行序列比对,识别华支睾吸虫新基因,并应用Motifscan、NCBI Conserved Domain Search等程序对其进行结构域分析.将所发现的华支睾吸虫表膜相关抗原基因编码区定向克隆到原核及真核表达载体PGEX-4T-1和PcDNA3上,构建的PGEX-4T-1-CSTA20.8、PcDNA3-CSTA20.8重组表达质粒经PCR、双酶切及测序证实.结果发现华支睾吸虫表膜相关抗原基因,完整阅读框含555个碱基,编码184个氨基酸,理论分子量为20.8kDa,理论pI为4.33.序列分析表明,华支睾吸虫CSTA20.8编码氨基酸序列与其它物种有较高的同源性,CSTA20.8具有完整的钙结合蛋白保守功能域.所构建的重组原核和真核表达质粒经PCR、双酶切及测序证实与目标基因相符.结论发现华支睾吸虫表膜相关抗原基因,并成功构建原核和真核重组表达质粒.     

外周微量血单细胞凝胶电泳技术的正交试验

目的研究外周微量血单细胞凝脉电泳技术的最佳实验条件.方法采用四因素三水平的正交表L9(34)对电泳电压、电泳时间、解旋时间、铺胶层数四因素作正交试验.结果解旋时间为最主要影响因素,其次分别为铺胶层数、电泳时间和电泳电压;并且各因素下的第一水平为最佳水平.结论外周微量血单细胞凝胶电泳技术的最佳实验条件为:解旋20min、铺胶3层、电泳20?min、电泳电压20V.