利用稻瘟霉分生孢子跟踪分离面包海星中的海星皂苷活性成分

目的研究面包海星中的海星皂苷活性成分。方法以稻瘟霉模型进行活性监测，采用多种层析手段和波谱技术对海星皂苷活性成分跟踪分离并鉴定其结构。结果分离获得14个海星皂苷，鉴定了其中12个结构(1～12)，包括7个新的海星皂苷(6～12)。其中大多对稻瘟霉显示活性且对K-562和BEL-7402肿瘤细胞株显示显著或中等强度的细胞毒性，2个皂苷有溶血作用。结论利用稻瘟霉模型对海星皂苷活性成分进行跟踪分离是可行的，该研究也为进一步开发抗肿瘤新药提供了有价值的先导化合物和科学依据。     

婴儿双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统的构建(英文)

目的构建婴儿双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶靶向性基因治疗系统。方法 PCR 扩增 CD 基因,EcoR Ⅰ,BamH Ⅰ对 CD 基因和 pGEX-1LamdaT 质粒同时进行双酶切,获得4.9 kb、1.3 kh 两个 DNA 片段。T4 DNA 连接酶连接这两个片段构建重组的CD/pGEX-1LamdaT 质粒,然后用电穿孔法将重组质粒转染婴儿双歧杆菌。从阳性转染的婴儿双歧杆菌中提取重组质粒,双酶切后检测切取片段长度,采用 Sanger 双脱氧链终止法对提取的重组质粒中的插入片段进行测序。结果从阳性转染的婴儿双歧杆菌中获得了6.2 kb大小的重组质粒,该质粒经双酶切后,得到了4.9 kb 和1.3 kb 两个长度的片段,其长度分别与 pGEX-1LambdaT 及 CD 基因的长度相同。测序结果显示,提取的重组质粒中插入的基因片段全长及核苷酸序列与 CD 基因完全相同。结论外源性 CD 基因被准确插入 pGEX-1LambdaT 质粒并转入婴儿双歧杆菌中,婴儿双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶靶向性基因治疗系统被成功构建。     

塞来昔布对人鼻咽癌CNE-2细胞生长抑制及放射增敏研究

Objective To investigate the growth inhibition and radiosensitization of Celecoxib in hu-man nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-2. Methods CNE-2 growth inhibition by Celecoxib was eval-uated by MTT method. Apoptosis-related changes in morphology were observed by transmission electron mi-croscopy (TEM). Cell cycle distribution and apoptosis rate were measured by flowcytometry (FCM). The ex-pression of COX-2 protein was observed by SP method after the treatment of Celecoxib. Cells were randomly planted into four groups: irradiation control(Ci), drug group(Cd), irradiation group(R), and Celecoxib plus irradiation group(D+R). Single irradiation of 2,4,6,8,and 10 Gy were administered for colonogenic assay. Cell cycle distribution and apoptosis rate were analyzed at 6 Gy irradiation. Results The growth of CNE-2 cell was inhibited by celecoxib in a dose-and time-dependent manner, the IC50 was 80 μmol/L After the treatment, cell ratio of GO and G, phases was increased (47.03±2.76 vs 56.17±1.95, t=4.68, P= 0.010), whereas the ratio of S and G2/M phases was decreased (33.07±1.86 vs 24.87±1.76, t=5.54, P = 0.010; 19.30±0.53: 17.73±0.83, t=2.75, P=0.050), and the apoptosis rate was increased (1.57±0.47:10.47±0.31, t = 27.39, P = 0.000) in a dose-dependent manner. Apoptosis with nuclear chromatin condensation, fragmentation and cell shrinkage was found by TEM. SP method showed that Celeib decreased COX-2 expression (17.48±0.34 vs 12.82±0.51,t=13.20,P =0.00). The sensitivity ratio(D0) was 1.15. FCM showed that the percentage of cells in G2/M phase was significanty more in R and D+R groups than in Ci and Cd groups (68.00±1.65,54.27±5.74,17.60±0.80,14.86±1.23, t=47.70,P=0.000; t=11.63, P=0.000), and also significantly different between R group and D + R group (t=3.99, P= 0.020). The apoptosis rate was higher in R and D + R groups than Ci and Cd groups(4.83±0.97,9.50± 1.35,1.33±0.86 and 2.28±0.42,t=4.67,P=0.010;t=8.81, P=0.000), D + R group than R group(t =4.85,P=0.010). Conclusions Celecoxib can markedly inhibit the growth and induce apoptosis in CNE-2 cells,which may depend on COX-2 pathway. Celeeoxib potently enhances the radiosensitivity of CNE-2 cells,which may due to the repair inhibit of radiation-induced DNA damage, inhibit of cell proliferation,and enhancement of cell apoptosis after irradiation.     

心安颗粒中苦参碱含量测定方法的研究

目的:对心安颗粒中指标成分苦参碱含量测定方法进行研究。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱 Phenomenex Luna C_(18)(4.6mm×150mm,5μm);流动相为甲醇-水-三乙胺(50∶50∶0.04);流速1.0mL·min~(-1),检测波长220nm。结果:本法平均回收率97.00%(n=6)。结论:建立了一种操作简便、重复性良好的高效液相色谱法测定心安颗粒中苦参碱,该法可用于心安颗粒质量控制。     

川芎配方颗粒剂的制备工艺研究

目的　通过考察川芎配方颗粒剂的含量稳定性,确定最佳制剂工艺。方法　将制剂置于恒温恒湿条件下,按规定时间取样,考察主要有效成分含量。结果　制剂Ⅱ含量稳定性优于制剂Ⅰ。结论　将川芎挥发油制成β环糊精包合物,稳定性好,可推广至其它中药配方颗粒剂的制备。     

4-[4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基]丁胺的合成

以3-乙酰基吡啶为起始原料,经肟化、磺酰化、氧化、环合、还原得到3-(咪唑-4-基)吡啶,再经与N-(4-溴丁基)邻苯二甲酰亚胺缩合及肼解等反应制得抗菌剂泰利霉素的特定侧链化合物4-[4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基]丁胺,总收率24%.     

COX基因多态性与缺血性卒中的相关性研究

【摘要】 目的 探讨环氧合酶(COX)代谢通路基因多态性及其与缺血性卒中发病率的关系。方法 将2013年2月~2015年11月在德阳市人民医院和温州医科大学第三附属医院神经内科住院经头颅CT和MRI检查确诊的299例急性缺血性卒中患者,根据彩超结果分为颈动脉易损斑块组（VP）94例、稳定斑块组（SP）74例和无斑块组（NP）131例;同时再分为颈动脉内膜增厚组（IT）108例和非内膜增厚组（NT）191例。使用聚合酶链反应和质谱分析测定基因多态性,包括前列腺素合酶1(PTGS1 rs1236913)、前列腺素H合酶2(PTGS2 rs689466)、血栓素A2合酶(TBXAS1 rs2267679、rs41708、rs194149)、前列腺素E合酶(PTGES2 rs6478818)、环前列腺素合成酶(PTGIS rs5602、rs5629)。结果 在易损斑块组和无斑块组之间TBXAS1 rs194149 GG基因型(P=00281),PTGIS rs5602 CT基因型(P=00319)存在显著差异。内膜增厚组和非内膜增厚组之间PTGS2 rs689466 GG基因型(P=00216)显示显著差异。多元回归分析显示,PTGIS的AA基因型(P=00308,OR:0275,95%CI:0079～0955)和PTGS2的AG+ GG基因型(P=00065,OR:2162,95%CI:1232～3795)是内膜增厚的破坏性因素。结论 COX的单核苷酸多态性(SNP)与脑梗死的发病率存在相关性,PTGIS和PTGS2基因多态性与内膜增厚脑卒中患者相关。     

结直肠癌根治性手术联合免疫治疗的临床应用研究进展

结直肠癌（CRC）是临床常见的消化道恶性肿瘤之一,具有较高患病率及复发转移风险,其起病隐匿且危害性强,临床须及时诊断并采取对症治疗以提高患者预后质量,降低不良结局风险。目前根治性手术是治疗CRC的最有效方法之一,通过切除病灶达到病情控制目的,但该治疗策略仍存在一定复发转移风险,临床多采用CRC根治性手术联合免疫治疗策略。近年来随着肿瘤免疫技术及理念的发展,免疫疗法的疗效及安全性也持续提高。根据现有研究进展,肿瘤疫苗、过继T细胞疗法（ACT）、免疫检查点抑制剂（ICI）及其他免疫疗法对于杀死CRC细胞,减轻肿瘤负担,降低CRC根治性手术后的复发风险有着重要价值。阐明CRC根治性手术联合免疫治疗的临床应用进展现状,以及治疗作用机制,可为CRC患者病情控制及防止复发转移提供更可靠的依据。     

丁基苯酞对放射性脑损伤模型大鼠皮质AQP4表达影响的观察

目的:观察丁基苯酞对单次全脑照射后大鼠大脑皮质水通道蛋白4 (AQP4)表达的影响.方法:将雄性SD大鼠60只随机分为假照射组、单纯照射组和丁基苯酞组,采用10 Gy单次全脑照射模型,制模后丁基苯酞组大鼠分别按剂量0.3、1.0和3.0 mg/kg丁基苯酞腹腔注射;依文思蓝(EB)法评价血脑屏障通透性改变;免疫组织化学法检测皮质AQP4表达的变化.结果:单纯照射组大鼠脑组织EB含量为(1.62±0.18) μg/g,与假照射组的(0.58士0.11)μg/g比较,差异有统计学意义,P=0.006;照射后1周单纯照射组大鼠脑组织皮质AQP4表达(1.67±0.63)较对照组(4.00土0.32)降低,P=0.004.与单纯照射组比较,不同剂量丁基苯酞组大鼠脑组织EB含量均降低(0.3mg/kg组,P=0.002;1.0 mg/kg组,P=0.004; 3.0mg/kg组,P=0.003);照射后1周不同剂量丁基苯酞组皮质AQP4表达有不同程度增加,呈现剂量依赖性(0.3mg/kg组,P=0.035;1.0 mg/kg组,P=0.042; 3.0 mg/kg组,P=0.006).结论:大鼠全脑照射后皮质AQP4表达呈时程性变化,丁基苯酞对AQP4有调节作用.     

芒果苷诱导白血病K562细胞凋亡机制的研究

目的研究芒果苷诱导慢粒白血病细胞系K562细胞凋亡的机制。方法采用RT-PCR检测芒果苷(25~200μmol/L)处理(24、48、72、96h)后K562细胞中bcl-2 mRNA、bax mRNA、survivin mRNA基因表达变化;采用Western blotting方法检测K562细胞BCR/ABL融合蛋白质P210水平。结果芒果苷作用K562细胞后,P210蛋白质水平下调,并呈时间及剂量依赖性,bax基因表达显著上调,bcl-2基因表达轻度下调,survivin mRNA基因表达下调。结论芒果苷诱导K562细胞凋亡的机制可能是通过下调BCR/ABL融合蛋白质P210、bcl-2和sur-vivin mRNA基因表达及上调bax基因表达来实现的。